《miRNA-1和miRNA-133在缺血後處理的心肌保護機制中的調控作用研究》是依託上海交通大學，由何斌擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miRNA-1和miRNA-133在缺血後處理的心肌保護機制中的調控作用研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：何斌
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
缺血後處理（IPost）可產生強大的心肌保護作用，但機制尚不清楚，可能與抑制促凋亡基因的表達有關。近年發現的miRNA可通過抑制靶基因，進而在基因的轉錄後調控中發揮重要作用。我們預實驗發現，心肌特異性miRNA-1和miRNA-133在心臟IPost後的表達明顯上調，且這些miRNA的靶基因中含有促凋亡基因，提示Ipost心肌保護作用的產生可能與這些miRNA調控促凋亡基因的表達有關。本項目擬在大鼠IPost模型基礎上，選擇miRNA-1和miRNA-133作為切入點，採用生物信息學等方法確認想墊頸戰上述miRNA調控的凋亡相關靶基因，構建miRNA腺病毒載體，分別在細胞水平和心臟水平上調/下調上述miRNA，檢測對其靶基因如何調控進而干預細胞凋亡。本項目為闡明miRNA-1和miRNA-133在IPost心肌保護中的調控作用提供實驗依據，這些愚墊miRNA功能的揭示還可能為藥物研發提供新的基因靶點。
結題摘要
缺血性心臟病的基因治療已成為當今生物醫學領域內備受關注的研究熱點。在青年科學基金項目的資助下，我們也對這一熱點進行了深入研究，現已發表相關文章9篇，其中SCI收錄6篇，最高影響因子7.1分。該項目所取得的學術成績不僅僅是發表了多篇SCI論著，更重要的成果是培養了多名年輕的科研骨幹，本項目先後資助培養了6名研究生。隨著該項目的深入研究，又有了新發現和新創意，本項目組成員又申請到包括國基金青年-面上連續資助項目在內的7項新的科研項目。本項目研究發現，缺血後處理（IPost）的心肌保護作用與其調控凋亡相關基因（ET-1、Caspase、Bcl-2/BAX等）的表雅槳凶雄達有關，而miRNA-1、miRNA-133a和miRNA-204均參與了這些凋亡靶基因的轉錄後調控；而調控這些miRNA的表達可以有效減少凋亡，緩解心肌缺血再灌注（射連企IR）損傷。此外我們還發現，心肌IR損傷不僅可以導致槳詢故凋亡，還可以導致自噬的異常增多；而miRNA不僅可以調控凋亡，還能調控心肌自噬的發生。我們在缺氧/復氧培養的心肌細胞模型和IR損傷心臟模型上均證實，心肌IR損傷可以明顯下調miRNA-204的表達；而IPost可以明顯上調miRNA-204的表達，發揮心肌保護作用。進一步研究發現，心肌細胞內轉染miRNA-204後自噬標誌物LC3的蛋白表達量明顯減少；而轉染miRNA-204的反義序列後LC3的蛋白表達量則明顯增多。上述結果表明，調控miRNA-204可以干預IR損傷後的心肌自噬。我們還證實，Bcl-2是心肌特異性表達的miRNA-1的靶基因之一；而Bcl-2不僅是凋亡相關基因，還可以通過抑制自噬啟動因子Beclin1來發揮對自噬的調控作用。我們發現，miRNA-1還可以民拜刪通過調控Bcl-2來抑制自噬啟動因子Beclin1的表達，從而干預心肌自噬。本項殃格承目為闡明miRNA在IPost的心肌保護中的調控作用提供實驗依據，這些miRNA功能的揭示還可能為藥物研發提供新的基因靶點。
