microRNA在人參皂甙Rd缺血性腦保護中的作用機制研究

《microRNA在人參皂甙Rd缺血性腦保護中的作用機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由張光運擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：microRNA在人參皂甙Rd缺血性腦保護中的作用機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：張光運
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

中文摘要

缺血性腦卒中是由於血管狹窄或閉塞阻斷血流而引起局部腦組織損傷或壞死，具有高致殘致死率。我們既往評估了人參皂甙Rd用於治療缺血性腦卒中的療效，但其具體作用機制不清。我們的預實驗發現缺血海馬組織內miRNA-21和miRNA-34a水平顯著升高，並且與缺血範圍和程度一致，提示它們可能參與缺血性腦損傷過程，但海馬神經細胞構成複雜，且miRNA的靶基因眾多，對其是否以及如何參與人參皂甙Rd的缺血性腦保護仍不清楚。本課題擬套用miR分子生物學、生物信息學、神經藥理學和形態學方法觀察海馬miR-21和34a分子在人參皂甙參與的缺血性腦保護過程中的動態變化及參與此過程的細胞（神經元和膠質細胞）類型，確定其靶基因；進而研究抑制或增強海馬神經細胞miR分子功能對缺血性腦損傷的轉錄後調控機制，預期將為開發新的治療缺血性腦卒中的藥物及選擇有效的治療策略提供新的干預靶點。

結題摘要

1. 建立了SD大鼠大腦中動脈結紮（MACO）的腦缺血模型 選取280-300g 成年雄性SD 大鼠進行實驗，採用線栓法建立NACO模型，MACO造模2h，再灌注24 h後大鼠腦組織出現顯著壞死。 2. microRNA晶片檢測 提取MCAO後不同時間點（1h、24h和7d）對照和模型組動物損傷區、損傷周圍區域腦組織，交公司進行microRNA晶片檢測，利用miRBase預測miR的靶分子，利用MiRTarBase資料庫和軟體分析MCAO損傷相關miR的網路聯繫。根據晶片結果，選取miR34a和miR21作為目標分子進行後續研究。 3.MACO後不同時間點不同腦區內miR34a和miR21的表達變化利用實時定量RT-PCR，觀察到MACO術後24小時海馬、紋狀體和丘腦的miR-21和34a較對照組明顯增高，結果具有顯著統計學差異，該變化在海馬區域尤為顯著。MACO模型術後24h海馬組織 miR-34a分子和miR-21分子水平顯著升高，並持續到術後7天。 4. 不同劑量人參皂甙（GSRd）對MACO的保護作用 MACO前給予不同劑量的GSRd，對MACO造成的缺血性腦損傷具有顯著的保護作用。 目前已發表SCI論文一篇Wei D, Wan Q, Li L, Liu YH, Wang YG, Zhang GY. MicroRNAs as Potential Biomarkers for Diagnosing Cancers of Central Nervous System: a Meta-analysis. Mol Neurobiol. 2014 Aug 1. 撰寫SCI論文一篇。