《雙靶向納米化miRNA-204治療心肌缺血再灌注損傷的機制研究》是依託上海交通大學，由何斌擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：雙靶向納米化miRNA-204治療心肌缺血再灌注損傷的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：何斌
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
缺血性心臟病的基因治療是生命醫學界的熱點，而miRNA是很有臨床套用前景的一類基因。我們前期研究發現：miRNA-204在心肌缺血再灌注（IR）損傷中發揮重要的調控作用。但由於miRNA體內的穩定性差且無心肌靶向性，極大限制了療效，而近年新興的納米載體有望解決此問題。鑒於磁靶向與生物靶向的互補性，我們擬在前期研製的磁納米載體基礎上，引入聚乙二醇（提高穩定性和緩釋性）、聚亮氨酸（包裹磁納米）和聚賴氨酸（裝載miRNA），再耦聯特異性靶向缺血心肌的AT1多肽，組裝出雙靶向納米載體。其中磁靶向結合磁共振成像示蹤技術，可動態評估miRNA對心肌IR損傷的靶向性治療效果；而生物靶向將進一步增強miRNA的心肌靶向性和緩釋性，提高療效。並深入研究miRNA-204如何通過調控心肌自噬和凋亡靶基因，發揮心肌保護作用。本項目有望研發具有自主智慧財產權的新型基因治療藥物，並具備診療一體化臨床優勢。
結題摘要
缺血性心臟病的基因治療是生命醫學界的熱點，miRNA是很有臨床套用前景的一類基因，而納米基因載體是克服目前基因治療中面臨困難的有效手段。在此面上項目的資助下，我們對納米化miRNA在缺血性心臟病中的套用及其相關機制進行了深入研究，現已發表相關文章14篇，其中SCI收錄6篇。該項目所取得的學術成績不僅僅是發表了多篇SCI論著，更重要的成果是培養了多名年輕的科研骨幹，本項目先後資助培養了6名研究生。隨著該項目的深入研究，又有了新發現和新創意，本項目組成員又申請到3項新的科研項目。本項目研究中，我們成功合成了一種可特異性靶向於梗死心肌的納米載體，該納米載體核心為陽離子聚合物—樹枝狀聚賴氨酸（DGL），外殼為親水性的聚乙二醇，表面連結有靶向分子AT1（可特異性與梗死心肌中升高的血管緊張素II受體（AT1R）結合），該納米載體可成功負載miRNA形成粒徑約200 nm的納米顆粒。該納米顆粒具有細胞毒性低、生物安全性高、穩定性高的特點。我們在缺氧/復氧原代心肌細胞模型以及心肌梗死模型上證實了該靶向納米載體對缺氧心肌細胞和梗死心肌的特異性靶向效能。我們在細胞水平證實了該靶向納米載體可將miRNA-1 inhibitor轉染至心肌細胞中，其轉染效能與傳統納米載體聚乙烯亞胺（PEI）相當，但毒性遠遠低於PEI。在小鼠心肌梗死模型上，我們證實了該靶向納米載體可將miRNA-1 inhibitor靶向遞送至梗死的心肌部位，明顯下調梗死心肌中miRNA-1（miRNA-1在梗死心肌中表達水平升高），並明顯上調抗凋亡蛋白Bcl-2和PKCε的表達水平（Bcl-2和PKCε在梗死心肌中表達水平降低）。我們進一步證實了心肌靶向納米載體負載miRNA-1 inhibitor可減少心肌細胞凋亡，減小心肌梗死面積，減少心肌纖維化程度，同時可改善小鼠心臟功能。本項目為闡明miRNA在心肌梗死發生髮展中調控作用提供實驗依據，本項目構建的心肌靶向納米載體為心肌梗死的基因治療提供了新策略，有望為臨床心肌梗死患者的治療提供新的思路。
