miR-381調控食管鱗癌放療敏感性的分子機制研究

《miR-381調控食管鱗癌放療敏感性的分子機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由周蘇娜擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：miR-381調控食管鱗癌放療敏感性的分子機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：周蘇娜
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

中文摘要

腫瘤細胞生存能力（增殖、周期及抗凋亡）的增強賦予腫瘤放療抵抗從而導致放療失敗或局部復發。miRNAs作為調控基因表達的重要分子，在食管鱗癌放療抵抗調控方面是新的研究熱點。本項目組前期發現放療抵抗食管鱗癌細胞中miR-381表達下調最顯著,生物信息學技術篩選示miR-381有5個潛在靶點（CTNNB1、LEF1、CDK1、XIAP和CXCR4）是細胞生存途徑的關鍵基因，提示其可能在調控食管鱗癌放療抵抗中發揮關鍵作用。基於上述構想，本項目擬：①利用體內外實驗明確miR-381表達水平對食管鱗癌放療敏感性的影響；②採用分子生物學相關技術驗證miR-381與5個靶點的調控關係、明確放療抵抗的調控機制；③收集臨床標本，了解miR-381及5個靶點表達水平對放療反應的臨床預測意義。本項目的實施有助於明確食管鱗癌放療抵抗的形成機制，為食管鱗癌提供新的靶向治療策略。

結題摘要

背景：前期研究發現miR-381表達量隨放療抵抗性增加而下降，但miR-381對食管鱗癌放療的調控作用及機制未明。腫瘤細胞的增殖及抗凋亡能力增強會促進放療抵抗，而生物信息學顯示miR-381的潛在靶基因與增殖、凋亡通路相關。本研究探討了miR-381對食管鱗癌放療敏感性的調控作用及機制。 方法：套用RT-PCR檢測不同放療敏感性食管鱗癌細胞株及食管鱗癌組織中miR-381的表達情況。調控miR-381表達情況，利用MTT、Transwell小室、克隆形成實驗檢測miR-381表達改變對食管鱗癌細胞增殖、凋亡及放療敏感性的調控作用，並在動物模型中驗證其對放療敏感性的影響。雙螢光報告基因分析miR-381對靶基因XIAP的表達調控，分析食管鱗癌組織標本中miR-381與XIAP的蛋白表達關係。套用shRNA技術沉默XIAP表達，比較其與miR-381對食管鱗癌細胞增殖、凋亡及放療敏感性的調控作用。 結果：miR-381在食管癌組織及細胞中表達下調，且在不同食管鱗癌細胞株中隨放療敏感性下降，miR-381表達下調。上調miR-381表達降低KYSE450 /150的增殖活性，增加凋亡及放療敏感性；下調miR-381表達增加TE1/ECA109的增殖活性，減少凋亡及放療敏感性。體內實驗也證實上調miR-381表達增加腫瘤的放療敏感性。miR-381與XIAP在食管鱗癌組織中表達負相關，報告基因證實miR-381可結合XIAP的3’-非編碼區域。沉默XIAP表達與上調miR-381表達均可抑制細胞增殖、活化凋亡途徑，從而增加放療敏感性。 結論：miR-381通過靶向XIAP活化凋亡通路在食管鱗癌中發揮放療敏感性的調控作用。