《調控miR-429表達對食管鱗癌細胞凋亡和侵襲作用的影響》是依託鄭州大學，由臧文巧擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：調控miR-429表達對食管鱗癌細胞凋亡和侵襲作用的影響
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：臧文巧
- 依託單位：鄭州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
食管癌是我國常見的消化道腫瘤，miRNA參與調控細胞增殖和凋亡，在腫瘤的發生髮展過程中扮演了重要的角色。研究表明miR-429可能以抑癌基因的角色參與腫瘤的發生髮展並可作為低分化腫瘤和侵襲性腫瘤的生物標誌，但是miR-429與食管癌之間的關係迄今未見報導。我們前期通過miRNA晶片和qRT-PCR研究顯示miR-429 在食管癌組織中表達下調；並證實Bcl-2基因為miR-429的靶基因。本研究擬擴大標本探索食管鱗狀細胞癌組織中miR-429表達水平與病理特徵的相關性；明晰體內外調控miR-429表達對食管鱗癌細胞系KYSE30和EC-1生物學行為的影響；揭示其影響細胞凋亡和侵襲的分子機制。為食管癌的基因生物治療提供潛在的靶點及實驗依據。
結題摘要
食管癌是我國常見的消化道腫瘤，miRNA參與調控細胞增殖和凋亡，在腫瘤的發生髮展過程中扮演了重要的角色。研究表明miR-429可能以抑癌基因的角色參與腫瘤的發生髮展並可作為低分化腫瘤和侵襲性腫瘤的生物標誌。本課題研究內容：1.收集食管鱗癌組織和配對的癌旁食管黏膜組織標本，套用Agilent miRNA基因晶片檢測了3例食管癌標本（包括癌組織和癌旁組織）中microRNA的表達情況；2.檢測食管鱗狀細胞癌組織中miR-429表達水平並分析與病理特徵相關性；3.觀察體內外調控miR-429表達對食管鱗癌細胞系KYSE30和EC-9706生物學行為的影響；4.鑑定 miR-429的靶基因及分析細胞凋亡、周期改變和侵襲轉移產生分子機制；5. 根據microRNA基因晶片檢測結果篩選出食管鱗狀細胞癌組織中另外兩個重要的microRNA（miR-451和miR-655），檢測了其表達及對食管鱗癌細胞凋亡和侵襲作用的影響。實驗結果如下：1.基因晶片分析篩選出201個差異表達的miRNA，包括102個食管癌組織中上調的miRNAs和99個下調的miRNAs；2. qRT-PCR結果表明食管磷癌組織中miR-429表達下調。miR-429的表達水平與腫瘤分化、TNM分期和淋巴結轉移情況密切相關.3.體內外實驗結果顯示上調miR-429表達抑制了EC9706 和KYSE30 細胞的生長；抑制了細胞的侵襲；誘導了EC9706 and KYSE30 細胞的凋亡；4. 運用生物信息學分析預測BCL-2 和SP1是miR-429靶基因，採用雙螢光素酶報告基因法結果顯示：miR-429通過和BCL-2、SP1的3’UTR結合負性調節其表達。鑑定出BCL-2 和 SP1是miR-429靶基因。進一步實驗結果顯示miR-429通過靶向SP1和Bcl-2抑制食管磷癌細胞的生長和侵襲並促進其凋亡；5. miR-451在食管鱗癌組織中低表達，miR-451通過作用於靶基因CDKN2D和 MAP3K1參與調控食管鱗癌細胞生長。miR-655在食管鱗癌組織中低表達，miR-655通過作用於靶基因PTTG1抑制了食管鱗癌細胞的侵襲。結論：食管磷癌組織中miR-429表達下調， miR-429通過靶向SP1和Bcl-2抑制食管磷癌細胞的生長、侵襲並促進其凋亡。該研究為食管癌的基因生物治療提供潛在的靶點及實驗依據。
