《saRNA上調RUNX3表達套用於食管癌基因治療及其機制研究》是依託山東大學，由王洲擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：saRNA上調RUNX3表達套用於食管癌基因治療及其機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：王洲
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
RUNX3是新近發現的一種抑癌基因，與腫瘤的發生、 發展關係密切，是腫瘤基因治療的潛在靶點之一。本課題利用RNAa技術，在前期工作'saRNA上調食管癌細胞RUNX3 基因表達的體外研究'的基礎上進一步開展四方面研究：①針對RUNX3啟動子區非CpG島區設計合成saRNA，篩選作用更強的saRNA；②體外實驗，觀察saRNA對食管癌細胞RUNX3在mRNA，蛋白水平表達增強作用，以及對食管癌細胞增殖、凋亡的影響；③體內實驗，觀察saRNA上調RUNX3基因表達對裸鼠食管癌移植瘤的影響，評價其體內抗腫瘤效果；④觀察saRNA引起的食管癌細胞RUNX3基因表達升高與基因啟動子區DNA甲基化、組蛋白修飾之間的關係，對其作用機制進行探討。本研究旨在將 RNAa這項近兩年新興的基因激活技術套用於腫瘤基因治療積累經驗，為食管癌的基因治療尋找一種新的方法及思路。
結題摘要
食管鱗癌(Esophageal squamous cell cancer， ESCC)，它是來自食道上皮細胞的原發性食管癌的其中一種類型，在世界範圍內尤其是在中國有著很高發病率的一種惡性腫瘤｡ESCC的目前的治療技術包括手術、放療和化療，儘管目前隨著早期診斷和治療方法上的進步，但ESCC卻仍然是致死率很高的惡性腫瘤之一｡臨床試驗證實RUNX3陰性表達時腫瘤中淋巴道侵襲能力和淋巴結轉移數目均明顯增高，RUNX3陰性表達與食管鱗癌預後不良相關，可能是影響預後的重要因素，即RUNX3蛋白表達下調與食管鱗癌的臨床TNM分期及淋巴結轉移相關，參與食管癌變進展過程｡但是目前尚沒有關於RUNX3對食管鱗癌細胞分子水平作用研究的相關報導。本研究通過套用免疫組織化學、western-blot免疫印跡、實時定量-聚合酶聯反應的實驗方法分別從蛋白和基因的不同角度研究了RUNX3在食管鱗癌組織中的表達以及對食管鱗癌細胞系生物學活性和腫瘤發生的相關性，並探討了RUNX3與食管鱗癌各臨床病理特徵及預後之間的關係。旨在為探索食管癌的發生、發展機制，尋找特異的預後指標，為食管鱗癌的治療確定新的治療目標和提供基因治療食道癌的理論基礎｡目前為止，這是首次套用慢病毒構建RUNX3過表達載體並將其轉染Eca109細胞的研究，並且RT-PCR和Western Blot方法從mRNA和蛋白質水平檢測均表明獲得了穩定過表達RUNX3的Eca109細胞株，實現了對Eca109細胞中RUNX3表達水平的調控，並在裸鼠體內造模成功，為今後研究RUNX3在食管癌發生髮展過程中的基因調控和相應的作用機制提供了堅實理論的基礎。RUNX3表達明顯減少與ESCC患者臨床分期有關。MMP-9和ICAM-1的表達在 RUNX3沉默後大大增加，協同參與食管鱗癌的發生、發展及惡變。我們還需要進一步的實驗來確認RUNX3調節細胞生物學活性的信號通路以及它與ICAM-1、MMP-9的潛在聯繫。
