《MiR-92b/RAB23通路在食管癌浸潤轉移過程中的作用及機制研究》是依託天津醫科大學，由馬剛擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MiR-92b/RAB23通路在食管癌浸潤轉移過程中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：馬剛
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
惡性腫瘤的浸潤轉移是導致患者死亡的根本原因，因此探尋惡性腫瘤防治的新靶點、新方法具有重大意義。申請人已發表的研究結果表明，miR-92b在食管癌細胞的浸潤轉移過程中發揮著重要作用，但其具體作用機制尚需進一步闡明。本課題在前期研究的基礎上，首次證實了RAB GTPase家族成員RAB23是miR-92b的功能性靶分子，敲低RAB23的表達水平能夠有效抑制食管癌細胞的運動、浸潤能力。有趣的是，我們發現RAB23不但在食管癌患者組織中的表達水平顯著升高，其亞細胞定位也由正常食管組織中的細胞膜定位轉變為細胞質定位。本課題下一步擬通過分析食管癌患者中RAB23的表達及定位情況，建立其與食管癌患者臨床、病理指標的相關性；在此基礎上，通過食管上皮細胞體外3D培養模型及動物實驗，進一步闡明miR-92b/RAB23通路在食管癌浸潤轉移過程中的作用機制，為實現食管癌的“精準治療”提供新的靶點和思路。
結題摘要
本項目承接我的博士課題：miR-92b顯著抑制食管鱗癌（ESCC）細胞的浸潤轉移（PMID 26934001），而RAB23作為miR-92b的功能性靶分子被證明——該結果被其餘團隊搶先發表（PMID 27659550）。RAB23與腫瘤浸潤轉移的關係最早報導於2008年：表達升高的RAB23增強瀰漫型胃癌細胞運動能力（PMID 18559507）。隨後十餘年的研究揭示RAB23在多種腫瘤中表達升高，且促進增殖和轉移；但對其作用機制一直不清楚。因此，本項目重點是闡釋RAB23的機制。目前未有RAB23與ESCC的研究。首先，細胞學和動物學實驗證明了RAB23能促進ESCC細胞的黏附和運動能力。其次，有報導稱RAB23與Integrin β1相關（PMID 26716504），我們對該整合素在ESCC中的功能進行了研究，證實其能促進ESCC的轉移和耐藥（PMID 28401009）。RAB23作為RAB GTPase家族成員，很可能通過其運輸的蛋白發揮作用，但敲降後未影響Hedgehog通路（PMID 28104793）。通過BioGRID和IntAct分析獲得三個可能與RAB23結合的蛋白分子，初步的文獻挖掘推測CREB3可能參與到RAB23介導的細胞運動中（PMID 29249802）。已完成的細胞學和動物學實驗證實了CREB3能促進ESCC細胞的運動能力。CREB3在內質網合成後會被轉運到高爾基體，隨即會剪下掉C末端後被轉運到細胞核，猜測RAB23在內質網-高爾基體的轉運過程中發揮作用。敲降RAB23表達導致CREB3在細胞質中累積。我們通過co-IP實驗未檢測到RAB23和CREB3的互作：這可能是實驗方法不恰當，也更可能是運輸囊泡中RAB23並沒有與CREB3直接結合。我們採用RNA-seq分別檢測了RAB23和CREB3表達下降後對轉錄的影響，KEGG分析後發現一部分變化的基因均富集到Focal adhesion通路，這提示我們RAB23很可能參與到了CREB3對轉錄的調控中。我們已經獲得有力的實驗數據證明了RAB23促進ESCC細胞浸潤轉移；但分子機制而言，目前我們只能推測其很可能參與到CREB3的轉運、進而調控後者的轉錄來發揮作用。受限於經費，後續將繼續申請課題釐清這一尚未解決的問題。
