《miR-375作為結直腸癌早期診斷標記及調控機理研究》是依託雲南大學，由崔清華擔任負責人的國家自然科學基金專項基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-375作為結直腸癌早期診斷標記及調控機理研究
- 負責人：崔清華
- 依託單位：雲南大學
- 項目類型：專項基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
結直腸癌是消化系統主要的惡性腫瘤之一, 在我國的發病率呈逐年上升趨勢, 嚴重威脅著人們的健康，患者的生存和預後取決於腫瘤的檢出時間。miRNA在腫瘤的發生、轉移中發揮重要作用，且在不同組織的表達和生理作用具有特異性。隨著現代醫學對miRNA精確定量技術的發展，miRNA標記已成為臨床上早期診斷腫瘤及癌症非常重要的途徑。miR-375在結直腸癌變組織表達的特異性及功能機制缺乏研究。本研究擬調查miR-375在結直腸癌變組織表達的特異性，著重以miR-375作為分子標記，利用糞便為檢測材料，探討臨床上早期診斷結直腸癌發病的新途徑。通過調查miR-375、JAK2/STAT3和自噬基因atg7的相互關係，驗證miR-375是否通過調控自噬及線粒體功能來參與結直腸癌的發生與發展，從而為揭示結直腸癌發病的調控機理提供依據。
結題摘要
結直腸癌是消化系統主要的惡性腫瘤之一, 在我國的發病率呈逐年上升趨勢, 嚴重威脅著人們的健康。結直腸癌的早期診斷和精準治療依賴於對其發生髮展的分子機制的了解。miRNA在腫瘤的發生、轉移中發揮重要作用，且在不同組織的表達和生理作用具有特異性。隨著現代醫學對miRNA精確定量技術的發展，miRNA標記已成為臨床上早期診斷腫瘤及癌症非常重要的途徑。miR-375在肝癌、胃癌等多種消化道癌症中表現為表達下調，然而在結直腸癌變組織表達的特異性及功能機制缺乏研究。本研究首先檢測並對比了miR-375在結直腸癌變組織和癌旁組織表達的特異性，發現miR-375在癌變組織中表達顯著低於癌旁組織。與其一致的是miR-375在結直腸癌細胞株HCT116、HT29和Caco2中的表達也顯著低於正常腸細胞株，這個結果表明miR-375可能在結直腸癌中具有重要調控作用，有作為分子診斷標記的潛力。然後，我們結合多種預測microRNA靶標的資料庫發現，其靶標基因中參與腫瘤調控的主要包括Jak2/STAT3和MAPK/ERK分子通路，及參與自噬過程的ATG7。而這些基因的轉錄和蛋白表達水平在結直腸癌細胞株中均明顯低於正常對照。於是，我們通過轉基因技術構建了穩定表達miR-375的以上3種結直腸癌細胞株，並在細胞水平檢測了對細胞增殖、細胞遷移及細胞內線粒體功能的影響。我們發現高表達miR-375後，Jak2/STAT3和MAPK/ERK等通路中的基因表達下調，細胞增殖受到抑制，線粒體功能降低，但細胞遷移無明顯變化。自噬相關基因ATG7和LC3B的表達變化則具有細胞株特異性。最後我們進行了動物模型的個體水平驗證，將高表達miR-375的結直腸癌細胞注射裸鼠50天內無腫瘤形成，而注射空載體細胞株的對照組裸鼠在三周內有腫瘤形成，並隨時間延長而增大。綜上所述，miR-375在結直腸癌患者中低表達，主要通過上調Jak2/STAT3和MAPK/ERK通路中的基因表達，促進癌症的發生及癌細胞增殖，但不促進癌細胞遷移。這些發現為以miR375為靶標，對結直腸癌的診斷與治療提供了一定的理論依據。
