《結直腸癌中miR-195調控PD-L1的表達和生物學功能的研究》是依託蘇州大學，由曹磊擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：結直腸癌中miR-195調控PD-L1的表達和生物學功能的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：曹磊
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
負性共刺激分子PD-L1是目前腫瘤免疫逃逸機制研究和免疫治療的熱點，但PD-L1在腫瘤免疫微環境中異常表達的機制尚待闡明。我們前期的研究發現：PD-L1在結直腸癌組織中異常表達，並與病人的預後密切相關，同時利用臨床結直腸癌組織進行了miRNA晶片檢測與分析，篩選出調控PD-L1表達的差異miRNA--miR-195，並初步證實miR-195參與PD-L1的表達調控。本項目以此為切入點在臨床標本及結直腸癌細胞系中進一步分析PD-L1與miR-195的表達及相關性，並利用臨床腸癌組織標本、細胞株及模型動物進行體內外實驗論證miR-195對PD-L1的表達調控及其分子機制，最後驗證miR-195干預與PD-L1抗體對結直腸癌的聯合治療效果。本項目的研究將從microRNA這個新視點闡明負性免疫調控分子PD-L1在腫瘤微環境異常表達的機制，也為PD-L1/PD-1腫瘤免疫治療提供新的思路。
結題摘要
負性共刺激分子PD-L1是目前腫瘤免疫逃逸機制研究和免疫治療的熱點分子，針對PD-L1的阻斷性抗體、伴隨診斷抗體研究在近幾年有了眾多突破性進展，但PD-L1在腫瘤免疫微環境中異常表達的機制仍有待進一步闡明。本課題中我們利用臨床結直腸癌組織進行了miRNA晶片檢測與分析，篩選出調控PD-L1表達的差異miRNA--miR-195，以此為切入點在新鮮腸癌組織以及結直腸癌細胞系中初步驗證兩者的表達負相關性；接著通過免疫組化以及原位雜交法檢測臨床結直腸癌病人的PD-L1和miR-195的表達，統計學驗證了兩者表達的負相關性；通過臨床預後分析，發現miR-195以及miR-195與PD-L1的組合比PD-L1表達能更好的預測病人預後；接下來我們通過luciferase證實了miR-195對PD-L1的直接調控並在多種細胞、不同條件下進行了驗證；同時我們也證明了miR-195對細胞增殖凋亡的功能影響是通過調控PD-L1實現的；最後我們通過將miR-195和PD-L1阻斷性抗體聯合治療免疫缺陷小鼠驗證了miR-195確實可以協同增強PD-L1的治療效果。本項目通過臨床腫瘤組織標本、結直腸癌腫瘤細胞系和免疫缺陷小鼠模型，採用microRNA 晶片、Real time PCR、流式細胞術等手段，從分子、細胞、組織以及動物水平等層次研究了明星分子PD-L1的microRNA調控機制，提出並驗證了miR-195聯合PD-L1的抗體治療結直腸癌的新思路，對結直腸癌的免疫治療提供了新的思路和新的方向，具有潛在的臨床套用價值。
