Reg4在急性胰腺炎後胰腺再生中的作用及分子機制研究

《Reg4在急性胰腺炎後胰腺再生中的作用及分子機制研究》是依託上海交通大學，由王興鵬擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：Reg4在急性胰腺炎後胰腺再生中的作用及分子機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：王興鵬
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

重型急性胰腺炎（SAP）尚乏理想的藥物治療，其死亡率較高。胰腺內在的抗損傷和再生能力是影響急性胰腺炎（AP）預後的重要因素之一，但胰腺再生的分子機制遠未闡明。本課題組前期發現在小鼠AP後損傷和修復模型中Reg4基因和蛋白表達呈先上升後下降的趨勢，免疫螢光發現Reg4的表達主要分布在胰島和胰島周圍殘存的腺泡細胞及新生導管樣上皮細胞中；使用重組Reg4蛋白減輕了AP的嚴重程度，而Reg4基因條件敲除加重胰腺損傷並明顯抑制了胰腺再生，提示Reg4可能參與AP後胰腺抗損傷和再生過程。本研究擬利用基因敲除、RNAi技術研究Reg4對AP後腺泡細胞增殖、去分化及再分化的影響，以明確Reg4在胰腺再生過程中的作用，並通過高表達Reg4和套用外源性重組Reg4蛋白觀察其對胰腺腺泡細胞EGFR和Notch信號通路的調節機制。本研究的完成將進一步闡明胰腺再生的分子機制並為胰腺功能障礙相關疾病治療提供新的思路。

結題摘要

重症急性胰腺炎目前尚無有效的藥物治療，有很高的死亡率。同時，重症胰腺炎患者在急性炎症期後極有可能存在因胰腺再生不全所引起的胰腺外分泌功能不全，從而引起骨質疏鬆等更加嚴重的併發症並極大的影響患者的生存質量，但目前對胰腺炎後胰腺再生的機制尚不十分明確。我們發現，Reg4蛋白在胰腺炎期間的表達存在上調，且將其敲除之後嚴重影響了胰腺組織的再生修復。我們進一步在Reg4敲降及再生期特異性Reg4敲降小鼠模型上驗證了這一現象，說明Reg4在胰腺再生過程中發揮作用。我們進一步對其作用機制進行探究發現，Reg4敲除及敲降均減少了胰腺再生期間正常腺泡細胞的區域，但免疫組化/免疫螢光染細胞增殖標記物Ki-67的結果顯示Reg4敲降後反而增加了處於增殖狀態的腺泡細胞數量。同時我們通過免疫螢光共染澱粉酶及CK19/SOX9發現，Reg4敲降的胰腺組織中存在著腺泡細胞導管化生結構的增多及持續存在，體外腺泡細胞的3D培養也發現Reg4敲降的腺泡細胞更快的形成了更多的導管化結構。以上結果說明Reg4通過影響腺泡細胞的去分化及再分化延緩了胰腺炎後胰腺再生。此外，我們對腺泡細胞分化過程中的關鍵乾性信號通路進行了分析，發現Reg4敲降小鼠的胰腺組織中存在NOTCH信號通路的過度激活，說明Reg4可能通過調節NOTCH信號通路影響了腺泡細胞去分化及胰腺再生。我們的研究揭示了Reg4在胰腺炎後胰腺再生中的作用及其相關分子機制，為急性胰腺炎患者再生期的的治療提供了理論依據，同時為後續急性胰腺炎後胰腺再生的研究開闢了新的領域並提供了新的手段。