《Notch信號調控巨噬細胞參與腎纖維化的作用及其機制》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由劉曉渭擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Notch信號調控巨噬細胞參與腎纖維化的作用及其機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉曉渭
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
巨噬細胞是參與腎纖維化的重要細胞亞群。巨噬細胞可產生促炎因子和促纖維化因子促進纖維化發生髮展，又可分泌基質金屬蛋白酶（MMP）發揮促纖維降解的作用。但巨噬細胞的這種雙重作用的調控機制及在腎纖維化中的作用尚不清楚。我們最近在《Cancer Res》報導，Notch信號通過Jak/STAT通路調控巨噬細胞的功能狀態；我們又發現Notch可通過miR188-5p調控巨噬細胞產生MMP(未發表)，提示Notch信號可通過Jak/STAT和miR188-5p調控巨噬細胞在腎纖維化的雙重作用。本課題擬利用巨噬細胞特異性基因剔除小鼠模型，深入研究腎纖維化過程中，Notch-Jak/STAT和Notch-miR188-5p信號對巨噬細胞的調控，揭示Notch信號調控巨噬細胞功能和腎纖維化進程可能的分子機制。本研究可闡明Notch信號調控的巨噬細胞功能狀態及其在腎纖維化發生髮展中的作用和機制，具有重要意義。
結題摘要
巨噬細胞在腎臟纖維化中發揮重要作用，但是在腎臟纖維化中的巨噬細胞的活化及功能機制尚途徑不清楚。大量數據及我們研究組都證明了notch信號參與了巨噬細胞的活化及功能，它是由四個notch受體介導的重要的轉錄因子RBP-J調控。為進一步探究notch信號調控巨噬細胞活化在腎臟纖維化中作用及機制，在此研究中，我使用巨噬細胞特異性阻斷notch信號的轉基因小鼠建立UUO模型，我們發現敲除RBP-J後減輕了纖維化腎臟中膠原纖維沉積及肌成纖維細胞激活。同時我們還發現纖維化中重要轉錄因子TGF-b蛋白和mRNA水平均下降。由於TGF-b是EMT中重要轉錄因子，因此我們檢測纖維化中EMT相關分子表達，發現敲除RBP-J後EMT發生被抑制。另外我們使用流式細胞術和組織學染色檢測纖維化中炎症細胞浸潤以及炎性因子、巨噬細胞活化標記，發現像TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10、YM1在敲除RBP-J後mRNA表達水平是下降的，同時也提示敲除組巨噬細胞活化是受到抑制的。令人感興趣的是，我們發現骨髓來源的巨噬細胞重要的趨化因子受體CCR2在敲除組腎臟纖維化中的表達是明顯減少的，而在骨髓中CRR2陽性的單核細胞是明顯增多的脾臟中與腎臟中一致，也就是說阻斷notch信號後抑制了這部分細胞從骨髓向腎臟的遷移。相反，在巨噬細胞特異性激活NOTCH後增加了CRR2陽性巨噬細胞聚集從而加重纖維化。使用氯膦酸鹽清除組織定居型巨噬細胞進一步證明了骨髓來源巨噬細胞在腎臟纖維化中發揮主要作用，然而在敲除組炎性巨噬細胞的增值並沒有受到影響，進一步說明了notch信號通過調控骨髓CCR2陽性單核巨噬細胞遷移而不是巨噬細胞增值參與腎臟纖維化。綜上所述，我們的研究證明了notch通過調整骨髓中CRR2陽性單核細胞-巨噬細胞遷移進而影響腎臟纖維化，抑制巨噬細胞中notch信號活化可能為將來臨床上治療腎臟纖維化提供新的策略。
