《炎症和巨噬細胞在馬兜鈴酸腎病發病機制中的作用研究》是依託四川大學，由周莉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：炎症和巨噬細胞在馬兜鈴酸腎病發病機制中的作用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：周莉
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
馬兜鈴酸腎病(AAN)以進展性腎臟纖維化和腎功能衰竭為特徵，是中藥藥物副作用的典型。其發病機制和治療尚不明了。故研究其分子發病機制、尋找防治對策是一緊迫的任務。我們既往研究發現馬兜鈴酸(AA)通過激活Stat3-p53信號通路誘導急性AAN，而TGF-β1/Smad3的激活則可能是導致慢性AAN的關鍵機制。作為急慢性AAN的橋樑，炎症參與了AAN的發生髮展，但尚缺乏系統研究。我們的前期結果發現：AAN中炎症細胞和炎症因子的表達上調，且與NF-κB信號系統的激活和慢性纖維化相關。故巨噬細胞可能在慢性AAN的發生髮展中起關鍵作用。科學假說：AA及其細胞損傷通過NF-κB信號系統激活巨噬細胞，引發炎症的瀑布反應，從而加重腎臟損害，加重修復過程中的腎間質纖維化。抑制炎症反應有可能成為亞急性AAN治療的靶點。我們擬在巨噬細胞敲除小鼠上建立慢性AAN模型，結合體外巨噬細胞培養來驗證該科學假說。
結題摘要
馬兜鈴酸腎病(AAN) 以進行性腎小管細胞的丟失和腎臟的纖維化為特徵。馬兜鈴酸(AA)被認為是馬兜鈴酸腎病的關鍵致病因素。我們既往的研究已證實TGF-/Smad3為AAN纖維化中的關鍵信號通路。有趣的是，我們的研究同時發現巨噬細胞介導的腎臟炎症是早期AAN的另一個重要特點。 但是，巨噬細胞在AAN中的作用尚不清楚。為此，我們成功申請的這個課題，利用巨噬細胞條件敲除小鼠驗證了巨噬細胞驅動的腎臟炎症反應在AAN中的重要作用。我們利用白喉毒素100ug/mice/day共三天腹腔注射在巨噬細胞條件敲除小鼠 （LysM-Cre/DTR mice (C57/BL6) ）上建立巨噬細胞的敲除。然後使用AA 5mg/kg隔日腹腔注射共28天建立AAN小鼠模型。 巨噬細胞敲除以白喉毒素隔日劑量維持。同時結合巨噬細胞株NR8383在體外驗證AA誘導的炎症和纖維化及其相關信號。我們發現動物實驗中，巨噬細胞敲除可以保護AA誘導的腎功能損傷（血肌酐降低了30%，微量白蛋白尿降低了50%）、腎臟炎症（巨噬細胞CD3 T細胞、炎症因子和趨化因子IL-1, TNF, MCP-1）和纖維化（COL1和a-SMA）。NFkB P65是炎症反應的重要信號通路。利用 PDTC阻斷NFkB P65的信號通路的體內和體外實驗同樣可以保護AA誘導的腎功能損傷、腎臟炎症和纖維化。因此。我們得出結論，巨噬細胞在AAN的發生髮展中起重要作用。提示巨噬細胞可能會是AAN治療的一個靶點和新的治療方向。 該課題的順利完成為巨噬細胞抑制劑作為AAN的治療方案提供了實驗前期基礎。為國內和國際首創。該課題的實施得到了香港中文大學藍輝耀教授的大力支持。藍輝耀教授提供了巨噬細胞基因敲除小鼠及其技術指導。進一步加強了與香港藍輝耀教授的合作和交流，建立互助合作的科研關係。該課題也吸引了澳大利亞墨爾本大學David Nikolic-Paterson教授的合作，就巨噬細胞的化學抑制劑（專利藥品）在AAN中的治療作用進行聯合科研。該課題按計畫如期高質量完成。本課題培養博士研究生一名（馮梅：論文題目：巨噬細胞在馬兜鈴酸腎病的機制研究，導師姓名：付平）。已於2013年5月完成答辯並畢業。在讀博士1名。參加國際口頭交流（2013 ERA-EDTA）和壁報交流（2013 WSN）各一次，SCI論著在投稿和審稿中。發表中文論著1篇。
