Nrf2-miR-181c-Notch信號通路逆轉慢性CsA腎病腎臟纖維化的作用及機制

《Nrf2-miR-181c-Notch信號通路逆轉慢性CsA腎病腎臟纖維化的作用及機制》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由孫文娟擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：Nrf2-miR-181c-Notch信號通路逆轉慢性CsA腎病腎臟纖維化的作用及機制
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：孫文娟
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

中文摘要

CsA(環孢素A)誘導的腎小管損傷是腎臟纖維化進展的重要原因，但其分子機制仍未完全闡明。我們採用miRNA晶片技術，對CsA干預的HK2細胞及親本HK2細胞進行高通量篩選，結果提示miR181c表達差別最為顯著。預實驗結果發現，CsA誘導小鼠腎臟損傷，Nrf2-/-小鼠腎臟損傷及纖維化程度更嚴重，利用慢病毒過表達miR181c可改善CsA/Nrf2-/-小鼠腎臟損傷及纖維化程度，提示miR181c與Nrf2在腎纖維化進展過程中發揮了重要作用。那么miR181c與Nrf2之間有什麼關聯？為此進行了生物信息學分析，結果發現編碼miR181c的啟動子區存在2個Nrf2潛在作用位點。由此推測CsA干預後，miR181c很可能受Nrf2的直接轉錄調控，進而調控其下游靶基因導致腎小管發生纖維化。本課題將通過體內外實驗證實這一理論，這將為慢性CsA性腎臟纖維化機制提供全新視角，為其治療豐富理論基礎。

結題摘要

CsA(環孢素A)誘導的腎小管損傷是腎臟纖維化進展的重要原因，但其分子機制仍未完全闡明。我們採用miRNA晶片技術，對CsA干預的HK2細胞及親本HK2細胞進行高通量篩選，結果提示miR181c表達差別最為顯著。CsA誘導小鼠腎臟損傷，Nrf2-/-小鼠腎臟損傷及纖維化程度更嚴重，利用慢病毒過表達miR181c可改善CsA/Nrf2-/-小鼠腎臟損傷及纖維化程度，提示miR181c與Nrf2在腎纖維化進展過程中發揮了重要作用。那么miR181c與Nrf2之間有什麼關聯？為此進行了生物信息學分析，結果發現編碼miR181c的啟動子區存在2個Nrf2潛在作用位點，我們進一步套用分子生物學方法（螢光素酶報告系統、RT-PCR、染色質免疫共沉澱）驗證了CsA抑制 miR-181c 啟動子活性依賴Nrf2結合位點，我們同樣套用分子生物學方法證實Notch2是miR-181c的一個靶分子，miR-181c-Nrf2-Notch2信號通路通過抑制EMT方式參與了逆轉腎臟纖維化過程。本課題的研究為慢性CsA性腎臟纖維化機制提供全新視角，為其治療豐富理論基礎。