《NLRP3炎症小體參與真菌性角膜炎固有免疫反應機制的研究》是依託天津醫科大學，由華夏擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：NLRP3炎症小體參與真菌性角膜炎固有免疫反應機制的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：華夏
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
真菌性角膜炎是較常見的難治性致盲眼病，發病率在我國有上升趨勢，即使聯合角膜移植手術，預後仍較差，其發病機制尚不清楚。NLRP3炎症小體是近年固有免疫研究的熱點，但有關其在真菌性角膜炎發病過程中作用的研究尚屬空白。本組前期實驗發現角膜上皮細胞在致病真菌刺激後，NLRP3/ASC/caspase-1炎症小體通路激活，IL-1β產生增加；且相關基因在真菌性角膜炎動物模型表達上調。本研究採用共培養體系和真菌性角膜炎動物模型，系統研究NLRP3相關因子參與真菌性角膜炎發病機理，通過分別阻斷NLRP3炎症小體外源性和內源性信號激活通路，判定參與疾病過程中相關的免疫學分子，從巨觀和微觀角度了解其對疾病進程的作用，為真菌性角膜炎發病機制提供實驗依據。同時通過抑制NLRP3炎症小體的活性，減少其相關炎症因子的產生，以降低角膜組織的炎症反應，為真菌性角膜炎的生物治療提供一種新思路。
結題摘要
感染性角膜病是重要的全球性致盲眼病，是嚴重的角膜潰瘍性疾病，特別是在開發中國家。在我國真菌性角膜炎發生率近年來有上升趨勢，特別是隨著外傷增多、廣譜抗生素和激素的濫用，及角膜接觸鏡的套用的增多。真菌性角膜炎預後較差，最終多需要角膜抑制，但是術後效果差。因此，深入了解真菌性角膜炎的發生機制，開發新型治療方法是當務之急。固有免疫系統是角膜組織對抗入侵致病微生物的第一道防線，其通過一系列模式識別受體識別入侵微生物。本項目從原代角膜上皮細胞體外實驗和真菌性角膜炎動物模型體內兩部分對NLRP3參與真菌性角膜炎的固有機制進行了系統研究，證明了 NLRP3炎症小體參與了真菌性角膜炎發生和發展的固有免疫反應，NLRP3炎症小體在抗真菌感染的過程中發揮了非常重要的作用。本組對真菌性角膜炎動物模型進行基因晶片研究發現， NLRP3炎症小體主要成分在轉錄水平均有升高，NLRP3升高20.0倍，ASC升高4.5倍，IL-1β和IL-18分別升高136.8、30.2倍。人角膜原代培養人角膜上皮細胞和小鼠真菌性角膜炎的角膜組織中NLRP3和ASC基因和蛋白表達均升高，其調節了caspase-1前體的活化，活性caspase-1通過剪下的方式活化pro-IL-1β，IL-33和pro-IL-18前體， 從而使大量成熟的IL-1β，IL-18和IL-33得以釋放，使得感染組織中的這些分子表達均有所增高。這些炎性細胞因子在固有免疫防禦的起始、加強等方面有重要作用。對NLRP3炎症小體在真菌性角膜炎發病過程中的活化機制，及其發揮作用的研究，是角膜組織固有免疫反參與抗真菌感染的重要組成部分。進一步，我們通過抑制NLRP3的內源性激活途徑（抑制活性氧的產生）、外源性途徑（抑制Dectin-1/Syk通路）和直接套用NLRP3的抑制劑，均可以減少NLRP3相關分子的表達降低，從而抑制了真菌感染的角膜組織的炎症反應。綜合本課題各部分實驗結果，可以證實NLRP3參與真菌性角膜炎的發病機理，為真菌性角膜炎治療提供新的思路。
