II類反式激活因子通過NLR信號調控Th2應答的分子免疫學機制

《II類反式激活因子通過NLR信號調控Th2應答的分子免疫學機制》是依託上海交通大學，由路麗明擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：II類反式激活因子通過NLR信號調控Th2應答的分子免疫學機制
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：路麗明
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

II類反式激活因子（CIITA）是MHC II表達的主導開關。我們之前的研究意外發現CIITA突變體（mCIITA）轉基因小鼠II類分子表達下調的同時，Th1應答轉換為Th2應答；並確認mCIITA作為NLR啟動Nod2和炎症小體介導的信號途徑上調IL33，繼而誘導Th2細胞因子表達。據此，本項目將結合NLR的調控進展提出CIITA可通過NLRP信號途徑調控Th2亞群分化和免疫應答的假說，擬用轉基因動物、ChIPseq等手段探索:⑴mCIITA在胞漿DAMP激發NLR的機理及其激活Th2應答中T-bet/Gata3消長的表觀遺傳因素;⑵mCIITA通過NLRP3炎症小體調控產生IL-33的機制；作為固有免疫研究前沿，以mCIITA為探針分析Nod2和炎症小體的信號調控特點，有助於就MHC表達、Th1/Th2亞群轉換、非感染性炎症、與適應性免疫的關係，及相關研究的臨床意義作出探索和評價。

結題摘要

本課題組之前研究發現II類反式激活因子突變體（mCIITA）除可以顯著下調MHC II類分子表達之外，同時發現C57BL/6J小鼠由Th1型免疫應答背景轉換為Th2型，並首先報導mCIITA可作為NLR啟動Nod2下游的NF-B信號途徑，通過激活巨噬細胞分泌IL33表達，從而活化Th2相關細胞因子。 據此，結合NLR領域的新進展及其調控機制的進展，我們在本項目中研究了mCIITA是否也可以通過結合NLRP3，激活炎症小體， 產生IL-33促進Th1→Th2轉化的可能機制； 分析mCIITA激活Th2應答中T-bet/Gata3消長的表觀遺傳學因素；考察了mCIITA在胞漿DAMP激發NLR中的意義並探討mCIITA在非感染性疾病中作為內源性警報素參與免疫應答的一些特點和意義。 結果發現：（1）mCIITA可通過活化NF-κB信號通路，促進NF-κB入核，誘導增強NLRP3的轉錄表達；（2）mCIITA可誘導NLRP3在胞漿中大量表達，進一步，共聚焦、WB/Co-IP等方法檢測發現mCIITA在胞漿中與NLRP3結合，激活炎症小體，正向調控IL-33等相關細胞因子的表達，使免疫應答由Th1向Th2轉變；（3）利用mCIITA+/+NLRP3-/-小鼠，首次證明體內mCIITA促進Th2細胞分化的作用依賴於NLRP3 的表達; （4）表觀遺傳學實驗發現mCIITA逆轉Th1→Th2格局主要依賴於其通過活化炎症小體影響T細胞轉錄因子T-bet/Gata3表達水平，並通過IL-4啟動子區的去甲基化及組蛋白H3乙醯化作用增加而促使IL-4的表達增高，其中涉及細胞因子下游JAK/STAT信號通路的激活改變；（5）在喉癌及心臟瓣膜硬化兩種非感染性炎症疾病中，發現了CIITA與NLRP3在巨噬細胞細胞質中的共表達/定位，而且螢光共定位強度與疾病進展和分期相關聯，初步提示突變型的CIITA可作為以上病理狀態下一種DAMP活化NLRP3的胞內感受器， 參與疾病發生，發展進程，以上疾病中CIITA分子的天然突變模式正在深入研究中。本項目的研究成果豐富了CIITA的生物學功能，具有重要的基礎及臨床意義。在該項目的資助下已申請新專利3項、 標註基金號發表19篇研究論文，其中12篇發表於 SCI 收錄雜誌，7篇發表在中文核心期刊。培養 2名博士，3名碩士。