《TIPE2-Rac-NLRP3信號網路在缺血性腦損傷中的作用及免疫調控機制》是依託山東大學，由張艷擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：TIPE2-Rac-NLRP3信號網路在缺血性腦損傷中的作用及免疫調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張艷
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
TIPE2是腦缺血再灌注炎症中重要的免疫負調控因子，抑制NADPH oxidase活性可增加TIPE2的表達，進一步研究發現NOX2-/-敲基因鼠，腦缺血再灌注後TIPE2的表達明顯升高，因此本課題將用OrbiTrap高精度質譜方法找到調控TIPE2表達的轉錄因子，明確TIPE2表達調控的上游機制。NLRP3 炎症小體是固有免疫的重要組分在疾病發生過程中發揮重要作用，申請者發現腦缺血再灌注時NLRP3的表達明顯升高，在TIPE2-/-敲基因鼠NLRP3的表達明顯降低，IL-1β的表達也相應減少，結合TIPE2通過抑制Rac1減少ROS的產生，而ROS 在NLRP3 炎症小體的激活中起關鍵作用，提示TIPE2可能通過抑制NLRP3炎症小體在腦缺血再灌注中發揮保護作用，因此本課題將通過體內外實驗從正反兩方面研究TIPE2-Rac-NLRP3信號網路在缺血性腦血管疾病免疫調節中的作用和機制。
結題摘要
TIPE2是腦缺血再灌注炎症中重要的免疫負調控因子，NLRP3 炎症小體是固有免疫的重要組分在疾病發生過程中發揮重要作用，申請者發現腦缺血再灌注時NLRP3的表達明顯升高，在TIPE2-/-敲基因鼠NLRP3的表達明顯降低，IL-1β的表達也相應減少，TIPE2可能通過抑制NLRP3炎症小體在腦缺血再灌注中發揮保護作用，近年來研究發現，內質網應激在機體的炎症反應中發揮重要作用，課題進一步明確TIPE2通過調控ER Stress影響NLRP3參與到腦缺血再灌注炎症。因此本課題通過體內外實驗深入研究TIPE2- ER Stress -NLRP3信號網路在缺血性腦血管疾病免疫調節中的作用和機制。同時對調控TIPE2表達的轉錄因子進行了探索，抑制NADPH oxidase活性可增加TIPE2的表達，進一步研究發現NOX2-/-敲基因鼠，腦缺血再灌注後TIPE2的表達明顯升高，因此本課題將用OrbiTrap高精度質譜方法找到調控TIPE2表達的轉錄因子，明確TIPE2表達調控的上游機制。生物素標記的表達TIPE2啟動子的序列作為探針，與從WT和NOX2-/-敲基因鼠MCAO動物模型腦組織提取的核蛋白相互作用，親和純化能夠與其結合的轉錄因子。SDS-PAGE電泳分離，對其中差異表達的條帶用OrbiTrap高精度質譜儀鑑定，結合軟體預測NOX2調控TIPE2表達的轉錄因子。
