《IRAK-1調控NLRP3炎性體通路在狼瘡腎炎進展中的作用機制》是依託中山大學，由楊念生擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：IRAK-1調控NLRP3炎性體通路在狼瘡腎炎進展中的作用機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊念生
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
固有免疫異常與狼瘡發病密切相關。我們前期發現NLRP3炎症體通路活化促進炎症細胞浸潤及Th17/Tregs失衡，加速狼瘡腎炎(LN)進展。最新研究提示IRAK-1介導固有免疫反應中NLRP3炎症體通路活化，但IRAK-1是否通過調控NLRP3參與LN發病尚不明確。本課題在預實驗提示IRAK-1介導狼瘡巨噬細胞NLRP3活化的基礎上，套用IRAK-1抑制劑和siRNA基因沉默等方法干預兩種自發狼瘡小鼠模型(MRL/lpr和NZB/WF1小鼠)，探討在狼瘡中IRAK-1對NLRP3炎性體通路活化、Th17和Tregs分化及對LN的影響；並用IRAK-1敲除小鼠誘導狼瘡模型進一步驗證。同時，體外探討IRAK-1對自身dsDNA誘導的巨噬細胞和樹突狀細胞NLRP3炎性體通路活化的調控機制，及其對Th17和Tregs分化的作用。本項目有助於明確IRAK-1在LN中的作用機制並探索LN治療新靶點。
結題摘要
研究背景：固有免疫與狼瘡腎炎發病密切相關。NLRP3炎性小體是固有免疫的重要一員，介導IL-1β及IL-18的成熟釋放，參與炎症進展。最新研究提示IRAK-1介導了NLRP3炎性小體通路的活化，但IRAK-1是否通過調控NLRP3炎性小體參與LN發病尚不明確。 研究內容：採用IRAK-1抑制劑及NLRP3抑制劑MCC950等治療狼瘡小鼠，收集小鼠腎臟進行腎臟病理染色及免疫螢光染色；Western blot觀察IRAK-1/NLRP3炎性小體通路在腎臟的表達情況；流式細胞術分析腎臟浸潤炎症細胞以及腎臟固有細胞NLRP3炎性小體活化變化。流式細胞術檢測脾臟Tfh、Tfr、B細胞及漿細胞比例及Tfh細胞功能狀態。收集小鼠血清、24小時尿液檢測自身抗體、腎功能、尿蛋白及細胞因子。體外分離抗dsDNA抗體或去除IgG血清，體外刺激THP-1細胞或足細胞，探討IRAK-1抑制劑、NLRP3抑制劑對抗dsDNA等自身抗體誘導的NLRP3炎性小體活化的抑制作用。收集SLE患者外周血標本，流式細胞術分析Tfh及Tfr細胞比例變化；檢測單核細胞內NLRP3炎性小體活化情況；收集狼瘡腎炎患者腎臟活檢標本及尿液標本，免疫螢光染色分析NLRP3炎性小體在腎臟足細胞內的活化情況。 結果：發病狼瘡小鼠腎臟IRAK-1、 NLRP3炎性小體顯著活化；套用IRAK抑制劑、NLRP3抑制劑治療後狼瘡小鼠腎臟IRAK-1以及NLRP3炎性小體活化顯著降低，腎損害明顯減輕、免疫複合物沉積減少，蛋白尿、血自身抗體和血尿素氮水平明顯下降，足細胞病變減輕；足細胞內NLRP3炎性小體活化顯著降低。脾臟生髮中心B細胞、漿細胞及Tfh細胞數目明顯下降，Tfh增殖及功能被抑制。SLE患者外周血單核細胞內NLRP3炎性小體顯著活化，抗dsDNA抗體等自身抗體可通過誘導ROS活化巨噬細胞及足細胞內NLRP3炎性小體，套用IRAK抑制劑或NLRP3抑制劑顯著抑制自身抗體誘導的NLRP3炎性小體活化。 結論：IRAK-1/NLRP3炎性小體通路參與自發狼瘡小鼠腎臟損害的發病；靶向IRAK-1/NLRP3炎性小體通路能抑制適應性免疫功能，減少自身抗體形成，抑制巨噬細胞及足細胞內NLRP3炎性小體活化，減輕狼瘡腎炎。
