《NLRP3/ASC/Caspase-1通路調控Th17/Treg平衡在狼瘡腎炎發病中的作用機制》是依託中山大學，由楊念生擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：NLRP3/ASC/Caspase-1通路調控Th17/Treg平衡在狼瘡腎炎發病中的作用機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊念生
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
腎臟樹突狀細胞(DCs)和Th17/Treg失衡與狼瘡腎炎(LN)發病密切相關，而NLRP3/ASC/Caspase-1通路(主要表達於DCs)下游的關鍵分子IL-1β是調控Th17/Treg平衡的重要因素，但該通路在LN中作用不明。在前期發現狼瘡腎炎NLRP3表達上調且與疾病活動相關的基礎上，本課題擬(1)探討MRL/lpr鼠腎臟NLRP3/ASC/Caspase-1通路表達及Th17/Treg平衡(數量、比例、表型和功能)變化及體內套用該通路抑制劑對Th17/Treg平衡的影響和對LN的治療作用；(2)分離腎臟DCs與脾初始CD4+T細胞共培養，探討正負調控該通路對Th17/Treg平衡的影響；(3)利用NLRP3、ASC和Caspase-1基因敲除鼠誘導狼瘡模型進一步闡明其機制；(4)探討LN患者腎活檢標本中該通路與臨床資料的相關性。本課題有助於探索LN的發病機制和發現新治療靶點。
結題摘要
Th17/Treg失衡與狼瘡腎炎(LN)發病有關，而NLRP3/ASC/Caspase-1通路活化產物IL-1β是調控Th17/Treg平衡的重要因素，但該通路在LN中作用不明。本項目發現自發性狼瘡鼠腎臟該通路分子表達增高並伴有NLRP3炎性小體活化以及血和腎臟IL-1β升高，提示NLRP3與LN發病有關。體內抑制NLRP3活化降低MRL/lpr小鼠抗ds-DNA產生及其在腎臟沉積，減輕蛋白尿和腎損害，表明NLRP3在LN中起致病作用。為進一步了解LN中NLRP3的激活機制，我們還研究了NLRP3上游受體P2X7，發現狼瘡小鼠腎臟P2X7表達上調；化學抑制劑體內阻斷P2X7或用siRNA抑制其表達後，狼瘡小鼠腎臟NLRP3活化受抑制，血清IL-1β、IL-17水平以及脾臟Th17/Treg比例降低，抗dsDNA抗體產生和腎臟沉積減少，蛋白尿和腎損害減輕，生存時間延長，提示P2X7通過激活NLRP3促進IL-1β產生及Th17細胞反應，參與LN發病。進一步研究發現：體內抑制激酶GSK-3活化可抑制狼瘡小鼠腎臟NLRP3炎性小體活化，減輕腎損害，表明GSK3β激活NLRP3炎性小體通路參與LN發病。在人系統性紅斑狼瘡中，患者外周血單核細胞NLRP3活化程度與血中IL-1β和抗dsDNA水平以及狼瘡疾病活動指數呈正相關。抗dsDNA抗體通過與人巨噬細胞表面TLR4結合，誘導活性氧產生而激活NLRP3。將人抗dsDNA抗體注射給NZB/W F1小鼠後，小鼠單核細胞NLRP3活化增強，IL-1β和IL-17水平升高，脾臟Th17/Treg細胞比例顯著升高，表明抗dsDNA通過活化NLRP3促進IL-1β分泌，誘導Th17反應。本研究初步明確NLRP3炎性小體活化在LN中的致病作用及其調控因素，為LN治療提出新靶點。
