基本介紹
- 中文名:螢光素酶報告系統
- 外文名:Luciferase reporter assay
螢光素酶報告系統(Luciferase reporter assay)指的是以螢光素為底物來檢測螢光素酶活性的檢測系統。螢光素酶是一種廣泛使用的報告基因,其可以催化螢光素氧化成氧化螢光素,在螢光素氧化的過程中,會發出生物...
螢光素酶報告基因是指以螢光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲螢光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統。螢光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發出生物螢光(bioluminescence)。簡介 Luciferase報告基因系統是以螢光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲螢光素酶(fireflyluciferase)活性的一...
《集成學習框架下的螢光素酶抑制劑預測研究》是依託浙江大學,由陳浮擔任項目負責人的青年科學基金項目。項目摘要 基於螢光素酶報告系統的發光技術是一種重要的體外實驗方法,已在環境科學、化學和醫藥學等領域廣泛套用。然而研究表明:外源污染物如螢光素酶抑制劑對酶發光體系的毒性效應,會導致針對靶標或信號通路的實驗...
《U1SnRNA和核酶複合體靶向抑制HCV複製的研究》是依託吉林大學,由牛俊奇擔任項目負責人的面上項目。項目摘要 通過觀察特異性核酶-U1小核RNA複合體對帶有螢光素酶報告系統融合基因的C型肝炎病毒蛋白合成的抑制,並以核酶為對照,研究以U1小核RNA為錘頭樣核酶的載體的方法能癯晌行У陌邢蛐砸種票透窩撞靖粗...
本研究是在前期研究基礎上,進一步通過基因轉染、干擾、螢光素酶報告系統、免疫共沉澱等技術,從體外體內兩方面探討SENP2、Wnt/β-catenin信號通路、MMP13、EMT在膀胱癌侵襲轉移中相互調控的細節,鑑定SENP2直接去SUMO化的靶蛋白,闡明SENP2抑制膀胱癌侵襲轉移的分子機制,為開發膀胱癌侵襲轉移標誌物和治療新靶點提供...
隨著具有膜通透性和光裂解作用的螢火蟲螢光素酶的套用,無需裂解細胞即可檢測酶活性。Renilla螢光素酶催化腸腔素(coelenterazine)氧化,產物可透過生物膜,可能是最適用於活細胞的報告分子。將螢光素酶報告基因載體轉染到細胞中,可用螢光素酶檢測系統靈敏方便地測定螢光素酶基因的表達。自1986年起,螢火蟲螢光素酶基因被...
第一個有關“螢光素-螢光素酶系統”的實驗報告可以追溯到法國的拉斐爾·杜勃瓦。他於1885年發現在螢火蟲在光成像反應中使用時的一種物質。他從各種生物體中提取出可以產生生物光的物質。當中不會被熱破壞的,他叫做螢光素;另外一種不耐熱的,他叫做螢光素酶。接下來的是20世紀初由牛頓·哈維進行的實驗。 他發現...
系統表達螢光素酶轉基因小鼠於2018年7月20日生成,服務機構是中國醫學科學院醫學實驗動物研究所。描述 利用Chicken-β-actin系統性強啟動子建立的全身表達螢光素酶(Luciferase)的轉基因小鼠可以利用光學成像技術跟蹤靶細胞,是研究幹細胞、腫瘤細胞的工具小鼠。機構地址 該資源服務機構通訊地址:北京市朝陽區潘家園五號。
因此,本項目擬以豬CYP3A46為研究對象,對其可能的關鍵胺基酸殘基進行定點突變,確定影響其對尼福地平、T-2和HT-2毒素的特異性識別、結合、催化活性及別構作用的關鍵位點,並構建模型假說揭示其催化分子機制;利用螢光素酶報告基因系統、凝膠阻滯、染色質免疫沉澱等技術研究利福平、T-2和HT-2毒素調控CYP3A46表達的...
(2) 免疫學與幹細胞研究將螢光素酶標記的造血幹細胞移植入脾及骨髓,可用於實時觀測活體動物體內幹細胞造血過程的早期事件及動力學變化。(3) 細胞凋亡 2. 標記病毒(1) 病毒侵染用於觀察病毒對機體的侵染過程。(2) 基因治療可套用螢光素酶基因作為報告基因用於載體的構建,觀察目的基因是否能夠在試驗動物體內...
擬採用基因轉染和RNAi技術,在體外細胞水平觀察導入或沉默PVT1後對胰腺癌細胞增殖、凋亡和侵襲等生物學行為的影響;進一步套用小動物活體成像技術觀察沉默PVT1對胰腺癌生長和轉移的作用;運用螢光素酶報告系統和RIP技術,探究PVT1是否通過“海綿”吸附miR-186和miR-203方式以維持c-Myc高表達;最後,檢測大病例胰腺癌組織...
本課題計畫首先利用miRNA過表達和RNAi、螢光素酶報告系統和“血清休克”技術研究miR-27a/27b在細胞水平上對生物鐘的調節作用;然後通過miR-27a/27b antagomir尾靜脈注射和限制性進食方法確定miR-27a/27b在整體動物水平上對肝臟生物鐘和脂肪酸β-氧化的協同調節機制。本項目擬從細胞和整體動物水平上闡明miR...
而在QKI低表達細胞系中p27表達增高,提示QKI表達與p27表達負相關。RNA-IP和雙螢光素酶報告系統明確QKI與p27的相互作用實驗研究尚未完成。在裸鼠成瘤試驗中,我們發現QKI高表達可以有效抑制體外成瘤和移植瘤的生長。通過本實驗研究結果,提示QKI在肺癌發生髮展中可能發揮抑癌基因的作用,在未來可能作為靶點治療肺癌。
(2)通過染色質免疫共沉澱、雙螢光素酶報告系統、Western blot及蛋白質免疫共沉澱等實驗,顯示EYA4可通過去磷酸化IκBα,抑制IκBα泛素化降解,抑制p65入核,進而抑制NF-κB信號通路,最終抑制NF-κB介導的促進RAP1A轉錄的功能。(3)EYA4還可通過去磷酸化p552-β-catenin,進而抑制MYCBP轉錄發揮抑癌作用。因此...
本研究擬以演化生物學角度預測Insl6和Insl4的細胞內信號通路和相對應的GPCR受體,另外以可表達內源性Insl6或者Insl4的細胞系來大量表達純化有生物活性的Insl6和Insl4多肽為基礎,利用G蛋白螢光素酶報告系統探測兩者在細胞內的G蛋白信號通路,和鑑定出對應的GPCR受體,並進一步對這兩個起源於有胎盤...
本項目擬通過檢測AML患者miR-150表達水平並分析與特定遺傳學改變和預後的關係,同時在細胞和動物模型上驗證miR-150對白血病細胞生長和致瘤能力的抑制作用,套用差異基因表達分析、螢光素酶報告系統等手段預測和確證miR-150的關鍵靶基因及相關信號調節通路,闡明miR-150在AML中的作用和分子機制,為以miR-150為靶點的生物...
本項目擬利用各種轉染、螢光素酶報告系統、CHIP、共聚焦免疫螢光、體內外生物學功能等實驗驗證這一機制。最終探明(1)hsa_circ_001634和miR-194 在胃細胞中的生物學功能,hsa_circ_001634是miR-194的上游調控因子。(2)hsa_circ_001634/miR-194/Wnt軸信號通路的作用機制。(3)SUFU、AXIN2等是miR-1...
我們擬通過雙螢光素酶報告系統對miR-126-3p靶基因IRS1進行驗證,然後培養MC3T3-E1細胞,誘導其向成骨分化,通過過表達miR-126-3p和抑制miR-126-3p表達後IRS1/PI3K/ AKT、IRS1/MAPK/ERK信號通路中的IRS1、PI3K、AKT、MAPK、ERK蛋白表達的變化,以及ALP活性、成骨相關標誌物以及礦化結節的影響。最後,我們進一...
第一個有關“螢光素-螢光素酶系統”的實驗報告可以追溯到法國的拉斐爾·杜勃瓦。他於1885年發現在螢火蟲在光成像反應中使用時的一種物質。他從各種生物體中提取出可以產生生物光的物質。當中不會被熱破壞的,他叫做螢光素;另外一種不耐熱的,他叫做螢光素酶。接下來的是20世紀初由牛頓·哈維進行的實驗。 他發現...
生物信息學分析提示轉錄因子RUNX3的mRNA的3’UTR含有miR-301a直接作用的種子序列,雙螢光素酶報告系統檢測進一步證實了該靶序列,qRT-PCR及Immunoblot證實miR-301a對RUNX3蛋白表達的調控發生在轉錄後水平。結論:miR-301a在胃癌細胞和組織中處於高表達狀態,其表達水平與腫瘤組織分化負相關;上調m...
另外,通過體外螢光素酶報告系統實驗,我們還發現細胞內c-Jun蛋白的過表達對於RhoGDI2基因啟動子的激活以及其相應蛋白的表達上調具有顯著的影響,表明SLUG可能通過c-Jun的介導,調節RhoGDI2基因表達。 總之,本課題篩選到了SLUG作用的靶基因RhoGDI2,並對SLUG、RhoGDI2以及RhoGTPases之間的相互關係進行了較深入的...
本項目擬在in vivo和in vitro情況下,採用siRNA、WB、PCR、免疫螢光共聚焦、雙螢光素酶報告系統等分子生物學及活體MRI成像技術,進一步探討腦梗死後miR-150的時空變化規律及其對血管新生和滲漏的影響;明確miR-150對腦梗死後VEGF和Tie-2及下游分子的同步調控作用;通過對其關鍵分子的干預,明確VEGF和Tie...
可用於蛋白組學、基因組學、藥物篩選、環境監測、各種檢驗檢疫領域 功能基因研究 核酸、蛋白質的光吸收定量和螢光定量 基因表達調控研究(如螢光素酶、GUS、GFP等報告基因系統,核酸-蛋白質相互作用) 信號傳導通路研究(如受體-配體相互作用、蛋白質-蛋白質相互作用、離子通道研究,鈣流等) 基因分型及突變檢測 分子...
可見光活體成像技術主要採用生物發光(bioluminescence)與螢光(fluorescence)兩種技術。生物發光是用螢光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,而螢光技術則採用螢光報告基團(GFP、RFP, Cyt及dyes等)進行標記。利用一套非常靈敏的光學檢測儀器,讓研究人員能夠直接監控活體生物體內的細胞活動和基因行為。通過這個系統,可以...
在這6個基因中只有1個基因Cap1在胎座中特異表達,並且其表達模式和辣椒素合成關鍵基因即辣椒素類物質積累特徵高度一致。採用VIGS、酵母單雜交、雙螢光素酶報告系統、染色質免疫共沉澱等技術證實了Cap1可以直接調控辣椒素的生物合成。 4、 Cap1調控辣椒素合成分子機制研究 分析Cap1編碼區發現SNP較少出現在蛋白...