《MiR-126-3p及其靶基因參與強直性脊柱炎發病機制的研究》是依託中山大學，由古潔若擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MiR-126-3p及其靶基因參與強直性脊柱炎發病機制的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：古潔若
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
肌腱端成骨細胞的過度增殖和分化導致異位骨形成是造成AS致殘的主要原因, 但其機制未明確。我們前期研究發現AS患者外周血單個核細胞中miR-126-3p明顯低於健康對照組，通過生物信息學預測其靶基因之一是IRS1參與了成骨分化。我們擬通過雙螢光素酶報告系統對miR-126-3p靶基因IRS1進行驗證，然後培養MC3T3-E1細胞，誘導其向成骨分化，通過過表達miR-126-3p和抑制miR-126-3p表達後IRS1/PI3K/ AKT、IRS1/MAPK/ERK信號通路中的IRS1、PI3K、AKT、MAPK、ERK蛋白表達的變化，以及ALP活性、成骨相關標誌物以及礦化結節的影響。最後，我們進一步通過動物實驗探索差異表達miR-126-3p對小鼠異位成骨分化的調控，進一步闡明miR-126-3p-IRS1參與AS骨性強直的發生和發展。
結題摘要
經過近3年多的研究，“MiR-126-3p及其靶基因參與強直性脊柱炎發病機制的研究”項目完成了預期計畫： 背景：強直性脊柱炎是一種中軸關節受累為主的慢性炎症性疾病，致殘率高。異位骨形成造成的脊柱強直是致殘的主要原因。目前發病機制未明。前期MiRNA晶片研究提示miR-126-3p差異表達。因此本研究擬進一步驗證及探討其可能參與強直性脊柱炎發病的機制。 主要研究內容和結果是： 1、miR-126-3p在強直性脊柱炎患者中差異表達：通過擴大樣本量驗證miRNA晶片結果，明確miR-126-3p在強直性脊柱炎患者中的表達情況。結果：與類風濕關節炎組和健康對照組相比，AS患者外周血單核細胞中miR-126-3p明顯下調。結論：miR-126-3p在AS患者PBMC中表達明顯下降。 2、miR-126-3p靶基因的預測及驗證：利用生物信息學靶基因預測軟體預測miR-126-3p的靶基因，並通過雙螢光素酶報告基因驗證。結果發現：IRS1是miR-126-3p的直接靶基因之一。 3、miR-126-3p調控成骨細胞分化並參與AS發病機制研究。結果：miR-126-3p可通過抑制IRS1，抑制抑制成骨細胞分化。 4、初步構建miR-126-3p轉基因小鼠並穩定建系。項目關鍵數據和科學意義：進一步驗證了miR-126-3p在AS患者中差異表達，實驗研究表明其可能參與AS成骨分化異常的機制。這提示miR-126-3p可能是AS致病的miRNA靶點。該miRNA的檢測可能為病人疾病診斷的標誌物及為新藥研發提供理論依據。
