《PVT1正性調控c-Myc促進胰腺癌演進的功能和機制研究》是依託中山大學，由張世能擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：PVT1正性調控c-Myc促進胰腺癌演進的功能和機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張世能
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
非編碼RNAs在腫瘤發生和進展中發揮重要作用。課題組前期研究顯示長鏈非編碼RNA PVT1在胰腺癌組織和細胞系中呈高表達，結合初步功能實驗和生物信息學預測結果，我們提出PVT1可能通過競爭性阻斷miR-186和miR-203降解c-Myc機制促進胰腺癌演進的假設。擬採用基因轉染和RNAi技術，在體外細胞水平觀察導入或沉默PVT1後對胰腺癌細胞增殖、凋亡和侵襲等生物學行為的影響；進一步套用小動物活體成像技術觀察沉默PVT1對胰腺癌生長和轉移的作用；運用螢光素酶報告系統和RIP技術，探究PVT1是否通過“海綿”吸附miR-186和miR-203方式以維持c-Myc高表達；最後，檢測大病例胰腺癌組織中PVT1和c-Myc表達，結合臨床病理資料，分析PVT1與c-Myc二者間的相關性及其臨床腫瘤學意義；旨在為揭示PVT1在胰腺癌中的分子致癌作用和機制，明確其是否具有轉化套用價值提供可靠的實驗依據。
結題摘要
項目的背景： 胰腺癌是世界範圍內致死性惡性腫瘤之一，5年生存率低於6%，患者確診時往往已有局部或遠處轉移，現有的化療和靶向治療獲益有限。本項目前期發現多量長非編碼RNA在胰腺癌組織中的差異表達，其中顯著上調的PVT1與胰腺癌患者多項臨床病理學參數相關，且PVT1相對高表達患者預後不良，研究PVT1促進胰腺癌惡性增殖的新機制，進而豐富胰腺癌演進的基因調控網路，為胰腺癌治療提供潛在靶點。 主要研究內容： 採用一系列細胞及分子生物學實驗，觀察PVT1對胰腺癌細胞增殖、凋亡、細胞周期分布、自噬和轉移等能力的影響；採用皮下種植製備人胰腺癌細胞荷瘤小鼠模型，套用小動物活體成像技術觀察敲降PVT1對胰腺癌細胞成瘤、生長及轉移等的影響，免疫組化技術檢測胰腺癌細胞增殖、凋亡和自噬分子標誌物的表達；採用RNA pull-down、雙螢光素酶報告基因系統和RIP檢測等技術，明確PVT1調控胰腺癌細胞自噬的轉錄後機制；分析相關分子的臨床病理相關性和預後判斷價值。 研究結果： ① PVT1在胰腺癌組織中高表達，且與臨床預後相關； ② PVT1具有促胰腺癌自噬、增殖和轉移功能； ③ 下調PVT1可抑制胰腺癌自噬、增殖和轉移及裸鼠皮下成瘤； ④ PVT1通過吸附miR-20a-5p調控ULK1表達影響胰腺癌細胞自噬。 科學意義： PVT1經miR-20a-5p/ULK1/自噬途徑促進胰腺癌進展，有望成為胰腺癌治療的新靶點。
