《幽門螺桿菌感染誘導巨噬細胞分化及功能的研究》是依託浙江大學，由舒小莉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：幽門螺桿菌感染誘導巨噬細胞分化及功能的研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：舒小莉
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
幽門螺桿菌（H.pylori，Hp）感染率高，其長期定植及導致不同臨床結局的機制都還不清楚。巨噬細胞（Mφ）密切參與Hp感染過程，卻不能有效將其清除。Mφ不同表型和功能亞群的存在提示我們需重新認識其在Hp感染中的分化。組織蛋白酶X（CTSX）在Hp感染及胃癌的Mφ中高表達，但機制不明；具M2型Mφ分化誘導作用的IL-4能增強Mφ中CTSX表達及活性。我們發現用Hp感染胃上皮細胞的培養濾液與具M1型Mφ誘導作用的TNF-α分別刺激Mφ，其細胞因子及CTSX表達水平不同。因此推測Hp感染後Mφ向M2型分化，並通過CTSX促進腫瘤進展。於是我們建立不同cagA及vacA基因型的Hp臨床分離株感染的胃上皮細胞與Mφ共培養體系，研究Mφ表型及功能的改變，明確其分化方向，進而觀察Mφ對腫瘤細胞功能的影響；通過過表達、抑制酶活性或RNA干擾，觀察CTSX在其中的作用，為Hp感染及胃癌的機制研究提供思路。
結題摘要
巨噬細胞密切參與幽門螺桿菌（H.pylori）感染過程，卻不能將其有效清除。不同表型和功能的巨噬細胞亞群的存在提示我們必須重新認識其在H.pylori感染過程中的分化情況。為探討H.pylori感染後巨噬細胞是否被誘導向M2型巨噬細胞分化，其中組織蛋白酶CTSX表達改變是否是分化中的巨噬細胞促進腫瘤形成的因素，本課題首先從分離H.pylori臨床株並進行CagA、VacA分型鑑定，然後分別用人外周血單核細胞及人單核細胞株Thp-1誘導分化成M1型、M2型巨噬細胞，建立了H.pylori感染的人胃上皮細胞AGS和GES-1與巨噬細胞共培養體系，簡易模擬H.pylori體內感染的發生。通過分析巨噬細胞形態、表型改變及分泌細胞因子功能變化、CTSX表達水平改變，可以得到初步結果：首先，在人外周血單核細胞分別用GM-CSF和M-CSF向M1和M2型巨噬細胞誘導過程中加入經H.pylori感染的胃上皮細胞培養上清後，細胞在生長方式及形態上都有明顯差別，提示幽門螺桿菌可能在其中起了一定的作用；檢測了相應處理後巨噬細胞的表型後發現與AGS的感染上清共培養後的M1型巨噬細胞HLA-DR及CD68的表達明顯高於與GES-1的感染上清共培養的M1型巨噬細胞。在誘導分化的M1、M2巨噬細胞中，M2的CTSX表達水平略高於M1，脂多糖LPS刺激後CTSX沒有明顯的表達增加；而在M1型巨噬細胞誘導培養的第二天開始加入經各種不同臨床株H.pylori感染的胃上皮細胞GES-1培養上清後，CTSX的表達有不同程度的增加，推測有可能使巨噬細胞向高表達CTSX的M2型轉化。巨噬細胞的轉染和干擾較困難，目前正在嘗試構建慢病毒轉染體系，因此對CTSX的抑制性試驗還在進行中。綜合以上結果，H.pylori感染對巨噬細胞的表型及功能有一定影響，有促使巨噬細胞向M2型分化的趨向，但CTSX在其中的作用還有待進一步研究。這對H.pylori感染引起機體巨噬細胞免疫失調提供了一些新的思路。
