《mPRα經PI3K/Akt/mTOR信號通路調控乳腺癌化療敏感性機制的研究》是依託山東大學，由吳曉娟擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：mPRα經PI3K/Akt/mTOR信號通路調控乳腺癌化療敏感性機制的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：吳曉娟
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
多藥耐藥（MDR）是制約乳腺癌化療有效性的主要原因之一。MDR發生與乳腺癌耐藥蛋白（BCRP）過表達緊密相關。我們曾報導，孕激素受體（PR）可經基因組通路抑制BCRP表達；但PR能否經非基因組通路調控BCRP表達，仍未見研究。非基因組通路主要涉及三類孕激素受體：膜PR（mPRs）、PR膜元件（PGRMCs）和核外PRs；其中，mPRα在乳腺癌中高表達，但在調節BCRP表達中的作用機制仍不清楚。前期工作發現，mPRα與BCRP表達存在相關性，且可能與PI3K通路激活有關。基於此，本研究擬以mPRα為靶點，以mPRα-PI3K/Akt/mTOR通路-BCRP為軸線，從組織水平，明確mPRα與BCRP表達的相關性；從分子層次，研究mPRα經PI3K/Akt/mTOR通路調控BCRP表達的機制、探尋通路中的關鍵分子，闡明雷帕黴素增強乳腺癌化療敏感性的可能機制，為臨床提高保守治療成功率提供理論基礎。
結題摘要
化療耐藥是乳腺癌治療常見的困境之一。約30%的浸潤性乳腺癌因乳腺癌耐藥蛋白（BCRP）的過表達而對多柔米星、多西紫杉醇等化療藥的反應性差，故BCRP是逆轉乳腺癌耐藥的重要靶點之一。雌、孕激素核受體在調控乳腺癌中BCRP表達的機制已被闡明，但孕激素膜受體α（mPRα）在調控耐藥中的作用機制未見報導。本研究套用免疫組化的方法，檢測了乳腺癌組織中BCRP、mPRα和磷酸化Akt1 （p-Akt1）的表達，並分析了mPRα和p-Akt1之間的相關性。為觀察mPRα陽性乳腺癌中，其能否經PI3K/Akt/mTOR信號通路調節BCRP的表達，我們選擇孕激素核受體陰性的乳腺癌細胞株、建立過表達BCRP蛋白的耐藥細胞系MDA-MB-453/BCRP和 MDA-MB-231/BCRP；套用 co-IP法，檢測mPRα與p-Akt1的相互結合；套用 western blotting 法，檢測mPRα的特異性配體17β孕酮（17β-PG）調節BCRP表達的效應、PI3K/Akt/mTOR信號通路關鍵分子的表達和mTORC1的抑制劑雷帕黴素對BCRP表達的影響；套用CCK-8法，觀察了雷帕黴素對乳腺癌耐藥細胞株對化療藥多柔米星、多西紫杉醇敏感性的影響。結果顯示，BCRP高表達與乳腺癌預後呈負相關； 17β-PG與mPRα結合後，可活化PI3K/Akt/mTOR信號通路繼而調控BCRP的表達；雷帕黴素可下調BCRP的表達，並增強乳腺癌對化療藥的敏感性。綜上所述，本研究闡述了BCRP是乳腺癌預後不良的危險因素，而mPRα可經PI3K/Akt/mTOR信號通路調控BCRP表達的機制。這為雷帕黴素聯合化療藥，靶向增強mPRα陽性乳腺癌對化療敏感性提供實驗依據。此外，課題組還發現，mPRα確實能經非基因組通路調控MM-9的表達，以NF-κB為靶點可以抑制腫瘤細胞的遷移，這為靶向性抑制乳腺癌浸潤轉移的能力提供實驗依據，並填補激素受體經非基因組通路調控MMP-9表達的研究空白。
