《Sirtuins參與TCEP致細胞損傷的線粒體調控機制研究》是依託華中科技大學，由袁晶擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Sirtuins參與TCEP致細胞損傷的線粒體調控機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：袁晶
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
三(2-氯乙基)磷酸酯(TCEP)是一種廣泛使用的新型阻燃增塑劑，並廣泛存在於各種環境中。實驗室研究已證實TCEP有肝腎毒性、生殖毒性、神經毒性和致癌性。因此，各國政府及科學界已高度關注該物質對人群健康的潛在影響。線粒體是決定細胞命運的關鍵因素。Sirtuin蛋白作為新的抑癌因子家族參與線粒體對細胞能量代謝、氧化應激、細胞增殖和凋亡的調控。本研究擬用TCEP純品和飲用水樣TCEP提取物處理多種肝細胞(L02和HepG2細胞)和原代大鼠肝細胞，以細胞氧化應激為切入點，研究TCEP引起細胞氧化應激對線粒體功能的影響；通過用Sirtuins的抑制劑來研究p53介導的受試細胞線粒體凋亡機制和/或周期調控機制；結合用基因沉默技術和轉染螢光質粒重組技術重點研究Sirtuins在TCEP致肝細胞損傷的線粒體調控機制中的作用。為揭示TCEP致肝細胞損傷機制及評價TCEP的潛在健康風險提供科學依據
結題摘要
本研究主要內容包括：用固相萃取-氣質聯用技術分析了武漢市C（長江為水源）和H（漢江為水源水廠四季源水）、出廠水和末梢水中三（2-氯乙基）磷酸酯（Tris（2-chloroetyl）phosphate, TCEP）含量。評價了水樣有機提取物的細胞毒性。分析了TCEP(3.12mg/L、12.50mg/L、50.00mg/L和200.00mg/L)處理L02、HepG2和Chang細胞24h和48h時線粒體功能及細胞周期。用SIRT1干擾劑（EX-527）和siRNA技術探索了PI3K/AKT/mTOR通路在TCEP致細胞生長抑制的調控機制以及p53非依賴p21Waf1/Cip1/Rb信號通路在TCEP誘導細胞衰老中的作用。 本研究重要結果包括：①除兩水廠秋季源水及H水廠秋季出廠水外，其餘水樣均檢出TCEP。兩水廠冬季源水TCEP檢出濃度均最高（C水廠：676.23ng/L；H水廠：504.60ng/L），秋季源水均最低（低於8.80ng/L的檢出限）；②C水廠秋季出廠水TCEP檢出濃度最高（77.79ng/L），春季最低（33.42ng/L）；H水廠夏季出廠水TCEP濃度最高（104.13ng/L），秋季出廠水低於8.80ng/L的檢出限；③兩水廠夏秋季末梢水中位TCEP濃度均高於冬春季，但同季兩水廠末梢水的TCEP濃度無差異性；④相對其他季節：C水廠夏季源水和H水廠冬季源水的有機提取物對細胞活力影響最大，兩水廠四季源水最高有機提取物濃度均誘導了細胞凋亡；⑤TCEP可誘導Chang細胞線粒體功能紊亂，並致細胞周期阻滯；⑥PI3K/AKT/mTOR信號通路參與調控TCEP致肝細胞（L02和HepG2細胞）生長抑制；⑦p53非依賴性p21Waf1/Cip1-Rb信號通路參與調控TCEP致L02細胞的衰老。 本研究揭示了武漢市兩個主要水廠的源水、出廠水和末梢水TCEP濃度的季節變化特點及水樣有機提取物的細胞毒性。另提示TCEP可致線粒體功能紊亂及肝細胞周期阻滯，並通過PI3K/AKT/mTOR信號通路調控細胞的生長抑制，p53非依賴性p21Waf1/Cip1-Rb信號通路參與了細胞衰老的調控。本研究為水質防控及深入研究TCEP暴露人群的健康損傷提供了科學依據。
