《Taq DNA聚合酶》是2018年7月1日實施的一項中國國家標準。
基本介紹
- 中文名:Taq DNA聚合酶
- 外文名:Taq DNA polymerase
- 標準號:GB/T 35542-2017
- 標準類別:產品
《Taq DNA聚合酶》是2018年7月1日實施的一項中國國家標準。
耐熱DNA 聚合酶(Taq DNA 聚合酶):1969年人們從美國黃石國家森林公園火山溫泉中分離出一種嗜熱的水生真菌Thermusaquaticus,能在70~ 75C生長,從該菌分離純化得到一種耐熱的、依賴DNA 的DNA 聚合酶,簡稱Taq DNA 聚合酶。耐熱DNA聚合酶是一種可抗高溫的蛋白質,5'-3'聚合酶活性,有Taq DNA 聚合酶、...
在套用Taq DNA聚合酶進行PCR反應時,變性往往在94~95°C條件下進行,這也是Taq DNA 聚合酶進行30個或者30個以上PCR循環而活力不受到過多損失時所能耐受的最高溫度。然而這種酶的保真度不高,因為這種酶的DNA聚合作用依賴於3'-5’校正。與一般酶不同,用Taq酶擴增DNA時常使片段3'端凸出一個A,應注意.這是因為...
Taq DNA 聚合酶 Taq DNA 聚合酶是生物化學與分子生物學名詞。
Taq聚合酶是我國台灣科學家錢嘉韻女士所分離,錢嘉韻是第一個報導分離耐高溫DNA聚合酶工作的,1973年,錢嘉韻(Alice Chien)就讀於美國俄亥俄州辛辛那提大學生物系,她的導師對Thermus aquaticus十分好奇,就讓錢嘉韻以該細菌作為研究主題。在另一位老師的指導下,錢學會了從細胞中分離蛋白質,成功分離出該細菌耐高溫的Taq...
《Taq DNA聚合酶》是2018年7月1日實施的一項中國國家標準。編制進程 2017年12月29日,《Taq DNA聚合酶》發布。2018年7月1日,《Taq DNA聚合酶》實施。起草工作 主要起草單位:中國農業大學、廈門致善生物科技股份有限公司、福建華燦製藥有限公司、福建南生科技有限公司、廈門大學、華燦南生(廈門)生物技術有限公司...
Taq DNA聚合酶在95℃時極強的熱穩定性。本系統利用的測序級Taq DNA聚合酶是一種Taq DNA聚合酶的修飾產品,對於雙鏈DNA模板有非常好的效果,具有高度的準確性,能產生均一的條帶,且背景低。SILVER SEQUENCETM系統包含被修飾的核苷酸混合物,如7-去氮dGTP(7-deaza dGTP,或dITP)替代dGTP可清除由GC豐富區域所引起...
耐熱性DNA聚合酶 耐熱性DNA聚合酶(Taq DNA polymerase)是1995年公布的醫學名詞。公布時間 1995年,經全國科學技術名詞審定委員會審定發布。出處 《醫學名詞 第三分冊》第一版。
1976年,A.Chien從中分離純化到了耐熱的TaqDNA聚合酶(簡稱,Taq酶)。隨著PCR技術的推廣和套用,對TaqDNA聚合酶性質的研究日漸重要。RandallK.Saiki首度將其套用於PCR技術,使得PCR過程實現了自動連續循環。TaqDNA聚合酶是一種耐熱的DNA聚合酶,屬於DNA聚合酶I家族。酶基因全長2496個鹼基,編碼832個胺基酸,分子量為...
Taq DNA聚合酶在95℃時極強的熱穩定性。本系統利用的測序級Taq DNA聚合酶是一種Taq DNA聚合酶的修飾產品,對於雙鏈DNA模板有非常好的效果,具有高度的準確性,能產生均一的條帶,且背景低。SILVER SEQUENCETM系統包含被修飾的核苷酸混合物,如7-去氮dGTP(7-deaza dGTP,或dITP)替代dGTP可清除由GC豐富區域所...
由1983年美國Mullis首先提出構想,1985年由其發明了聚合酶鏈反應,即簡易DNA擴增法,意味著PCR技術的真正誕生。到如今2013年,PCR已發展到第三代技術。1976年,中國科學家錢嘉韻,發現了穩定的Taq DNA聚合酶,為PCR技術發展也做出了基礎性貢獻。PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經常是60°C...
和Pfu DNA 聚合酶的混合物。有5’-3’外切酶活性和3’-5’外切酶活性,具備擴增效率高,錯配率低的特點。與Taq DNA 聚合酶相比,Taq Plus DNA 聚合酶具有擴增長度增加(簡單模板可有效擴增長達20 kb,對複雜模板也可達10kb)、保真度好等優點;與Pfu DNA 聚合酶比較,具有擴增速度快,反應效率高的優勢。
聚合酶有DNA聚合酶(以DNA為模板合成DNA大腸埃希菌DNA聚合酶Ⅰ,大腸埃希菌DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow大片段),T4或T7噬菌體DNA聚合酶等);RNA聚合酶(以DNA為模板合成RNA,T7或T3噬菌體RNA聚合酶);逆轉錄酶(以RNA為模板合成DNA,除RNA病毒中發現外,發現大腸埃希菌DNA聚合酶Ⅰ和Taq DNA聚合酶都有逆轉錄...
以便它與引物結合,為下輪反應作準備;②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈後,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:DNA模板--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按鹼基配對與半保留複製原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補...
DNA連線酶也稱DNA黏合酶,在分子生物學中扮演一個既特殊又關鍵的角色,那就是把兩條DNA黏合成一條。無論是雙股或是單股DNA的黏合,DNA黏合酶都可以藉由形成磷酸酯鍵將DNA在3'端的尾端與5'端的前端連在一起。雖然在細胞內也有其他的蛋白質,例如像是DNA聚合酶在其中一股DNA為模版的情況下,將另一邊的DNA單...
extaq是一種套用LA PCR原理研製出的具有3'→5'Exonuclease活性(Proof Reading活性)的耐熱性DNA聚合酶,可用於DNA序列測定。信息簡介 是套用LA PCR原理研製出的具有3'→5'Exonuclease活性(Proof Reading活性)的耐熱性DNA聚合酶。在普通的PCR條件下,與Taq DNA Polymerase相比,具有擴增效率高、配錯率低...
酶分子定向進化原理 酶分子的定向進化是從一個或多個已經存在的親本酶(天然的或人為獲得的)出發,經過基因的突變和重組,構建一個人工突變酶庫,通過篩選最終獲得預先期望的具有某些特性的進化酶。通常採用PCR技術擴增待進化的酶基因,利用Taq DNA聚合酶沒有3’—5‘校對功能的特性,控制擴增條件,使產物中引入隨機...
可變酶 識別順序中的一個或幾個鹼基是可變的,並且識別順序往往超過6個鹼基對。如,BstpⅠ,其識別順序為GGTNACC。DNA聚合酶 (最常用的DNA聚合酶有以下4種)DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅰ大片段——Klenow片段、TaqDNA聚合酶、T4噬菌體DNA聚合酶、一DNA聚合酶Ⅰ E.ColiDNA聚合酶Ⅰ(DNApolⅠ)是一個具有3種酶...
PCR 產物的特異性取決於寡核苷酸引物與模板DNA互補的程度。引物設計的基本原則是最大限度地提高擴增效率和特異性,同時儘可能抑制非特異性擴增。反應中的引物至少應含有18個與模板序列完全互補的核苷酸(常用軟體通常默認為20個),最大不能多於38個,否則最適延伸溫度會超過TaqDNA聚合酶的最適溫度(74℃),不能保證...
熱啟動PCR(hot start PCR)是指使Taq DNA 聚合酶只有在樣品溫度至少超過70℃時才發揮作用的PCR,可提高反應的特異性。Taq DNA 聚合酶通常在比適宜溫度低得多的條件下仍有較強的活性。PCR 反應的最初加熱過程中,樣品溫度上升到70℃之前,在較低的溫度下引物可能與部分單鏈模板形成非特異性結合,並在Taq DNA ...
其中包括大腸桿菌DNA聚合酶I的Klenow片段(Sanger等,1977),反轉錄酶(見文獻,如Mieredorf和Prfeffer,1987)經過修飾消除了3'→5'外節酶活性的T7噬菌體DNA聚合酶(Sequenase)和(測序酶2.0),(Tabor和Richardson,1978)惟及從嗜熱水生菌(T'hermus aquaticus)分離的耐熱DNA聚合物(Taq DNA聚合酶)。
此引物範圍就在包括所欲擴增的DNA片段,一般需20-30個鹼基對,過少則難保持與DNA單鏈的結合。引物與互補DNA結合後,以靶DNA單鏈為模板,經反鏈雜交復性(退火),在Taq DNA聚合酶的作用下以4種三磷酸脫氧核苷(dNTP)為原料按5'到3'方向將引物延伸、自動合成新的DNA鏈、使DNA重新複製成雙鏈。然後又開始第二...
PCR 反應體系主要由寡核苷酸(引物)、4 種dNTP、Taq DNA 聚合酶、靶序列DNA 和PCR 反應緩衝液體系組成。一般原則 (1)引物長度- 一般15~ 30鹼基,過短則特異性低; 過長則會引起引物間的退火而影響有 效擴增。(2) 避免內部二級結構,避免序列內有較長的迴文結構,使引物自身不能形成髮夾結構。(3) G/C 和A...
②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈後,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:DNA模板--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按鹼基配對與半保留複製原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補的半保留複製鏈。延伸時間原因 用PCR...
同時要設立陰性對照,即用已知陰性細胞或組織切片作陰性對照,實驗結果應呈陰性,表示實驗方法無假陽性結果;也可以用實驗細胞或組織切片,不加標記的dUTP(直接法),PCR結果顯示陰性,或不加引物或不加TaqDNA聚合酶等,結果均應陰性。原位PCR中直接法和間接法有何異同 直接法:進行原位PCR擴增以前,把同位素或非...
PCR板是一種在聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中主要作為參與擴增反應的引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核酸、Mg、緩衝液等的承載物。材質 其本身材質在當今主要以聚丙烯(PP)為主,能更好適應PCR反應過程中反覆高低溫設定,並且能夠實現高溫高壓滅菌操作。為配合排槍、PCR儀等實現高通量操作,較常...
模板DNA經加熱至93℃左右一定時間後,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備。2. 模板DNA與引物的退火(復性)模板DNA經加熱變性成單鏈後,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈互補序列配對結合。3. 引物的延伸 DNA模板-引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用...
Taq DNA聚合酶(Promega),pfu DNA聚合酶購於上海生工公司,DIG DNA Labeling and Detection Kit(Boehringer Mannheim)。PCR擴增反應引物為蕪菁花葉病毒外殼蛋白基因兩端序列:引物1:5’-GCG TCG ACC ATG GCA GGT GAA ACG CTT G-3’引物2:5’-TGT CGA CTT TAT TCC CGG GTC ATA ACC CCT GAA CGC C-3’...
模板DNA(10~100ng)寡核苷酸引物(20mmol/L貯存液,可向Operon Technologies或Perkin Elmer公司購買,也可以自己合成)RAPD分析軟體 0.2 mmol/L dNTPs(必須使用高質量的dNTPs,這一點非常重要。dNTPs經反覆化凍後會發生降解,因此應分成小份保存。應注意混合物中四種dNTP的量要相等)Taq DNA聚合酶(Perkin Elmer,...