Taq聚合酶

Taq聚合酶的缺點之一為催化DNA合成時的相對低保真性。它缺乏3’→5’核酸外切酶的即時校正機制，出錯率為1/90000。

基本介紹

• 中文名：Taq聚合酶
• 本質：DNA聚合酶
• 發現於：水生棲熱菌
• 適用：PCR擴增、DNA標記、引物延伸

套用

水生棲熱菌是一種生長在溫泉、蒸汽管道等處的細菌，它體內的Taq聚合酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，這在需要高溫環境的PCR反應中有著重要意義。因此Taq聚合酶取代了之前常用於PCR反應的大腸埃希菌中的DNA聚合酶。PCR反應中套用Taq聚合酶，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷，大大降低了成本，PCR技術得以大量套用，並逐步套用於臨床。

一般適用於DNA片段的PCR擴增、DNA標記、引物延伸、序列測定、平末端加A等，產物可直接用於T-A克隆載體。

酶單位

1單位（U）Taq DNA 聚合酶活力定義為在74°C、30分鐘內，以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物，將10nmol脫氧核苷酸摻入到酸不容物質所需的酶量。

發現

托馬斯·D·布洛克(Thomas D. Brock)團隊於1965年在美國黃石公園裡熱泉中發現並成功分離嗜熱細菌海棲熱袍菌(Thermus aquaticus)。Taq聚合酶是我國台灣科學家錢嘉韻女士所分離，錢嘉韻是第一個報導分離耐高溫DNA聚合酶工作的，1973年，錢嘉韻(Alice Chien)就讀於美國俄亥俄州辛辛那提大學生物系，她的導師對Thermus aquaticus十分好奇，就讓錢嘉韻以該細菌作為研究主題。在另一位老師的指導下，錢學會了從細胞中分離蛋白質，成功分離出該細菌耐高溫的TaqDNA聚合酶。Taq聚合酶是從嗜熱細菌海棲熱袍菌（Thermus aquaticus）中分離出的DNA聚合酶。

• Chien A, Edgar DB, Trela JM (1976)."Deoxyribonucleic acid polymerase from the extreme thermophile Thermus aquaticusJ. Bact.127(3): 1550–7.
  
• Brock, Thomas D.; Hudson Freeze (August 1969)."Thermus aquaticus gen. n. and sp. n., a nonsporulating extreme thermophile"Journal of Bacteriology(American Society for Microbiology)98(1): 289–297.
  
• Brock, Thomas D. (15 May 1964). "Knots in Leucothrix mucor".Science144(3620): 870–872.