《HIV融合抑制劑對gp41融合中間態作用的研究》是依託復旦大學，由陸路擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：HIV融合抑制劑對gp41融合中間態作用的研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：陸路
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
HIV融合抑制劑由於其特有的優勢逐漸成為抗HIV研究的熱點。Gp41融合中間態是融合抑制劑的重要靶點之一，但唯一一個被美國FDA批准針對gp41融合中間態的多肽藥物T20其作用機制依然是不明確的，這大大限制了以其為基礎的具有更高活性的新型藥物的最佳化和研發。最近，我們發現T20與一些針對gp41融合中間態的特異性單抗在抗HIV活性上具有顯著的協同作用，但是同樣衍生於 gp41 CHR的C34等卻沒有相同的效應，這些結果提供了創新並獨特的證據證明T20的作用機制與C34等具有明顯的不同。為了揭示其中的具體細節，本研究擬採用流式細胞術等技術，以多種針對gp41融合中間態的抗體為探針來檢測不同條件下T20等對HIV-1膜融合過程的時空影響，以期探明其對膜融合過程及gp41融合中間態的具體影響，並最終為揭示T20的獨特作用機制以及發展新型的抗HIV藥物和顯著抗變異的聯合治療方案提出新的理論依據。
結題摘要
本課題圍繞之前所制定的研究計畫及任務開展，計畫要點均已執行，並獲得了重要的結果，共發表標註項目號的SCI論文13篇，總影響因子54.55，其中第一作者或通訊作者SCI論文12篇，影響因子大於10分的1篇。申請課題相關的國家專利5項，獲得美國授權專利1項。在論文及專利方面超額完成課題預期的指標。在研究內容上，通過深入的分析針對HIV-1包膜蛋白gp41不同位置的抗體，發現了2G8單抗相比目前國際上套用最廣泛的NC-1單抗更具優勢，它在高濃度下也不結合NHR區，只對gp41六螺旋特異性識別。利用該單抗，我們根據研究計畫在國際上首次建立了gp41六螺旋形成抑制試驗的細胞模型，該模型相對於之前的生化模型更能模擬生理狀態下gp41六螺旋的變化過程。因此我們在該模型上深入的研究了T20對HIV gp41介導的融合空窗期產生的影響，結果發現T20在生理狀態下對膜融合過程中gp41六螺旋形成的影響具有明顯的兩步效應：在六螺旋形成前期T20可抑制其形成，但隨著融合的加劇及融合孔的形成，在空窗期的後期六螺旋仍然形成了，這時的T20可能利用其C端區域作用於gp41的融膜肽從而起到了抑制作用，該研究揭示了T20新的作用靶點及作用機制細節。此外，我們還發現由於T20對融合中間態的影響，其可使作用於gp41 NHR區域的非中和抗體具有了中和活性，兩者聯合使用具有顯著的協同效應，特別對於各種類型的HIV耐藥毒株，該發現為愛滋病治療性疫苗提供了新的策略。在以上研究的同時，我們還在國際上首次系統的提出了HIV蛋白滅活劑的概念，並設計出國際上首個以CD4誘導的NHR暴露的gp120/gp41融合中間態為靶點的HIV-1蛋白滅活劑—2DLT。2DLT與之前的抑制劑不同，可在缺乏靶細胞的情況下直接滅活HIV-1病毒，將可開發成一種全新的抗病毒藥物。綜上，通過本課題的開展對研發具有高效、廣譜和抗變異特徵的新一代愛滋病治療藥物提供了重要的理論依據和實驗基礎。
