《基於重組蛋白的HIV滅活劑的設計及其作用機制的研究》是依託復旦大學，由姜世勃擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：基於重組蛋白的HIV滅活劑的設計及其作用機制的研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：姜世勃
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
目前，在臨床上使用的抗愛滋病藥物都是在HIV感染靶細胞的過程中或進入靶細胞後發揮作用。因此，它們都只能被動地防禦 - 即抑制病毒的侵染和複製，並不能在沒有靶細胞的存在狀況下主動的進攻和滅活病毒。而去污劑等有機化合物雖然能夠通過破壞HIV的包膜來滅活病毒，但其非特異性融膜作用可造成對正常細胞的破壞。在前期的工作中，我們設計並獲得了一種蛋白類HIV滅活劑 - DLP，它能夠在沒有靶細胞的存在的狀況下快速、特異地滅活HIV-1 B亞型病毒。在本申請課題中，我們將使用分子生物學、生物化學等技術對DLP的三個功能區進行修飾和最佳化，檢測它們對在中國流行的HIV-1亞型病毒的滅活效能，並深入地研究它們的作用機制，為研發具有中國自主智慧財產權、可在中國治療愛滋病的新型抗HIV藥物提供理論和實驗依據。
結題摘要
本課題圍繞目前臨床抗HIV藥物不能主動進攻和滅活病毒這個關鍵科學問題開展研究，順利地完成了課題，獲得了一些重要的成果。共發表標註項目號的SCI論文33篇，總影響因子135，其中通訊作者SCI論文26篇，影響因子大於5分的7篇。申請課題相關的國家專利8項。在論文及專利方面超額完成課題預期的指標。 在本研究中，我們在國際上首次系統的提出了HIV蛋白滅活劑的概念，並設計出首個以CD4誘導gp41 NHR暴露的融合中間態（PFI）為靶點的HIV-1蛋白滅活劑—2DLT。其包括由3個功能區 (D、L、P)，其中D功能區為sCD4分子內與gp120結合的D1D2結構域，它能夠特異性的與HIV 包膜蛋白gp120結合，誘導gp41構象變化形成NHR暴露的PFI，而P功能區為衍生於gp41 CHR 區的C-多肽 ─ T1144 (第三代HIV融合抑制劑)，它能夠與暴露的gp41 NHR強力地結合，從而快速的使中間態失去穩定性，使病毒喪失感染活性而達到滅活病毒的目的。L功能區為7重複的（GGGGS）序列，它負責將D功能區和P功能區連線起來，使它們能自由地移動或變構而發揮各自的功能。2DLT既可抑制HIV-1與靶細胞融合，也可在細胞外滅活HIV-1病毒。2DLT與臨床藥物（包括HIV進入抑制劑、核苷和非核苷逆轉錄酶抑制劑，及蛋白酶抑制劑s）聯合使用具有很強的協同作用。用經過最佳化的CD4單結構域 - D1m替換2DLT的D功能區的CD4雙結構域所形成的D1LT比2DLT的分子量小了一半，與gp120的結合力明顯增強，對HIV-1的抑制活性和滅活作用顯著提高。我們還發現使用人工序列合成的多肽 - AP3在成藥性方面比T1144有更多的優點，我們將使用AP3來替換D1LT的P功能區的T1144 來構建新的HIV蛋白滅活劑。 綜上所述，本課題的開展對於研發高效、廣譜HIV滅活蛋白作為新一代愛滋病治療藥物提供了重要的理論依據和實驗基礎。
