《HDAC9在缺血性腦損傷中的作用和機制研究》是依託浙江大學，由戴海斌擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：HDAC9在缺血性腦損傷中的作用和機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：戴海斌
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
最近人類全基因組關聯分析（GWAS）研究發現，組蛋白去乙醯化酶9（HDAC9）與大血管腦卒中密切相關。我們前期的預實驗也發現，小鼠腦缺血後HDAC9的表達增加，而HDAC9基因敲除能保護缺血性腦損傷，但其具體機制還不清楚。我們根據已有的文獻、預實驗及對HDAC9分子結構研究，提出假設：在缺血性腦損傷中，CaMKⅡ的激活促使HDAC9絲氨酸位點的磷酸化，導致HDAC9與DNA結合位點分離，從而提高MEF2等下游基因的轉錄活性，進而發揮神經保護作用。我們擬利用HDAC9基因敲除小鼠、RNA干擾、基因過表達、蛋白質譜等技術從整體、細胞和分子水平上對以上假設進行驗證。本課題的完成，將進一步深入認識HDAC9在中樞神經系統中的作用，並可從抑制HDAC9的活化出發，為治療缺血性腦損傷等疾病提供新的方向。
結題摘要
組蛋白去乙醯化酶9（HDAC9）與大血管腦卒中密切相關，但其在缺血性腦損傷中的機制目前還不清楚。課題組首先在tMCAO小鼠模型上發現，再灌注後的24h內HDAC9的表達不斷上升，進一步用免疫組化方法顯示HDAC9主要表達在神經元上。同樣在培養的神經元細胞上，OGD復灌以後HDAC9的表達不斷上升。我們進一步利用CRE-LOXP技術構建Camk II 陽性神經元上敲除HDAC9（HDAC9 CKO）小鼠，發現與WT小鼠相比，HDAC9 CKO小鼠梗死體積更小，神經元的丟失更少，神經損傷症狀更輕。利用HDAC9腺病毒重新恢復HDAC9 CKO小鼠的HDAC9表達後，發現該組小鼠腦缺血損傷較對照組更大。另外，在培養的神經元細胞中，利用siRNA及病毒轉染等技術，發現抑制HDAC9會降低OGD再灌注的損傷，而高表達HDAC9可以促進OGD再灌注造成的損傷。另外，我們對HDAC9 CKO小鼠的大腦皮層進行了乙醯化晶片與表達譜晶片分析，鎖定表達上調的PKG 2 作為HDAC9下游的候選分子；另外，western bolt、免疫組化以及螢光定量PCR的結果都顯示，HDAC9 CKO小鼠在缺血後PKG2的表達較對照組更高。PKG抑制劑KT5823逆轉HDAC9 CKO小鼠腦缺血梗死體積的減少、神經功能評分更高。本課題的完成，初步明確了神經元上的HDAC9在缺血性腦損傷中的作用和機制，並提示通過選擇性抑制HDAC9及下游通路，為治療缺血性腦損傷提供新的靶點和思路。
