ESBLs是英文“Extended Spectrum Beta-Lactamases”的縮寫，中文翻譯為“超廣譜β-內醯胺酶”。大腸桿菌、肺炎克雷伯桿菌、鮑曼不動桿菌等通常最易生產，其次，陰溝腸桿菌、粘質沙雷氏菌、弗勞地枸櫞酸菌、綠膿桿菌也可生產。其特點是可以水解滅活青黴素類抗生素、頭孢菌素（主要為第三代頭孢菌素，如頭孢他啶、頭孢哌酮等，馬斯平等除外）和單環β-內醯胺類抗生素（氨曲南、卡蘆莫南等），通常不水解頭黴素類（頭孢西丁、頭孢美唑等）和碳青黴烯類（亞胺培南、美羅培南等）。其活性可以被克拉維酸、舒巴坦、他唑巴坦等β-內醯胺酶抑制劑所抑制。我國的產ESBLs菌株主要是分解頭孢噻肟的CTX-M型。
基本介紹
- 中文名：超廣譜β-內醯胺酶
- 外文名：Extended Spectrum Beta-Lactamases
- 縮寫：ESBLs
- 實質：藥品
耐藥特點,預防,選擇治療,檢測方法,擴散法,最低濃度,特殊試驗,推薦方法,
耐藥特點
如果臨床出現產ESBLs菌株，則對青黴素類、第三代頭孢菌素（頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢哌酮、頭孢曲松等）、單環β-內醯胺類抗生素（氨曲南）耐藥，ESBLs在實驗室有一專門的檢測方法，如果病人的藥敏報告單已註明為產ESBLs菌株，則表明已經實驗室確證。如果病人藥敏報告單未註明為產ESBLs菌株，三代頭孢菌素和單環醯胺類抗生素中有一種MIC≥2ug/ml，或符合CAZ≤22mm、ATM≤27mm、CTX≤27mm、CRO≤25mm其中一個，則提示菌株可能產ESBLs，這種情況下，即使實驗室報告為敏感的第三代頭孢菌素和單環β-內醯胺類抗生素，在臨床也不推薦使用。
預防
第三代頭孢菌素和單環β-內醯胺類抗生素的廣泛套用是導致產ESBLs菌株出現及傳播的主要因素，此外，尚有其它因素。若臨床出現產ESBLs菌株，會在病人和醫院之間及不同菌株之間相互傳播，導致臨床高死亡率及高比率持續性定殖，應充分引起注意。因此，在治療時，減少第三代頭孢菌素和單環β-內醯胺類抗生素的套用，可以顯著降低產ESBLs菌株的出現。
大腸桿菌
大腸桿菌選擇治療
哌拉西林/他唑巴坦對付產ESBLs菌株，最有效的抗生素為碳青黴烯類，亞胺培南、美羅培南等較為常用。其次，頭黴素類中的頭孢西丁、頭孢美唑等對其也有效。因為ESBLs活性可以被克拉維酸、舒巴坦、他唑巴坦等β-內醯胺酶抑制劑所抑制，所以，也可以選擇β-內醯胺類抗生素和β-內醯胺酶抑制劑的混合製劑，如替卡西林/克拉維酸、頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等，但如果細菌同時產ESBLs和AmpC酶，這種方法就沒用了，因為AmpC酶可以水解以上抗菌藥物，且其活性不被克拉維酸、舒巴坦等β-內醯胺酶抑制劑所抑制。
檢測方法
目前檢測ESBLs的常用方法有雙紙片協同試驗（即阿莫西林雙紙片協同試驗與替卡西林雙紙片協同試驗，以NCCLS紙片表型確證試驗測定結果為標準，篩選出產ESBLs）、紙片表型確證試驗、瓊脂稀釋法確證實驗、三維試驗等。
擴散法
2.確認試驗:用頭孢他啶(每片30μg)和頭孢他啶加克拉維酸(30μg和10μg);頭孢噻肟(每片30μg)和頭孢噻肟加克拉維酸(30μg和10μg);分別測量2種紙片單獨及加克拉維酸的抑菌環直徑。加克拉維酸較不加克拉維酸的抑菌環直徑≥5mm可確認為ESBLs菌株。
質控菌株:大腸埃希菌ATCC25922(頭孢他啶:頭孢他曉+克拉維酸≤2mm;
肺炎克雷伯菌ATCC700603(頭孢他啶:頭孢他啶+克拉維酸≥5mm)。
最低濃度
1.篩選試驗:選用頭孢泊肟、頭孢他啶、氨曲南、頭孢噻肟或頭孢曲松至少2種以上,用陽離子增強的MH肉湯(標準肉湯稀釋法)稀釋至1mg/L,凡被測菌在上述各管中能夠生長(MIC≥2μg/ml),均應高度懷疑為ESBLs,應進一步作確認試驗來加以確診。
2.確認試驗:用標準肉湯稀釋法測定MIC的方法,按NCCLS(1997)推薦的篩選和確認ESBLs的標準進行判斷。選用頭孢噻肟單獨稀釋(範圍0.25~64mg/L)及頭孢噻肟(稀釋範圍相同)加克拉維酸(每管4mg/L);頭孢他啶單獨稀釋(範圍0.25~128mg/L)及頭孢他啶加克拉維酸(每管4mg/L),上述2種藥物必須同時進行試驗,結果加克拉維酸和不加克拉維酸的MIC差值如≥8倍(3個稀釋度),可確認為ESBLs菌株。質控菌株:大腸埃希菌ATTC25922(頭孢他啶:頭孢他啶+克拉維酸<8倍);肺炎克雷伯菌ATCC700603(頭孢他啶:頭孢他啶+克拉維酸≥8倍)。
特殊試驗
1.在MicroScan的一些藥敏試劑條中包括了頭孢泊肟、頭孢他啶或氨曲南,且每種試劑條均有2種指示藥物,當被試菌對這些指示藥物的MIC≥2mg/L時,即可篩選出可疑的ESBLs菌株,符合NCCLS(1999)推薦的篩選藥物組合及濃度範圍,可用於ESBLs的篩選。
2.用濃度梯度法(Etest法)的常規試條中的三代頭孢菌素或氨曲南(2種以上),凡MIC≥2mg/L時,即高度懷疑為ESBLs,應進一步作確認試驗來加以確診。現有2種Etest法的ESBLs確認試條,分別是頭孢噻肟及頭孢噻肟加克拉維酸、頭孢他啶及頭孢他啶加克拉維酸。檢測結果加克拉維酸和不加克拉維酸的MIC差值≥8倍（3個稀釋度）,可確認為ESBLs菌株。
Etest檢測ESBLs的具體操作步驟是
(1)在常規試驗中選出對三代頭孢MIC≥1mg/L的菌株(比NCCLS的標準低一個稀釋度);
確認試驗:用頭孢噻肟和頭孢他啶);
(4)再測定該菌對其他非β內醯胺抗生素的藥敏模式,以指導抗菌治療或收集流行病學資料。
推薦方法
2.三相擴散法:該法又有直接法和間接法2種。直接三相擴散法是在紙片擴散法的基礎上略加改動,首先按標準紙片擴散法進行操作,貼上藥敏紙片,在離紙片3mm處打一個小孔(靠近平板中央一側),內加200μl濃度為105~106的菌液,35℃孵育過夜,如在頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢曲松或氨曲南周圍的抑菌圈形狀發生改變,試驗為陽性。如果在上述抗生素周圍的抑菌圈很小或沒有抑菌環,應該用間接法重複。間接三相擴散法與直接法不同在於,直接法平板表面塗布的細菌和小孔內的細菌是相同菌,而間接法平板表面塗布的細菌是用已知對
上述藥物均敏感的菌株如大腸埃希菌ATCC25922,小孔內為試驗菌。如出現試驗菌孔干擾敏感菌株形成抑菌環的現象即判斷為陽性。該試驗的優點在於可以同時了解細菌對抗生素的敏感情況和產ESBLs的情況,但需要有經驗的人員來判斷結果。
