《定量免疫電泳》是1980年科學出版社出版的圖書,作者是阿克塞爾森。
基本介紹
- 中文名:定量免疫電泳
- 作者:阿克塞爾森
- 譯者:施渭康
- 出版時間:1980年10月
- 出版社:科學出版社
- 書號:130311344
《定量免疫電泳》是1980年科學出版社出版的圖書,作者是阿克塞爾森。
首先應採用血清蛋白區帶電泳,以證實M蛋白的存在,然後進行免疫球蛋白測定和免疫電泳,做進一步的定量分析和分類測定。免疫電泳是將區帶電泳與雙向擴散技術結合的一種免疫化學分析技術。臨床意義 免疫電泳用於M蛋白血症(如多發性骨髓瘤、巨球蛋白血症、輕鏈病、重鏈病等)的診斷與分型。M蛋白血症可分為惡性與意義不明...
《定量免疫電泳》是1980年科學出版社出版的圖書,作者是阿克塞爾森。內容簡介 本書首先敘述定量免疫電泳的基本原理、條件及其所需抗體的製備方法,接著詳細介紹了近年來新發展的各類定量免疫電泳的原理、操作步驟、評價及其實際套用,並附有編號的文獻索引,可供讀者進一步查閱原著。本書可作為免疫學、血清學、免疫化學、...
單向定量免疫電泳又稱火箭電泳(rocket immunoelectrophoresis)。在瓊脂內摻入適量的抗體,在電場作用下,定量的抗原泳動遇到瓊脂內的抗體,形成抗原—抗體複合物沉澱下來。走在後面的抗原繼續在電場作用下向正極泳動,遇到瓊脂內沉澱的抗原—抗體複合物,抗原量的增加造成抗原過量,使複合物沉澱溶解,一同向正極移動而...
免疫電泳原理是單向免疫擴散和電泳相結合通過觀察利用瓊脂塊變化的定量檢測。電泳時,含於瓊脂凝膠中的抗體不發生移動,而在電場的作用下促使樣品中的抗原向正極泳動。當抗原與抗體分子達到適當比例時,形成一個形狀如火箭的不溶性免疫複合物沉澱峰,峰的高度與撿樣中的抗原濃度呈正相關。當瓊脂中抗體濃度固定時,以...
雙向定量免疫電泳 又稱交叉電泳(crossed electrophoresis)。分兩步進行,先將抗原進行電泳分離各組分,然後再放在抗體瓊脂板上,使各組分在垂直方向再泳動一次,根據各組分的沉澱峰便可定性定量抗原。
放射免疫電泳測定法是將放射性核素測定法和免疫反應相互結合的一種技術。優點是特效、靈敏、精確、簡單、樣品用量少,一般不需複雜的提純步驟。該法已廣泛用於細菌毒素的測定、各種免疫球蛋白和血清蛋白的定量測定等。放射免疫電泳測定法的基本原理是利用放射性核素標記抗原,待測抗原與特異的蛋白質相競爭結合,在體外進...
火箭免疫電泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是將單向免疫擴散和電泳相結合的一種定量檢測技術。電泳時,含於瓊脂凝膠中的抗體不發生移動,而在電場的作用下促使樣品中的抗原向正極泳動。當抗原與抗體分子達到適當比例時,形成一個形狀如火箭的不溶性免疫複合物沉澱峰,峰的高度與撿樣中的抗原濃度呈正相關。因此...
這樣由於電泳的作用,不僅幫助抗體定向移動,因而加速了反應的出現,而且也限制了瓊脂擴散時,抗原抗體向四周自由擴散的傾向,因而也提高了敏感性,本法比瓊脂擴散法的靈敏度要高10~16倍,而且反應時間短,可用於各種蛋白的定性和半定量測定。免疫電泳技術是將瓊脂內電泳和凝膠內沉澱反應相結合的一種常用的免疫學方法,...
放射免疫火箭電泳自顯影法是放射免疫分析中的一種分離及定量測定方法。原理類同放射免疫分析,是建立在火箭電泳基礎上的免疫沉澱放射自顯影術。定義 放射免疫技術為一種將放射性同位素測量的高度靈敏性、精確性和抗原抗體反應的特異性相結合的體外測定超微量(10-10g)物質的新技術。廣義來說,凡是套用放射性同位素標記的...
⒓PCR擴增:加入50μl PCR反應液(內含T3和T7引物),95℃ 60sec,50℃ 110sec,72℃ 110sec,循環30次.取PCR產物10μl於1.7%瓊脂糖凝膠上電泳,和核酸分子量標準相比較,在相應的位置郵現電泳帶為陽性.必需時將電泳結果照相,進行定量分析.PCR產物的檢測與定量技術 (1)凝膠檢測系統 用凝膠掃瞄器或計算機...
3.聚丙烯醯胺凝膠電泳可用於蛋白質定量。電泳後的凝膠經凝膠掃瞄器掃描,從而給出定量的結果。凝膠掃瞄器主要用於對樣品單向電泳後的區帶和雙向電泳後的斑點進行掃描。4.瓊脂或瓊脂糖凝膠免疫電泳可用於①檢查蛋白質製劑的純度;②分析蛋白質混合物的組分;③研究抗血清製劑中是否具有抗某種已知抗原的抗體;④檢驗兩種...
1.單向瓊脂擴散(simple agar diffusion) 簡稱單擴,將特異性抗體與熔化的瓊脂混合均勻,使抗體均勻分布於瓊脂,然後澆製成瓊脂板,再按一定要求打孔並加入抗原,使抗原向孔周自由擴散,與板中的抗體形成沉澱圈。本法為定量試驗,沉澱圈的直徑與抗原濃度成正比。單擴常用於血清中免疫球蛋白、AFP等的定量測定。2.火箭...
火箭免疫電泳 (Rocket immunoelectrophoresis)基本原理:也稱免疫擴散,抗原在含有定量抗體的瓊脂糖中泳動,兩者比例適宜時,在較短時間內生成錐形的沉澱峰。在一定濃度範圍內,沉澱峰的高度與抗原含量成正比。免疫電泳 基本原理:先將待側樣本作瓊脂凝膠電泳,各蛋白抗原組分被分成不同的區帶,然後與電泳方向平行挖一...
ⓓ免疫標記技術。是將放射性核素、螢光素或酶活性物質標記抗原或抗體,使在一般實驗方法中不能觀察到的抗原–抗體反應得以顯示出來。它不但可大大提高抗原–抗體反應的敏感性,而且可對微量物質進行定性和定量檢測。放射性核素標記抗原–抗體反應是將放射性核素分析的高度靈敏性和抗原–抗體反應的特異性結合而建立的...
免疫細胞化學,又稱免疫組織化學,其主要原理是用標記的抗體或抗原對細胞相應抗原或抗體進行定性、定位或定量檢測,經過化學的呈色反應後,用顯微鏡或電子顯微鏡觀察。該技術是免疫螢光技術與形態學技術結合的產物。概述 免疫組化,是套用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使...
20 世紀 30 年代, Tiselies 和 Kabot 建立了血清電泳技術,證明抗體是丙種球蛋白,並利用分離、純化抗體的方法對抗體分子的結構與功能進行研究。Grubar 等人建立了免疫電泳技術,發現了抗體分子的不均一性的本質,從而使抗體分子與結構研究取得了重大進展。抗體生成理論的提出 1897 年, Ehrlich 提出關於抗體產生的...
該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由於免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡常用於鑑定某種蛋白,並能對蛋白進行定性和半定量分析。結合化學發光檢測,可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。原理...
因此,可通過底物的顏色反應來判定有無相應的免疫反應,顏色反應的深淺與標本中相應抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應可通過ELISA檢測儀進行定量測定,這樣就將酶化學反應的敏感性和抗原抗體反應的特異性結合起來,使ELISA方法成為一種既特異又敏感的檢測方法。特性 用於標記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:有高度的...
當光線通過溶液時,可被免疫複合物吸收。免疫複合物量越多,光線吸收越多。光線被吸收的量在一定範圍內與免疫複合物的量成正比。利用比濁計測定光密度值,複合物的含量與光密度值成正比,同樣當抗體量一定時,光密度值也與抗原含量成正比。本法較單向瓊脂擴散試驗和火箭電泳等一般免疫化學定量方法敏感、快速簡便,但...
免疫印跡法是將蛋白質轉移到膜上,然後利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測, 具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優點,是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種最常用的方法,如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或...
火箭電泳又稱電免疫擴散法。是將單向擴散與電泳技術相 結合的一種檢測技術。在電場中,抗原在含 有定量已知抗體的瓊脂凝膠中泳動,在抗 原、抗體比例適當的部位形成錐形沉澱峰, 其形狀如火箭。在一定濃度範圍內,沉澱線 的高度與抗原含量成正比。本法的敏感度與 單向瓊脂擴散相仿,技術操作較為複雜,但 需時間較...
Rubina建立了三維凝膠固定蛋白質的夾心型系列毒素定量免疫分析法。懸浮晶片系 懸浮晶片系採用螢光編碼微球結合流式細胞檢測技術建立起來的一種多組分同時檢測技術,該系統以不同螢光比例的高分子微球作為免疫分析的固相,流式細胞儀可以識別所有這些微球。不同的抗體的標記在特定螢光比例的微球上,和樣品中的抗原反應後,...
24小時尿蛋白定量在0.15~0.5克之間為微量蛋白尿,在0.5~1克之間為輕度蛋白尿,在1~4克之間為中度蛋白尿,大於4克(有學者定為3.5克)為重度蛋白尿。尿蛋白電泳分析 常用的方法有醋酸纖維薄膜電泳、聚丙烯醯胺凝膠電泳、尿蛋白免疫電泳等方法。該方法主要從確定尿中蛋白質的種類出發,通過區分不同尿蛋白...
1.血清蛋白醋酸纖維膜電泳,即蛋白電泳:M蛋白在α2—γ區形成濃密區帶,從掃描圖可見基底較窄、高而尖銳的蛋白峰。在γ區,蛋白峰的高與寬之比>2:1;在β區和α2區>1:1。2.免疫電泳:M蛋白與相應的抗血清形成遷移範圍十分局限的濃密沉澱弧。免疫電泳主要用於M蛋白血症的分型。3.血清Ig定量:血清中某...
但是由於普通凝膠電泳檢測本身的不特異性,只能進行粗略的相對定量,難以滿足人們日益對精確定量的渴望,不過由於普通凝膠電泳光密度分析簡捷易行,成本低,當前還是科研還很常用。但是難以滿足臨床套用的要求。由於固相捕獲技術的成熟和套用,特別是酶聯免疫吸附試驗(ELISA)的成功,給核酸定量提供了一個思路。此後,套用...
儀器:(1)IMx(美國Abbott),(2)電泳儀SCR-300型。方法 AFP定量:按Abbott的IMX儀操作說明書進行測定。AFP異質體測定:稱取5mg ConA加入0.2 ml緩衝液溶解,置56℃預溫,再加入已預溫至56℃的1%瓊脂糖溶液5 ml,混勻,在6 cm×10cm玻璃板一側澆注2cm×10cm的凝膠條。距陰極端1.5cm處加入50μl待檢血清及3...
(3)瓊脂糖透明無紫外吸收,電泳過程和結果可直接用紫外光燈檢測及定量測定。(4)電泳後區帶易染色,樣品極易洗脫,便於定量測定。製成乾膜可長期保存。常用瓊脂糖作為電泳支持物,分離蛋白質和同工酶。將瓊脂糖電泳與免疫化學相結合,發展成免疫電泳技術,能鑑別其他方法不能鑑別的複雜體系,由於建立了超微量技術...
在纖溶酶的作用下,纖維蛋白(原)可以降解產生不同分子量的碎片X、Y、D,E以及其他一些碎片,總稱為纖維蛋白(原)降解產物(FDP)。測定血漿(或尿液)中FDP含量的試驗通常有免疫電泳法、免疫擴散法、絮狀沉澱法、乳膠凝集(Fi)試驗、紅細胞凝集抑制試驗、葡萄球菌聚集試驗、反向血凝試驗以及酶聯免疫吸附試驗等等。正常值...
抗原在含有一定量的單一抗體瓊脂中進行電泳,在電場力的作用下,兩者比例合適時形成沉澱峰類似火箭而得名。沉澱峰的高度與抗原濃度成正比,與抗體濃度成反比,因此可以作為抗原定量試驗。主要反映補體的經典激活途徑。臨床意義 1. C3、C4和(或)CH50均降低,提示激活了補體的經典途徑;C3低伴有正常的C4常提示激活了...