血清補體測定

血清補體測定（sera complement assay）指測定血清中各補體成分及總補體含量的實驗，是測定機體免疫功能的一種方法。補體是廣泛分布於血漿中具有酶活性的一組不耐熱的球蛋白，約占球蛋白的10%，具有溶解靶細胞、促進吞噬、參與炎症反應等功能，同時補體還在免疫調節、清除免疫複合物、穩定機體內環境、參與變態反應及自身免疫性疾病起關鍵性作用。總補體活性和單個補體成分含量的變化，對某些疾病的診斷和療效觀察具有重要意義。

基本介紹

• 中文名：血清補體測定
• 外文名：sera complement assay
• 原理：有CH50和C3、C4、B因子、C1-INH

原理

評估補體系統的常規檢測包括CH50和C3、C4、B因子、C1-INH等。

1. 總補體活性

根據補體能使兔抗羊紅細胞抗體（溶血素）致敏的羊紅細胞發生溶血，其溶血程度與總補體活性有關。總補體活性測定主要反映補體（C1～C9）經傳統途徑活化後的活性。

2. 血清補體C3

C3在補體經典激活途徑與旁路激活途徑中均發揮重要作用。

（1）單向免疫擴散法：將含有抗補體抗體的瓊脂鋪在玻璃板上，然後打孔，加抗原（補體）。在合適的溫度、濕度環境中，經過一定時間擴散，抗原與混勻在瓊脂中的抗體在比例合適處可形成清晰的沉澱環。沉澱環直徑大小與抗原的濃度在一定範圍內成正比。用標準抗原製成標準曲線，可查出被測抗原的含量。

（2）火箭免疫電泳法：當抗原與凝膠中抗體在電場作用下移動，逐漸形成梯度濃度，在抗原抗體比例適當時形成不溶性免疫複合物沉澱線而沉澱，隨著抗原量的減少，沉澱帶越來越窄，形成火箭峰樣沉澱帶，峰形高低與抗原量成正比。以峰高為縱坐標，濃度為橫坐標(對數坐標)繪製標準曲線，可求出待檢樣品內抗原濃度。

3. 血清補體C4

抗原在含有一定量的單一抗體瓊脂中進行電泳，在電場力的作用下，兩者比例合適時形成沉澱峰類似火箭而得名。沉澱峰的高度與抗原濃度成正比，與抗體濃度成反比，因此可以作為抗原定量試驗。主要反映補體的經典激活途徑。

臨床意義

1. C3、C4和（或）CH50均降低，提示激活了補體的經典途徑；C3低伴有正常的C4常提示激活了旁路途徑。

2. 各種腎病時補體變化可不同，急性鏈球菌感染後毛細血管內增生性腎小球腎炎，約85%患者在炎症早期血清補體多明顯下降，以CH50和C3下降最顯著，C4可正常，如急性鏈球菌感染後急性腎炎無併發症，C3在8?12周恢復正常，否則可能轉為慢性腎炎；膜增生性腎小球腎炎，由於患者血清記憶體在C3致腎炎因子 (C3NeF)，激活了旁路途徑，引起C3持續而明顯降低。此外，約78%狼瘡性腎炎以及腎移植排異反應，C3、C4及CH50通常降低，病情穩定後可恢復正常；膜性腎病、IgA腎病、微小病變病，C3大多在正常範圍內。

正常參考範圍

1. 總補體活性

將新鮮的受檢血清作一系列稀釋後，分別加入抗體致敏綿羊紅細胞，經過一定時間反應，根據溶血程度判斷受檢血清中的總補體活性。常用50%溶血活性測定，即CH50。健康人正常參考值為50～100U/mL。

2. 血清補體C3

正常參考值：①單向免疫擴散法為0.80～1.20g/L。②火箭免疫電泳法正常參考值火箭免疫電泳法為0.9879～1.4559g/L。

3. 血清補體C4

正常參考值為130～370mg/L。

注意事項

1. 受檢血清必須新鮮，如放置室溫2h以上，會使補體活性下降。

2. 補體的溶血活性受多種因素的影響，如綿羊紅細胞濃度及致敏抗體的量等。在進行檢測時，需對反應的各個環節作嚴格控制。

3. CH50不能測定補體蛋白的絕對值，也不能測定備解素系統中的成分。