基本介紹
- 中文名:免疫電泳原理
- 定義:單向免疫擴散和電泳相結合通過觀察利用瓊脂塊變化的定量檢測
免疫電泳原理是單向免疫擴散和電泳相結合通過觀察利用瓊脂塊變化的定量檢測。電泳時,含於瓊脂凝膠中的抗體不發生移動,而在電場的作用下促使樣品中的抗原向正極泳動。當抗原與抗體分子達到適當比例時,形成一個形狀如火箭的不溶性免疫復...
免疫電泳(immune electrophoresis)是將瓊脂電泳和雙向瓊脂擴散結合起來,用於分析抗原組成的一種定性方法。由Grabar與Williams於1953年創立。此項技術由於既有抗原抗體反應的高度特異性,又有電泳分離技術的快速、靈敏和高分辨力,是廣泛套用於生物醫學領域的一項免疫學基本技術。正常值 檢查結果呈陰性。臨床意義 異常結果:...
放射免疫電泳測定法是將放射性核素測定法和免疫反應相互結合的一種技術。優點是特效、靈敏、精確、簡單、樣品用量少,一般不需複雜的提純步驟。該法已廣泛用於細菌毒素的測定、各種免疫球蛋白和血清蛋白的定量測定等。放射免疫電泳測定法的基本原理是利用放射性核素標記抗原,待測抗原與特異的蛋白質相競爭結合,在體外進...
免疫固定電泳技術是一種區帶電泳與免疫沉澱反應相結合的技術。基本原理是待測蛋白質在凝膠介質上經電泳分離後,將抗血清加上己分離的蛋白質泳道上或將已加抗血清的濾紙貼於其上。經孵育後,在適當位置產 生抗原抗體複合物並沉澱下來。固定後的電泳凝膠在洗脫液中漂洗除去未結合的蛋白質,僅保留抗原抗體複合物,經...
免疫電泳技術是將瓊脂內電泳和凝膠內沉澱反應相結合的一種常用的免疫學方法,包括免疫電泳、對流免疫電泳和火箭電泳等方法。原理 在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電滲作用,故在電泳時,反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質...
電泳技術和免疫技術結合建立起來的免疫電泳大大推進了免疫學的發展。等電點聚焦技術使電泳解析度大幅度提高。70年代建立了雙向電泳技術,使分子生物學研究進入單個亞基的水平。80年代發明了交變脈衝電場梯度凝膠電泳技術,使真核細胞的染色體DNA分子更好地分離。原理 原理溶液中的粒子由於本身的電離或吸附液體中的某種離子...
免疫固定電泳是一種包括瓊脂凝膠蛋白電泳和免疫沉澱兩個過程的操作。血清IFE可檢測IgG、IgM、IgA等及κ輕鏈、λ輕鏈。原理是將樣本在瓊脂平板上作區帶電泳,分離後其上覆蓋抗血清濾紙,濾紙分別含抗κ輕鏈、抗λ輕鏈,或抗各類重鏈抗血清,當抗體與某區帶中的單克隆Ig結合,可形成免疫複合物沉澱,即固定,再通過...
火箭免疫電泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是將單向免疫擴散和電泳相結合的一種定量檢測技術。實驗原理 電泳時,含於瓊脂凝膠中的抗體不發生移動,而在電場的作用下促使樣品中的抗原向正極泳動。當抗原與抗體分子達到適當比例時,形成一個形狀如火箭的不溶性免疫複合物沉澱峰,峰的高度與撿樣中的抗原濃度呈正...
《定量免疫電泳》是1980年科學出版社出版的圖書,作者是阿克塞爾森。內容簡介 本書首先敘述定量免疫電泳的基本原理、條件及其所需抗體的製備方法,接著詳細介紹了近年來新發展的各類定量免疫電泳的原理、操作步驟、評價及其實際套用,並附有編號的文獻索引,可供讀者進一步查閱原著。本書可作為免疫學、血清學、免疫化學、...
電泳原理 綜述 電泳是電泳塗料在陰陽兩極,施加於電壓作用下,帶電荷的塗料離子移動到陰極,並與陰極表面所產生的鹼性物質作用形成不溶解物,沉積於工件表面。它包括四個過程:電解 (分解)在陰極反應最初為電解反應,生成氫氣及氫氧根離子OH⁻,此反應造成陰極面形成一高鹼性邊界層,當陽離子與氫氧根作用成為不溶於...
根據自動化程度不同分為:半自動電泳和全自動電泳。根據用途不同分為:蛋白電泳、核酸電泳等。根據原理不同分為:等速電泳、等電聚焦電泳、免疫電泳等。根據電泳中是否使用支持介質分為:自由電泳和區帶電泳。常用方法 1. 紙電泳 紙電泳(Paper Electrophoresis,PE)指用濾紙作為支持介質的電泳方法,是最早使用的區...
它可以分為兩類:競爭性RIA(adioimmunoassay)和非競爭性RIA,也稱為免疫放射分析。原理 放射免疫火箭電泳自顯影法是放射免疫分析中的一種分離及定量測定方法。原理類同放射免疫分析,是建立在火箭電泳基礎上的免疫沉澱放射自顯影術。放射免疫火箭電泳自顯影法:adioiTrrrnw。一二kct-phore- }i4 aurr}graph:放射免疫...
其原理是指可溶性抗原與相應抗體在有電解質存在的情況下,按適當比例所形成的可見沉澱物現象。據此現象設計的沉澱實驗主要包括絮狀沉澱試驗,環狀沉澱試驗和凝膠內的沉澱試驗。凝膠內的沉澱試驗依所用的實驗方法又可分為免疫擴散實驗和免疫電泳技術2類。而western blot雖然也是利用抗原-抗體反應的原理,但它是需要電泳的...
由於白蛋白等電點的差異,電泳後由正極到負極可分為,白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白五個區帶,血清蛋白電泳初步了解血清白蛋白中主要組分的一種技術方法,通過血清蛋白電泳來反映肝細胞損傷程度和病變範圍。也可用於反映其他疾病如腎臟疾病,風濕免疫系統疾病等。正常值 ...
免疫PCR是在ELISA的基礎上建立起來的新方法,用PCR擴增代替ELISA的酶催化底物顯色。PCR具有很強的放大能力,其可以定量地檢測DNA和RNA,具有非常高的敏感性和特異性,因此,將與抗原結合的特異抗體通過連線分子與DNA結合,再經PCR擴增,由此定量檢測抗原使敏感性高於ELISA和RIA。基本原理 免疫PCR的組成 免疫PCR主要由兩...
非標記免疫分析技術:免疫擴散、免疫電泳 標記的免疫分析技術:酶免疫分析、放射免疫分析、磁敏免疫分析、其它免疫分析法(螢光免疫技術、膠體金免疫技術、發光免疫技術和鐵蛋白免疫技術等)免疫擴散 基本原理:可溶性的抗原和相應的抗體在溶液或凝膠中彼此接觸,形成不溶性抗原-抗體複合物沉澱。單向免疫擴散(Single immuno...
由於免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡常用於鑑定某種蛋白,並能對蛋白進行定性和半定量分析。結合化學發光檢測,可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。原理如圖 基本原理 將混合抗原樣品在凝膠板上進行單向或雙向電泳分離, 然後取固定...
若結合電泳技術進行定向擴散,可加快擴散速度,提高反應靈敏度,從而衍生出免疫電泳、對流免疫電泳、交叉免疫電泳、火箭電泳(圖4)等方法。ⓒ補體參與的抗原–抗體反應。補體一旦被抗原抗體複合物結合後,即不再游離,故可利用這個特性進行免疫反應的研究。補體的溶血、溶菌作用有賴於抗體的存在。當紅細胞抗原與相應的...
· 對流免疫電泳,比瓊脂免疫雙擴散法敏感,較簡便、實用;· 酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。(6) 放血或定期抽血 常用以下3種方法 · 頸動脈放血法:放血量較多,動物不易中途死亡。例如:2.5kg白兔可放血約80ml。家兔、山羊、綿羊等動物採血常用此法。· 心臟採血法:常用於家兔、豚鼠、大白鼠、雞等小動物,但...
本法常用於定性測定抗原抗體,亦可用於判斷免疫血清的效價。4.對流免疫電泳(counter immunoelectrophoresis) 若在雙擴基礎上加電泳,將抗原孔置負極端,抗體孔置正極端。由於抗原所帶的負電荷較抗體多,且抗原分子小於抗體,在電場中能夠克服電滲的作用而由負極泳向正極;抗體卻克服不了電滲作用,從正極向負極移動,二者...
血清蛋白電泳即用電泳方法測定血清中各類蛋白占總蛋白的百分比。對於肝、腎疾病和多發性骨髓瘤的診斷有意義。成分簡介 血清含有各種蛋白質,其等電點均在pH7.5以下,若置於pH8以上的緩衝液電泳時均游離成負離子,再向正極移動。由於其等電點,分子量和分子形狀各不相同,其電泳速度就不同。故可將血清中蛋白質區分...
20 世紀 30 年代, Tiselies 和 Kabot 建立了血清電泳技術,證明抗體是丙種球蛋白,並利用分離、純化抗體的方法對抗體分子的結構與功能進行研究。Grubar 等人建立了免疫電泳技術,發現了抗體分子的不均一性的本質,從而使抗體分子與結構研究取得了重大進展。抗體生成理論的提出 1897 年, Ehrlich 提出關於抗體產生的...
電泳分類 不同種類的電泳實現方式和技術關鍵各不相同,紛繁複雜:尚沒有任何一種分類體系可以做到不重複的涵蓋所有電泳方式。綜合考慮支持物類型、電泳原理、用途等因素的系統分類方法簡單清晰,而且主要的電泳種類都能在該體系中找到自己的位置。按是否使用支持物分為 無支持物的電泳技術 此類電泳也稱自由電泳。電泳方式...
免疫測定法 immunoassay; IA又稱免疫檢定(法)。指 套用免疫學方法測定樣品中的微量物質的方法。它比化學 上的超微量法更為敏感,可測到樣品中含Pg的微量物質。 用於酶、激素、蛋白質以及其他物質或元素等。免疫測定的 方法很多,如間接凝集反應、補體結合試驗、放射免疫測定、 奸娠試驗、輻射狀擴散、免疫電泳、...
1 聚丙烯醯胺凝膠電泳的原理 2 聚丙烯醯胺凝膠電泳的套用 3 十二烷基硫酸鈉(SDS)—聚丙烯醯胺凝膠電泳 4 非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳 5 常見問題分析 第四章 等電聚焦 1 等電聚焦技術的發展過程 2 等電聚焦技術的原理 3 載體兩性電解質pH梯度等電聚焦 4 固相pH梯度等電聚焦電泳 第五章 免疫電泳 1 一般免疫...
這三種類型中,利用免疫原理並採用螢光檢測的居於主流,因此,此類蛋白晶片技術可以稱作晶片上的螢光免疫分析,由於具有樣品量少,分析通量高,能進行多組分同時分析等優點,已經成為螢光免疫分析乃至整個免疫分析的重要發展方向。這三種類型的蛋白晶片技術中,微陣列型免疫晶片發展最早,但直接沿用基因晶片的螢光標記方法,...
英文名稱:electrophoretic effect 溶液中帶電粒子(離子)在電場中移動的現象。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。1937 年瑞典學者 A.W.K.蒂塞利烏斯設計製造了移動界面電泳儀 ,分離了馬血清白蛋白的3種球蛋白,創建了電泳技術。原理 在確定的條件下,帶電粒子在單位電場強度作用下,...
一、電泳的原理 二、影響電泳速度的外界因素 第二節 電泳分類 一、按工作原理分類 二、按分離目的分類 三、按用法分類 第三節 常用電泳技術 一、紙電泳 二、醋酸纖維素薄膜電泳 三、瓊脂糖凝膠電泳 四、聚丙烯醯胺凝膠電泳 五、SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳 六、等電聚焦電泳 七、雙向凝膠電泳 八、免疫電泳 九、...
*對流免疫電泳,比瓊脂免疫雙擴散法敏感,較簡便、實用;*酶聯免疫吸附試驗 (ELISA)。通常抗體效價低於1:128是沒有問題的,有些孕婦高達1:256以上,而且抗體效價最好1個月查上一次,有時候會有所變化。有關疾病 母兒血型不合溶血病 新生兒溶血病是孕婦和胎兒之間血型不合而產生的同族血型免疫疾病,可發病於胎兒...
免疫沉澱反應(Immunoprecipitation)主要用於抗原或者抗體的定性檢測。其原理是指可溶性抗原與相應抗體在有電解質存在的情況下,按適當比例所形成的可見沉澱物現象。據此現象設計的沉澱實驗主要包括絮狀沉澱試驗,環狀沉澱試驗和凝膠內的沉澱試驗。凝膠內的沉澱試驗依所用的實驗方法又可分為免疫擴散實驗和免疫電泳技術2類。正常...