基本概述
在副溶血弧菌食物中毒的流行季節,根據進食可疑食物(醃漬品、海產品)、集體發病、潛伏期短而起病急驟、發熱和腹痛均較其他腸道傳染病為嚴重、腹瀉物呈血水樣、
失水多見等特點,臨床診斷即可成立,對可疑食物進行培養,有時可分離出和糞便中相同的副溶血弧菌。本病應與
葡萄球菌性食物中毒、
產腸毒素性大腸桿菌類、
沙門氏菌食物中毒、
急性菌痢和
霍亂等鑑別。
進食被副溶血性弧菌污染的食物後10小時左右出現上腹部陣發性絞痛、腹瀉,多數患者在腹瀉後出現噁心、嘔吐,腹瀉多為水樣便,重者為黏液便和黏血便。嘔吐、腹瀉嚴重,失水過多者可引起虛脫並伴有血壓下降。大部分病人發病後2~3天恢復正常,少數嚴重病人由於休克、昏迷而死亡。
副溶血弧菌是革蘭氏陰性多形態桿菌或稍彎曲弧菌。本菌嗜鹽畏酸,在無鹽培養基上,不能生長,3%~6%食鹽水繁殖迅速,每8~9分鐘為1周期,低於0.5%或高於8%鹽水中停止生長。在食醋中1~3分鐘即死亡,加熱56℃5~10分鐘滅活,在1%鹽酸中5分鐘死亡。
已知副溶血弧菌有12種
O抗原及59種K抗原,據其發酵糖類的情況可分為5個類型。各種弧菌對人和動物均有較強的毒力,其致病物質主要有分子量42000的致熱性溶血素(TDH)和分子量48000的TDH類似溶血毒(TRH),具有溶血活性、腸毒素和致死作用。
治療措施
1、支持及對症治療脫不者需輸入生理鹽水及葡萄鹽水,或口服補液鹽,以糾正失水。血壓下降者,除被補充知容量,糾正酸中毒等外,可酌用
血管活性藥。
2、抗菌藥物輕者患者可不用抗菌藥物,較重者可給複方新諾明或慶大黴素、阿米卡星和諾氟沙星等
喹諾酮類抗菌藥物。
3、發生中毒後要立即停止食用可疑中毒食品,併到醫院醫治。副溶血性弧菌對氯黴素敏感。嘔吐、腹瀉嚴重者要補充水和鹽。
中毒預防
加工海產品的案板上副溶血弧菌的檢出率為87.9%。因此,對加工海產品的器具必須嚴格清洗、消毒。海產品一定要燒熟煮透,加工過程中生熟用具要分開。烹調和調製海產品拼盤時可加適量食醋。食品燒熟至食用的放置時間不要超過4個小時。主要病理變化為空腸及迴腸有輕度糜爛,胃黏膜炎、內臟(
肝、脾、
肺)淤血等。
輔助檢查
1、白細胞計數總數多在1萬mm3以上,中性粒細胞偏高。
2、便檢查鏡檢可見白細胞或膿細胞,常伴有紅細胞,易被誤診為菌痢。
糞便培養可檢出副溶血弧菌,絕大多數迅速轉陰,僅少數持續陽性2~4天。
發病機理
1、傳染源傳染源為病人,集體發病時往往僅少數病情嚴重者住院,而多數未住院者可能成為傳染源,但由於病人僅在疾病初期排菌較多,其後排菌迅速減少,故不至因病人散布
病菌而造成廣泛流行。
2、傳播途徑本病經食物傳播,主要的食物是海產品或鹽醃漬品,常見者為蟹類、
烏賊、
海蜇、
魚、
黃泥螺等,其次為蛋品、肉類或蔬菜。進食肉類或蔬菜而致病者,多因食物容器或砧板污染所引起。
3、易感者男女老幼均可患病,但以青壯年為多,病後免疫力不強,可重複感染。本病多發生於夏秋沿海地區,常造成集體發病。近年來沿海地區發病有增多的趨勢。
臨床表現
潛伏期自1小時至4天不等,多數為10小時左右。起病急驟,常有腹痛、腹瀉、嘔吐、失水、畏寒及發熱。腹痛多呈陳發性絞痛,常位於上腹部、臍周或回盲部。腹瀉每日3~20餘次不等,大便性狀多樣,多數為
黃水樣或黃糊便。約2%~16%呈典型的血水或洗肉水樣便,部分病人的糞便可為膿血樣或粘液血樣,但很少有里急後重。
由於吐瀉,患者常有失水現象,重度失水者可伴聲啞和肌痙攣,個別病人血壓下降、面色蒼白或發紺以至意識不清。發熱一般不如菌痢嚴重,但失水則較
菌痢多見。近年來國內報導的副溶血弧菌食物中毒,臨床表現不
一,可呈典型、胃腸炎型、菌痢型、中毒性休克型或少見的慢性腸炎型。本病病程自1~6日不等,可自限,一般恢復較快。
預防措施與其他細菌所致者似。
1、動物性食品應煮熟煮透再吃。
2、隔餐的剩菜食前應充分加熱。
3、防止生熟食物操作時交叉污染。
4、
梭子蟹、
蟛蜞、
海蜇等水產品宜用飽和鹽不浸漬保藏(並可加醋調味殺菌),食前用冷開水反覆沖洗。
PCR檢測
用於檢測V.p的PCR方法主要有任意引物PCR(abritrarilyprimedPCR,Ap-PCR)、針對任意引物PCR、多重PCR(muhiplex-PCR)、實時PCR(Real-timePCR)。
1、任意引物PCRMatsumoto等採用任意引物
PCR對V.p進行檢測。他們針對V。p的tdh
基因和trh基因一段特異的序列,設計兩條引物,
引物1:5--GGTGCGGGAA--3,
引物2:5一GTTTCGCTCC一3,
對1977~1998年所收集的227株V.p進行PCR。通過電泳分析發現,1996-1998年收集的22株血清型為03:K6菌株與1996年以前收集的03:K6
血清型菌株基因序列有所不同,為03;K6血清型新出現的變異株,並最初出現在孟加拉國。這是目前最簡單的以基因為基礎的細菌亞分型方法。
2、針對任意引物PCR由於臨床分離株絕大多數含有tdh基因,因此絕大部分研究者都根據tdh設計引物進行特異擴增。1993年,Lee等根據tdh基因設計引物,對36株TDH+株、89株TDH-株以及46株其他弧菌和
腸道菌進行PCR檢測。結果顯示,36株TDH+株全部特異擴增出來,其餘菌株都沒有擴增;而檢測靈敏度高,最低檢測量可至40pgDNA,並可直接檢測糞便標本,無需分離培養,方便快速。1999年,Kim等選擇toxR基因序列設計兩對引物,5’--GTCTTCTGACGCAATCGTTG--3和5’一ATACGAGTGGTTGCTGTCATG一3’,對14株V.p、14株其他弧菌進行PCR。結果顯示,14株V.p都得到一條368bp的特異擴增亮帶,而其他菌株沒有特異擴增。此外,Venkateswaran等選擇gyrB基因設計引物對V·p進行PCR、Cordova等選擇pR72H基因設計引物進行PCR,特異性、
靈敏度都很好。
3、多重PCR由於不是全部副溶血性弧菌都含;tdh基因或,trh。基因,所以只針對tdh或trh的單一PCR,有時會漏檢。多重PCR(multiplex-PCR)能全方位高效率地檢測Vpo1994年,Bej白等針對“、tdh、trh設計不同的引物對,在同一PCR反應體系內同時擴增tl、tdh、trh。結果顯示,所有的V。p都擴增出“基因,tl基因是V.p特異的;54%的V.p擴增出tdh基因;只有38.73%的V.p擴增出trh基因;該法靈敏度高,能把log
牡蠣培養肉湯里10~100個V.p檢測出來。與其他常規生化方法相比,多重PCR更快速,僅8h就能完成檢測,結果更為準確、可靠,而且還可改進成定量競爭PCR,對標本中靶序列進行定量。
4、實時PCR常規PCR檢測,需要從反應體系中吸取產物做電泳或Southern雜交等試驗進行鑑定,轉移過程中易污染,造成假
陽性,而且耗費時間。1996年,Tyagi開創了一種實時PCR(Real-timePCP,)。實時PCR是在,PCR反應體系中加入標記有報告基團和淬滅基團的線性Taqman。
探針或莖環型
螢光分子信標探針,在墓因擴增過程中,與產物雜交,此時,報告基團和淬滅基團分開,根據能量共振轉移現象,報告基團發出螢光而被檢測。這種方法操作簡單,閉管檢測,減少污染,靈敏度高,並且可以在PCR結束或PCR過程進行同步定性或定量檢測,面且可以進行臨床大規模快速檢測。
2、
3、