《miR-130b在肝細胞癌發病中的作用及其表達調控機制》是依託中山大學，由李斌奎擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-130b在肝細胞癌發病中的作用及其表達調控機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李斌奎
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
課題組前期通過miRNA晶片篩選和定量PCR檢測發現miR-130b在肝癌中發生明顯的表達上調，並且其高表達與復發和不良預後相關，下調其表達可顯著抑制肝癌細胞增殖和克隆形成能力，因此，我們推測miR-130b可能作為oncomiR參與了肝癌發病的過程。本課題擬通過基因功能獲得和功能缺失策略，觀察miR-130b表達改變對肝癌細胞生物學行為的影響；通過生物信息學分析及細胞學實驗，結合臨床資料分析對miR-130b的靶基因及其相關信號通路加以驗證，從而揭示miR-130b在肝癌發病中的具體分子機制；進而克隆miR-130b上游轉錄調控區，構建其報告基因載體，通過報告基因活性分析、EMSA、ChIP等確定其受調控的轉錄因子，闡明miR-130b在肝癌中表達異常的機制。本課題旨在為更深入了解miRNA與肝癌發生髮展的關係提供新線索，並為肝癌治療尋找潛在分子靶點提供新的思路和依據。
結題摘要
miRNAs在肝癌的發生髮展中起著重要的作用。課題組前期通過miRNA晶片篩選和定量PCR檢測發現miR-130b在肝癌中發生明顯的表達上調，並且其高表達與復發和不良預後相關，下調其表達可顯著抑制肝癌細胞增殖和克隆形成能力，因此推測miR-130b 可能作為“oncomiR”參與了肝癌發病的過程。本項目的主要研究內容為：（1）通過基因功能獲得和功能缺失策略，觀察miR-130b表達改變對肝癌細胞生物學行為的影響；（2）通過生物信息學分析及細胞學實驗，結合臨床資料分析對miR-130b的靶基因及其相關信號通路加以驗證，從而揭示miR-130b在肝癌發病中的具體分子機制；（3）進而確定miR-130b其受調控的轉錄因子，闡明miR-130b在肝癌中表達異常的機制。研究結果如下：（1）體內外實驗表明miR-130b促進肝癌細胞增殖、遷移及體內外成瘤能力；（2）管形成試驗和雞胚尿囊膜試驗表明miR-130b促進血管生成；（3）篩選出HOXA5、HIF-1α、GAX以及RUNX3等多個基因有可能為miR-130b的靶基因，並經過進一步驗證，表明HOXA5、HIF-1α是miR-130b發揮其生物學功能的靶基因；（4）發現缺氧環境下肝癌細胞中 miR-130b表達升高，同時miR-130b可誘導肝癌細胞發生EMT 並增強其遷移能力；（5）發現缺氧環境下 miR-130b可上調肝癌細胞中HIF-1α 表達，而抑制HIF-1α 表達又可下調miR-130b的表達。本項目完成為更深入了解miRNA與肝癌發生髮展的關係提供了新線索，並為肝癌治療尋找潛在分子靶點提供了新的思路和依據。
