《lnc-HC調控PPARγ參與NAFLD肝臟脂肪酸代謝的分子機制研究》是依託西安交通大學，由藍茜擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：lnc-HC調控PPARγ參與NAFLD肝臟脂肪酸代謝的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：藍茜
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
我們前期發現長鏈非編碼RNA lnc-HC在大鼠高脂肝細胞模型中顯著高表達，且負向調控PPARγ的表達及肝細胞脂滴形成，推測lnc-HC通過調控PPARγ通路抑制肝臟脂肪酸代謝。為闡明其分子機制，擬採用混合脂肪酸處理lnc-HC穩定高/低表達肝細胞，通過檢測細胞及培養液中游離脂肪酸、甘油三酯含量，觀察lnc-HC對肝細胞脂肪酸代謝表型的影響；在lnc-HC穩定高/低表達肝細胞中，檢測PPARγ通路關鍵分子的表達，明晰lnc-HC參與的脂肪酸代謝通路；採用生物信息學、RNA pull-down、RIP等技術，詮釋lnc-HC調控PPARγ基因表達、參與肝細胞脂肪酸代謝的分子機制；最後利用高脂飲食誘導大鼠NAFLD，腺病毒干擾lnc-HC表達，觀察大鼠血清和肝臟代謝指標，驗證lnc-HC對NAFLD肝臟脂肪酸代謝的作用。結果將豐富lncRNA對脂代謝作用的認識，為NAFLD的控制提供新思路。
結題摘要
眾所周知，非酒精性脂肪肝是以肝細胞脂肪異常蓄積為臨床表征的慢性疾病。代謝性核受體作為基因表達的上游調控者，在維持脂質代謝穩態中起到至關重要的作用。我們前期的研究中，一例全新的長鏈非編碼RNA（大鼠lnc-HC）被成功鑑定，並發現該基因通過負性調節Cyp7a1和Abca1兩個基因的表達參與了肝細胞膽固醇代謝調節過程。在該基金的資助下，我們進一步研究了lnc-HC對肝臟脂肪酸和甘油三酯代謝的作用和調節機制。首先，通過lnc-HC穩定干擾細胞系的鑑定，我們發現其能夠負性調節代謝性核受體PPARγ的表達，而PPARγ是參與肝細胞脂肪酸代謝的重要轉錄因子之一。接著，細胞實驗表明lnc-HC通過負性調節PPARγ的表達而抑制肝細胞脂滴形成。進一步，我們探索了其中的分子機制：miR-130b-3p能夠靶向PPARγ 3'UTR從而負性調節其mRNA和蛋白質表達水平，而lnc-HC通過正向調節miR-130b-3p的轉錄及加工成熟過程從而間接抑制了PPARγ。值得注意的是，lnc-HC對miR-130b-3p的轉錄修飾調節與傳統的內源性競爭性RNA機制不同，是一種新的調節模式。此外，在體動物模型結果顯示，lnc-HC的敲低顯著下調了miR-130b-3p並促進PPARγ的表達水平；動物表型表現為肝臟甘油三酯積聚及血脂異常。該結果幫助我們進一步了解了lnc-HC在肝臟脂質代謝中的調控作用，同時也為脂質代謝紊亂及非酒精性脂肪肝等疾病的檢查和治療提供了潛在的新靶點。
