《山羊卵泡選擇過程候選LncRNA作用機制研究》是依託西南大學，由俄廣鑫擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：山羊卵泡選擇過程候選LncRNA作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：俄廣鑫
- 依託單位：西南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
卵泡選擇是決定排卵數量的關鍵步驟，生理過程複雜，目前卵泡選擇的機制尚未明確。探索卵泡選擇中長鏈非編碼RNA（LncRNA）的調控機制，對山羊排卵機制研究和卵泡資源的儲備開發都具有重要意義。本項目根據前期利用高通量測序技術，在不同發育階段卵泡篩選出的特異表達LncRNA，並初步鑑定出可能與卵泡選擇發育所需能量來源的線粒體氧化磷酸化作用相關的3個候選LncRNAs的基礎上，利用RNA干擾、真核表達結合氧活性檢測、激素水平檢測、多分子水平檢測等手段，進一步篩選候選LncRNAs與靶基因，明確二者在山羊卵泡選擇過程中的作用機制。
結題摘要
本項目的實施初步篩選了以大足黑山羊為代表群體的山羊優勢卵泡選擇相關非編碼RNA及編碼RNA差異表達因子，並構建了不同轉錄水平因子間的ceRNA互作關係網路，同時利用雙螢光素酶報告體系驗證。闡明在山羊優勢卵泡選擇過程中，不同轉錄因子的相互調控作用的可能互作機制。尤其，對部分非編碼RNA的在卵泡發育過程中的作用機制進行挖掘，例如，山羊卵巢顆粒細胞中chi-miR-130b-5p 的靶向基因研究發現在山羊卵巢顆粒細胞中chi-miR-130b-5p的過表達會使BMP15在mRNA水平和蛋白質水平的表達量均顯著降低（P＜0.05），表明chi-miR-130b-5p對BMP15的表達起抑制作用。由於優勢卵泡選擇是山羊產羔數最重要的決定因素，故本項目開展了大足黑山羊群體產羔數相關基因的全基因組掃描和候選SNP的全基因組關聯分析研究。研究鑑定到大量新的可能與山羊產羔數相關的候選基因，尤其包括大量來自於能量代謝和胺基酸轉移酶相關基因的外顯子區域分布的SNP，如外線粒體膜70（TOMM70），F-box和富含亮氨酸重複蛋白14（FBXL14）的轉位酶，線粒體半胱氨醯-tRNA合成酶2（CARS2）等。眾所周知，線粒體氧化磷酸產生ATP的過程是生物各項生理機能的主要能源動力，尤其是在繁殖方面。而且，在本項目的全基因組轉錄測序研究中也發現大量線粒體氧化磷酸化相關基因在不同卵泡發育階段存在顯著差異表達，故研究成果綜合的展現了DNA及RNA兩個不同層面上可能通過相互聯繫共同參與山羊優勢卵泡選擇相關這一生理調控。項目基本完成計畫內工作內容，另外從基因組層面開展一些列的研究，將轉錄表達和基因組遺傳變異進行有機結合，綜合全面的深入探討山羊優勢卵泡選擇的可能分子機制。
