Rap1介導炎症反應在動脈粥樣硬化中的作用

《Rap1介導炎症反應在動脈粥樣硬化中的作用》是依託香港大學深圳研究院，由鄧凱澄擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：Rap1介導炎症反應在動脈粥樣硬化中的作用
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：鄧凱澄
• 依託單位：香港大學深圳研究院

項目摘要

端粒結合蛋白Rap1不僅僅存在於細胞核內發揮著維護端粒正常功能的作用，同時也存在於細胞質中，並且能夠結合IKK複合體，促進NF-kB的亞基p65的磷酸化，進而調控著NF-kB信號通路。而作為引發炎症的重要信號通路，NF-kB信號通路的失調在動脈粥樣硬化疾病發展中起著非常重要的作用。解析Rap1蛋白與動脈粥樣硬化病變的關係有著重大意義。因此本項目以Rap1蛋白為研究對象，通過運用基因干擾技術在巨噬細胞、內皮細胞、平滑肌細胞中敲除Rap1基因，來研究NF-kB信號通路是否因此受到抑制；同時首次建立Rap1/ ApoE基因雙敲除小鼠模型，並運用免疫組織化學、酶聯免疫吸附等技術研究敲除Rap1 基因是否能夠抵抗或緩解ApoE基因敲除小鼠模型中動脈粥樣硬化疾病的發生。本項目的完成將為尋找動脈粥樣硬化防治新的炎症靶點奠定科學基礎，同時也為其他動脈粥樣硬化新藥研究提供可借鑑的依據。

結題摘要

端粒結合蛋白Rap1 不僅僅在核內發揮著維護端粒長度及正常功能的作用，同時也具有非端粒的功能，即在腫瘤細胞的細胞質中Rap1能夠很大程度上激活NFkB信用通路。作為引發炎症的重要信號通路，NFkB信號通路的失調在動脈粥樣硬化疾病發展中起著非常重要的作用。細胞質中的Rap1介導了炎症反應從而最終是否造成了動脈粥樣硬化疾病的產生是本課題研究的重點。由於巨噬細胞、內皮細胞、平滑肌細胞在動脈粥樣硬化疾病發展過程中具有非常重要的作用，因此在本項目中，我們利用RNA干擾技術，在巨噬細胞系（THP-1），內皮細胞系（HUVEC）和平滑肌細胞系（HASMC）中建立了相對應的Rap1基因敲除的細胞模型，實驗結果發現，只有在THP-1巨噬細胞中，敲除Rap1基因能顯著抑制脂多糖LPS激活的IkBα，p65的蛋白磷酸化，從而抑制NFkB信號通路的活性並同時抑制了NFkB介導的相關促炎性細胞因子的分泌。而在HUVEC、HASMC中，並未觀察到敲除Rap1能抑制LPS，腫瘤壞死因子 TNFα，或白介素 IL-1β激活的NFkB信號通路的活性。除此以外，我們同樣從Rap1 基因敲除小鼠以及野生型小鼠中提取另外兩種巨噬細胞：腹腔巨噬細胞以及骨髓分化巨噬細胞，並以它們作為研究對象，研究發現敲除Rap1基因的原代巨噬細胞顯著抑制了LPS激活的NFkB信號通路及NFkB調控的炎症因子。而在人體動脈粥樣硬化病變的樣本中，免疫組織化學結果也顯示Rap1蛋白大量存在與動脈粥樣硬化病變處巨噬細胞豐富的區域，並且Rap1蛋白隨著動脈粥樣硬化的病變嚴重程度逐級增多。綜上所述，本項目的研究發現為動脈粥樣硬化的防治提供了理論依據及新的治療途徑。