《靶向c-Met誘導胃癌細胞自噬在腫瘤治療中的作用及機制》是依託北京大學，由沈琳擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：靶向c-Met誘導胃癌細胞自噬在腫瘤治療中的作用及機制
- 項目負責人：沈琳
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
對於晚期胃癌，目前國際公認的治療原則是以化療為主的綜合治療,探索新的藥物靶點並進行個體化治療，是近年來胃癌治療研究重點。酪氨酸激酶受體c-Met（肝細胞生長因子受體）是治療晚期胃癌藥物最具潛力的靶點之一，但如何實現個體化靶向治療以及如何減少耐藥性等問題尚未解決。申請人在前期研究中發現：c-Met抑制劑可以誘導胃癌細胞系自噬的發生；抑制自噬可以增加胃癌細胞對c-Met抑制劑的敏感性。由此提出自噬在靶向c-Met治療胃癌中發揮重要作用的科學問題。本課題擬採用體內和體外實驗，明確自噬在靶向c-Met治療中發揮的作用以及c-Met抑制劑誘導胃癌細胞發生自噬的可能分子機制，了解c-Met信號通路與自噬的互動作用，為靶向c-Met通路治療晚期胃癌以及克服其耐藥問題提供理論基礎和解決策略。
結題摘要
本項目旨在胃癌患者組織標本與體外細胞動物實驗兩個水平探索Met表達在胃癌中的意義及Met抑制劑發揮抑瘤作用的機制及可能的聯合策略。重要結果如下： （1）收集了進展期胃癌患者168例，運用免疫組化及FISH方法檢測了患者組織標本中MET/p-MET蛋白表達水平以及MET基因擴增情況。在168例患者中，137例患者可評估MET蛋白表達，53例患者MET蛋白表達陽性（39%）；134例患者可評估p-MET蛋白表達，8例患者p-MET蛋白表達陽性（6%）；113例患者可評估MET基因擴增情況，8例患者MET基因擴增（7%）。MET蛋白表達與患者預後無關，MET蛋白表達與MET基因擴增顯著相關，所有MET基因擴增的患者均表現為MET蛋白表達，並且MET基因擴增也與p-MET表達明顯相關，該結果為中國晚期胃癌患者MET表達情況提供數據證據，對臨床開展靶向Met治療篩選可能獲益群體提供重要依據。 （2）體外細胞動物實驗中，探索了Met抑制劑引起胃癌細胞自噬產生的可能機制，並探索Met抑制劑聯合自噬抑制劑的抑瘤作用及可能機制，為臨床試驗提供依據。體外細胞研究中，選擇Met表達陽性細胞MKN45和SNU5進行後續研究，四種Met抑制劑PHA、SU、Criz（克唑替尼）、Voli（volitinib）處理細胞後，發現Met磷酸化（pMet）被明顯抑制，且四種Met抑制劑均可誘導細胞自噬（自噬相關marker：p62表達下調，LC3 II/I比例增加），在此基礎上，用自噬抑制劑Baf A1與HCQ處理細胞後，可以阻斷Met抑制劑介導的自噬，且證實Met抑制劑誘導自噬是通過引起自噬體形成而不是阻滯自噬降解途徑。 （3）既然Met抑制劑可以誘導胃癌細胞發生自噬，其發揮作用機製做了深入探索，發現自噬產生時伴隨mTOR和ULK1磷酸化水平顯著下降，說明mTOR失活與ULK1激活參與了自噬發生，且這種現象可被Met配體HGF及mTOR激動劑MHY逆轉，進一步說明Met抑制劑通過Met/mTOR/ULK1級聯反應誘導自噬。 （4）基於上述研究結果，我們深入探索了聯合自噬抑制劑和Met抑制劑的抑瘤作用，體外細胞中發現自噬抑制劑聯合Met抑制劑可明顯抑制細胞的增殖，且細胞凋亡比例增加，體外動物移植瘤模型中進一步證實自噬抑制劑聯合Met抑制劑具有協同抑瘤作用。
