《c-jun在sorafenib誘導肝細胞癌自噬過程中的作用及機制的研究》是依託中山大學，由陳東擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：c-jun在sorafenib誘導肝細胞癌自噬過程中的作用及機制的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：陳東
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
Sorafenib是治療晚期肝癌（HCC）有效的唯一靶向藥物，但臨床發現部分患者敏感性差，機制需要進一步研究。我們前期研究發現sorafenib作用肝癌細胞後c-Jun表達上調，c-Jun表達和sorafenib抑制HCC的療效密切相關，高表達p-c-Jun分子的HCC患者預後較差，即c-Jun可能介導了HCC對sorafneib的耐受。分析發現c-Jun可能通過誘導自噬實現對HCC細胞sorafenib耐受；內質網反應、BCL-2分子和c-Jun的下游信號機制參與此過程。我們的預實驗已證明sorafenib誘導HCC細胞自噬，本項目擬採用siRNA，真核重組表達載體，螢光素酶報告基因法，CHIP等方法，旨在揭示c-Jun在HCC中誘導自噬介導sorafenib耐受的新機制，闡明具體通路和機制，為sorafenib“個體化”治療HCC提供新的思路和分子靶點。
結題摘要
Sorafenib是目前唯一顯著延長晚期肝癌（HCC，Hepatocellular carcinoma）患者生存的分子靶向藥物，但臨床發現其疾病控制率在43%左右，意味並非所有的HCC患者能從中獲益。HCC可能通過自噬機制對sorafenib產生藥物耐受。申請者前期發現c-Jun分子與sorafenib抑制HCC療效密切相關，推測其可能通過自噬機制參與耐藥機制。 申請者獲得資助後，初步研究提示c-Jun在sorafenib耐藥機制中的作用，不符合課題所構想的預期研究目標。經過文獻分析，推測可能和自噬存在多種調控機制有關，後續結合目前研究的熱點領域，圍繞“circRNA分子、sorafenib、自噬”三者關係進行進一步的研究。實驗方案調整後，申請者構建了針對sorafenib的Huh-7肝癌耐藥細胞株，通過多種方法驗證耐藥細胞株構建成功；對Huh-7與Huh-7R細胞株進行circRNA測序並進行比較，結合文獻，選擇自噬機制密切相關的信號通路，套用生物信息學分析，篩選得出hsa_circ_0002404，hsa_circ_0001495這兩個候選circRNA分子； HCC組織腫瘤及癌旁標本中的驗證結果表明hsa_circ_0002404，hsa_circ_0001495這兩個circRNA分子可能與HCC的發生髮展亦有密切關係；進一步構建hsa_circ_0002404慢病毒過表達載體，在Huh-7細胞中瞬時轉染，qPCR檢測過表達成功，為後續進行hsa_circ_0002404環狀分子功能實驗作準備。 課題經費目前執行超過70%，後續擬繼續對篩選出來的候選分子進行臨床驗證其與sorafenib耐藥的深入聯繫，進行功能驗證，並探討是否存在circRNA-miRNA或circRNA-miRNA-mRNA機制參與“自噬導致HCC對sorafenib耐藥機制”。課題的最終完成，將為肝癌的分子靶向治療提供更廣闊的思路與科學依據。
