雙歧桿菌果糖新型ABC轉運機制的研究

《雙歧桿菌果糖新型ABC轉運機制的研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院,由袁靜擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

  • 中文名:雙歧桿菌果糖新型ABC轉運機制的研究
  • 項目類別:面上項目
  • 項目負責人:袁靜
  • 依託單位:中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
  • 批准號:30771809
  • 申請代碼:H3003
  • 負責人職稱:研究員
  • 研究期限:2008-01-01 至 2010-12-31
  • 支持經費:31(萬元)
中文摘要
雙歧桿菌果糖的轉運機制可以揭示其在腸道中的適應性。我們利用蛋白質組學、轉錄組學和生物信息學分析得到受果糖誘導的果糖轉運相關蛋白(BL0033、 BL0034、BL0035和BL0036);採用基因敲除構建轉運蛋白缺失突變體和回復突變體,進行不同糖發酵的比較蛋白質組研究和突變體特性的研究,確定和驗證它們的基因功能;採用透析平衡試驗它們與底物結合的特異性,篩選果糖轉運中特異性的透性酶,最終得到果糖ABC轉運系統的三個酶:BL0033、BL0034和BL0035或BL0036。然後採用GST沉降實驗、免疫共沉澱實驗(IP)等進行蛋白質-蛋白質相互作用的體內體外實驗,研究果糖ABC轉運系統蛋白兩兩是否存在特異性相互作用;進一步確定果糖轉運蛋白兩兩間相互作用的功能結構域,和轉運蛋白的磷酸化作用及作用位點。從而揭示雙歧桿菌果糖轉運的分子機制,建立雙歧桿菌果糖轉運的分子模型。

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