《雙重介導脂質體腦靶向給藥系統的研究》是依託北京大學，由謝英擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：雙重介導脂質體腦靶向給藥系統的研究
- 項目負責人：謝英
- 依託單位：北京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
血腦屏障（BBB）的存在限制了藥物在中樞神經系統（CNS）的套用，腦部給藥系統的研究有望為目前已有的CNS藥物提供廣闊的套用前景。本課題基於BBB的結構特點，設計了受體介導和吸附介導雙重修飾的脂質體作為腦靶向新型藥物傳遞系統。以噬菌體展示技術高通量篩選得到的TAT-PTD肽段序列為基礎，套用多肽合成技術和BBB體外模型，設計合成篩選得到高BBB穿透性細胞穿透肽PTB；套用流式細胞技術研究雙重介導脂質體PTB/OX-26-PEG-L中兩種導向分子的密度，確定處方和製備方法，進行質量評價；套用BBB模型通過干預實驗探討其轉運能力和轉運機制；體內研究99mTc標記脂質體藥動學、組織分布以及ABC現象；套用大鼠C6腦膠質瘤模型，評價包載阿黴素脂質體的藥效學。本項目力求通過細胞水平和在體水平的系統研究，得到高穩定性、高轉運效率、高選擇性的腦靶向給藥系統，為CNS疾病的治療提供理論依據和研究基礎。
結題摘要
血腦屏障（BBB）的存在限制了藥物在中樞神經系統（CNS）的套用，腦部給藥系統的研究有望為目前已有的CNS藥物提供廣闊的套用前景。 本課題基於BBB的結構特點，設計了通過受體和吸附介導兩種途徑，雙重分子修飾的脂質體作為腦靶向新型藥物傳遞系統。以狂犬病毒受體蛋白與九聚精氨酸偶聯物（RVG29R9）為模板，在計算水平套用分子動力學模擬等方法設計得到了5種與乙醯膽鹼受體具有高親和力的多肽，並用固相合成技術得到了純度高於95%的多肽。經BBB體外模型通透率測定，最佳化得到了RVG4，其通透率係數為3.45*10-4 cm/s，遠高於其他RVG系列，是RVG29R9模板的1.3倍，是R9的5.48倍。結果表明RVG4具有較高的BBB通透性，是一種具有潛能的靶向BBB的細胞穿膜肽。 套用流式細胞技術研究雙重介導脂質體Tf-CPP-SSL中兩種多肽的密度，確定處方和製備方法，進行質量評價。結果表明最優Tf-CPP-SSL中Tf和CPP分別通過長鏈PEG3400和短鏈PEG2000修飾於脂質體表面，修飾密度分別為1.8%和4%。其粒徑約為100 nm，具有較好的穩定性，BBB通透性，無溶血性。Tf-CPP-SSL跨BBB轉運機制為首先通過Tf受體介導拉近了CPP與BMVEC的距離，然後在乙醯膽鹼受體介導和格線蛋白的介導下，進入細胞。進入靶細胞後，CPP在溶酶體中質子化，與帶負電的溶酶體膜發生靜電相互作用，促進膜融合，引起藥物從溶酶體中的逃逸，提高了其跨膜轉運能力。 體內藥動學研究結果表明，與SSL比較，CPP-SSL從血液中消除速率明顯增加，體現了CPP對正常組織的穿透能力，但雙重修飾脂質體 Tf-CPP-SSL具有長循環特徵，降低了藥物在非靶器官的聚集。24小時,Tf-CPP-SSL在腫瘤組織的攝取是SSL的8倍，體現了對腫瘤的高選擇性。藥效結果表明Tf-CPP-SSL（DOX）組顯著改善了動物體重的降低，提高了生存率。給藥15天后，Tf-CPP-SSL,Tf-SSL和SSL的抑瘤率分別為87.13%，62.17%，31.3%。 本項目將計算化學和藥劑學相結合，設計篩選得到了一種對於BBB具有高穿透性的PTB，通過細胞水平和在體水平的系統研究，構建了一種高穩定性、高轉運效率、高選擇性的腦靶向給藥系統，為CNS疾病的治療提供理論依據和研究基礎。
