《MtrAB雙組分系統調控雙歧桿菌黏附性的機制研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由何湘擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MtrAB雙組分系統調控雙歧桿菌黏附性的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：何湘
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
雙歧桿菌是寄居於人體胃腸道最重要的生理性細菌，發揮營養、增強免疫、抗腫瘤等生理作用。目前雙歧桿菌黏附於宿主胃腸道細胞的機制尚不清楚。課題前期研究中使用家兔腸培養模型篩選到體內、體外差異表達的蛋白BL0030和BL0031是MtrA-MtrB雙組分信號轉導系統的成員。我們發現BL0030和BL0031能夠影響雙歧桿菌對腸上皮細胞的黏附，而且BL0030和BL0031可以調控另外3個細胞壁相關蛋白的表達。本研究擬進一步通過黏附實驗、EMSA等方法研究受調控的3個蛋白對雙歧桿菌黏附性的影響及BL0030和BL0031調控這3個蛋白的分子機制；通過GST-pulldown等方法研究篩選BL0030和BL0031調控的新蛋白；探討MtrA-MtrB雙組分系統的調控機制，揭示其影響雙歧桿菌在胃腸道中黏附的分子機制，建立新的黏附相關基因調控網路，為進一步開發以雙歧桿菌為載體的食品級表達系統打下基礎。
結題摘要
雙歧桿菌是寄居於人體胃腸道最重要的生理性細菌，發揮營養、增強免疫、抗腫瘤等生理作用。目前雙歧桿菌黏附於宿主胃腸道細胞的機制尚不清楚。課題前期研究中使用家兔腸培養模型篩選到體內、體外差異表達的蛋白BL0030和BL0031是MtrA-MtrB雙組分信號轉導系統的成員。本研究通過GST-pulldown技術發現BL0030和BL0031存在於同一個複合物中。通過黏附實驗等方法發現受BL0030和BL0031調控的BL0603蛋白過表達後，雙歧桿菌的黏附性增加，對痢疾桿菌、致病性大腸桿菌的抑制率升高。在體內環境中BL1152表達上調，過表達BL0030同樣可以上調BL1152的表達，BL1152是信號分子AI-2合成酶，我們首次證明了雙歧桿菌可以分泌信號分子AI-2，而信號分子AI-2對雙歧桿菌的調控研究仍在進行中。在工作中發現不同糖處理後，雙歧桿菌的黏附能力不同，我們進而探討了雙歧桿菌不同糖的處理後的蛋白表達譜變化，在研究中發現一些蛋白的表達顯著上升，因此我們考察了不同糖處理後雙歧桿菌表達的變化，GroEL、Eno、Tal、Pgm及BL0033發生了磷酸化修飾，ABC轉運系統的BL0033在果糖提供碳源生長時表達顯著上調，並與粘附相關，但遺憾的是我們沒有發現BL0030和BL0031的表達變化。我們進一步研究了雙歧桿菌與宿主相互作用後宿主相關蛋白的變化，我們發現MtrA-MtrB過表達的雙歧桿菌與野生的雙歧桿菌相比能進一步抑制宿主的雌激素相關受體a（ERRa）的表達。研究表明ERRa促進腫瘤生長，因而雙歧桿菌可能通過抑制它的表達，抑制宿主腫瘤的發生。另外我們的研究發現ERRa促進炎症分子的產生，而抑制干擾素的產生，所以我們推測雙歧桿菌可能通過抑制ERRa抑制宿主炎症的發生，並增加抗病毒功能。在該資金的資助下發表文章3篇，其中SCI收錄1篇，核心期刊2篇，均標註受到本基金資助。培養博士生1名，碩士生3名，均已按期畢業。
