《轉運體ABCC4/ABCC5在葉酸拮抗劑耐藥現象中的機制研究》是依託上海交通大學，由劉艷擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：轉運體ABCC4/ABCC5在葉酸拮抗劑耐藥現象中的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉艷
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
葉酸拮抗劑廣泛用於臨床治療，耐藥和毒副作用是導致療效不佳的主要原因，但迄今葉酸拮抗劑耐藥機制仍不明確。ABC轉運體是葉酸拮抗劑排泄中主要轉運蛋白，但其在葉酸拮抗劑耐藥中的作用缺乏系統研究。我們前期結果顯示甲氨蝶呤耐藥細胞株中ABCC4、ABCC5表達增加，且對其他葉酸拮抗劑也產生了交叉耐藥，但具體機制還需進一步探討。為此，我們提出假說：ABCC4、ABCC5參與葉酸拮抗劑耐藥，尤其是新型葉酸拮抗劑、大劑量葉酸拮抗劑中毒時外排的重要因素。為了驗證這一假說，本研究將從HEK293細胞模型、gene-delivery老鼠模型、臨床試驗等多個層次，採用real time PCR、Western blot、AVV9腺病毒載體感染動物、質粒轉染細胞等手段，探討ABCC4、ABCC5在葉酸拮抗劑耐藥中的具體作用機制。本項目將分析ABCC4/5在葉酸拮抗劑PK/PD發揮的作用，為個體化用藥提供理論基礎。
結題摘要
按照課題任務計畫書，本研究將從細胞模型、gene-delivery老鼠模型、臨床研究等多個層次，探討ABC轉運體在葉酸拮抗劑耐藥中的具體作用機制。課題研究者按照年度計畫要點的計畫進行，工作內容無調整。目前課題臨床部分、細胞實驗部分已經完成，完成預期課題目標。 目前該課題發表SCI論文3篇（Plos one 3.73，AM J RESP CELL MOL，4.23，Pharmacology,1.67），一篇會議論文（circulation，IF=14.7）發表中文論文3篇，均署課題編號。本課題研究研究內容獲得2014年度《上海市藥學科技獎》三等獎、《上海市醫學科技獎》三等獎各一項。培養研究生一名。申請並獲得專利3項。多次做大會報告，並獲得研究同行的認同。 1. 我們嚴格按照計畫書的計畫, 完成了細胞實驗。我們在MCF-7細胞中研究了ABC轉運體表達對葉酸拮抗劑的細胞內外的轉運的影響;在本部分研究中，我們的結果顯示，ABCC5直接轉運培美曲塞，高表達ABCC5轉運體將會使細胞內藥物減少而導致細胞耐藥。為了進一步在臨床患者驗證我們的細胞實驗結果，本課題組收集臨床患者的乳腺癌標本，研究ABC轉運體與培美曲塞的轉運和耐藥的關係。我們收集了22例臨床乳腺癌樣本甲氨蝶呤、培美曲塞的IC50測定，原代培養，研究ABC轉運體的表達與培美曲塞耐藥的影響；臨床研究結果進一步驗證我們的假設。 2.同時，本課題ABC轉運體基因多態對甲氨蝶呤的血藥濃度和療效的影響。研究入選112名急性白血病患者，收集病人的入院日期、身高（cm）、體重（kg）、體表面積（㎡）、WBC、N、BPC、Hb、CRP、AST、ALT、BUN、Cr、尿酸、膽汁酸、鹼性磷酸酶、GGT、白蛋白、口腔黏膜損害、嘔吐、腹瀉次數。所有不良反應分級根據2003年代世界衛生組織抗癌藥物常見毒副反應分級標準（WHO3.0）評價。 在此部分研究中, 我們篩查轉運體ABCG2、ABCC2、ABCC4的基因多態性與兒童急性淋巴細胞白血病治療中血MTX濃度和毒性的相關性。發現ABCC2-24 C＞T突變影響血漿MTX濃度，並與臨床的不良反應密切相關。
