農藥殘留的危害,檢測技術及發展,GC/MS確證技術,快速檢測技術,農藥殘留檢測儀,概述,原理,常用農藥殘留快速檢測儀的優缺點,速測卡目測法(紙片法)農藥殘留快速檢定儀,智慧型化農藥殘留綜合速測儀,全自動大量農殘檢驗儀,使用方法,正常工作條件,主要技術指標,附加說明,
農藥殘留的危害
檢測技術及發展
GC/MS確證技術
控制農藥殘留對人體的危害,最為有效的方法之一是加強對
食品中農藥殘留檢測的力度。當今世界農殘的檢測分析向多殘留、快速分析發展,要保證高通量的檢測方法的準確性,需要有嚴格的農藥殘留確證技術。GC/MS是農藥殘留分析最廣泛使用的方法,使用GC/MS進行農殘分析,為了追求更高靈敏度和準確度,往往使用選擇離子模式(
SIM),依據保留時間和特徵離子及離子比例關係對目標物進行確證。在美國,一般要求樣品中目標物保留時間和標準品相比偏差小於0.05分鐘;每個目標物至少有3個特徵離子, 其相對離子比例與標準品相比絕對值在10%以內;同時還要考慮基質對目標物帶來的其他影響;實驗回收率一般在70%—120%之間。在歐盟,使用SIM模式要求每個目標物至少有2個大於m/z200或3個大於m/z100的特徵離子;目標物特徵離子比例與標準品相比處於70%—130%即可;日常檢測回收率控制在60%—140%,確證分析則需要在70%—110%之間。
快速檢測技術
但是傳統的GC/MS等農殘分析技術檢測成本高、時間長,這就給食品安全監管部門對農產品產前、產中、產後的監督工作帶來了許多不便,因此也催生出大量的快速農藥殘留的檢測技術,常見的有化學速測法、
免疫分析法、
酶抑制法和活體檢測法等。
(1)化學速測法,主要根據氧化還原反應,水解產物與檢測液作用變色,用於有機磷農藥的快速檢測,但是靈敏度低,使用局限性,且易受還原性物質干擾。
(2)免疫分析法,主要有
放射免疫分析和
酶免疫分析,最常用的是酶聯免疫分析(
ELISA),基於抗原和抗體的特異性識別和結合反應,對於小分子量農藥需要製備人工抗原,才能進行免疫分析。
(3)酶抑制法,是研究最成熟、套用最廣泛的快速農殘檢測技術,主要根據
有機磷和
氨基甲酸酯類農藥對乙醯膽鹼酶的特異性抑制反應。
(4)活體檢測法,主要利用活體生物對農藥殘留的敏感反應,例如給家蠅餵食樣品,觀察死亡率來判定農殘量。該方法操作簡單,但定性粗糙、準確度低,對農藥的適用範圍窄。
農藥殘留檢測儀
概述
農藥殘留快速檢測儀是根據我國國情和市場需要而研製開發的檢測農藥殘留量的專用儀器。
可以實現有機磷及氨基甲酸酯類農藥殘留量的現場快速檢測。它可以廣泛套用於產品質量監督檢驗、衛生防疫、環境保護、工商管理、蔬菜批發市場、蔬菜生產基地、超市、商場、農藥殘留監測系統等部門的蔬菜和水果中的農藥殘毒檢測。
原理
農藥殘留快速檢測儀根據國標GB/T5009.199-2003。採用連續檢測法和酶抑制原理。在一定條件下,有機磷和氨基甲酸類農藥對膽鹼酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常情況下,酶催化神經傳導代謝產物(
乙醯膽鹼)水解,其水解產物與顯色劑反應,產生黃色物質,用
分光光度計測定412nm下吸光度隨時間的變化值,計算出抑制率,通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機磷或氨基甲酸酯類農藥的殘留。
常用農藥殘留快速檢測儀的優缺點
速測卡目測法(紙片法)農藥殘留快速檢定儀
優點:
(1)體積較小,重量較輕,而且最新型號的儀器還可以自帶電源,方便在外出或戶外沒有電源的條件下操作。
(2)價格便宜,容易配齊全部實驗需要的試劑和玻璃儀器等,可以說它是使用最廣泛的農藥殘留速測儀。
(3)對操作人員的技術要求不高,操作簡單。
(4)在一次檢測樣品較少的情況下,使用這種速測儀檢測,能較快得出結果,因為它一次能檢測9~12個樣品。
缺點:
(1)檢測有機磷類和氨基甲酸酯類農藥的濃度範圍有限,而且檢測的限度比較高,所以它的準確性比較低,是常用農藥殘留速測儀器中檢測限最低的,有一定的套用局限性。
(2)由於速測卡的價錢比較貴,所以它檢測1個樣品的費用相對比較高。
(3)對於一次檢測較多樣品,此類速測儀不方便,檢測全部樣品的時間要長一些。
(4)由於它主要是靠目測速測卡的色澤變法來作出判斷的,所以對於最後檢測結果的判定,需要從長期的實際操作中總結經驗,才能比較容易和準確地判斷出哪些是合格的樣品,哪些是不合格的樣品。
智慧型化農藥殘留綜合速測儀
優點:
(1)因為它是酶抑制率測定法(分光光度法)儀器,相對速測卡目測法(
紙片法)農藥殘留快速檢定儀,其檢測有機磷類和氨摹甲酸酯類農藥的濃度範圍要相對大一些,而且檢測的限度也相對偏低,所以它的準確性相對較高。
(2)智慧型化農藥殘留綜合速測儀,除了能快速檢測蔬菜和水果的有機磷類和氨基甲酸酯類農藥的殘留外,還能快速定性檢測硝酸鹽和重金屬含量,確定是否超標,而且檢測1個樣品所需費用也較低。
(3)整套設備體積小,重量也較輕,所以也較方便帶到戶外作業。
(4)此類速測儀在檢測結果後,能自動判定樣品是否合格,較第1種農殘速測儀檢測結果(需要目測判定其是否合格)的準確性要高很多,出現誤判的情況要相對較少。
缺點:
(1)雖然此類農藥殘留快速檢測儀準確性較高,但是由於目前所用的國產試劑質量不穩定,因此靈敏度較低。此外,它集多個檢測項目於一身,因此準確性還不是很高,而且檢測的時間也比較長,是3種常用速測儀中所需檢測時間最長的。
(2)由於農藥殘留快速檢測儀所用試劑的特殊性,所以其試劑的保存條件也較苛刻,試劑不用時,必須放在冰櫃的冷凍室中保存,而且其他硝酸鹽和重金屬檢測項目的檢測試劑平時也必須保存在冰櫃的冷藏室。
(3)它對硝酸鹽和重金屬項目檢測的準確性是很低的,而且不能確定它們的含量。
(4)智慧型化農藥殘留綜合快速檢測儀對技術人員的要求要高很多,操作人員本身要有一定的實驗操作能力和經驗,而且要經過一定的培訓後,才能較好地完成檢測任務。
(5)智慧型化農藥殘留綜合快速檢測儀檢測1個樣品所需的時間是這3種速測儀中最長的,而且如果一次性需要檢測大量樣品的話,所需時間就更長了,很難達到及時和快速檢驗樣品的目的。
全自動大量農殘檢驗儀
優點:
(1)因為它是酶抑制率測定法(
分光光度法)儀器,檢測有機磷類和氨摹甲酸酯類農藥的濃度範圍是3種速測儀中最廣的,能檢測的限度也是最低的,幾乎接近氣相色譜儀檢測的限度,所以準確率比較高,可以達到80%以上,是3種速測儀中準確率最高的,因此出現誤判的情況也是最少的。
(2)它的試劑靈敏度比較高,所以檢測1個樣品的時間是3種速測儀中最短的,即使一次性檢測很多樣品,所需的檢測時間也很短,而且又因為是電腦自動檢測和計算抑制率,所以很快就能得出結果。
(3)一次性購買設備的投入比較大,但後期的檢測一個樣品的費用卻比較低,是3種速測儀中最便宜的。
缺點:
(1)售價太高。
(2)由於一定要電腦連線操作、使用,而且體積較大,質量也較大,所以一般不方便帶到戶外作業。此外,因為它對周圍環境溫度和濕度都有一定的要求,因此還要有專f門的房間放置。
(3)該儀器使用的試劑特殊,是廠家專門配製提供的,所以其保存條件也比較苛刻,不使用的試劑必須要放置在冰櫃的冷凍室內。緩衝液可以在常溫下保存。
(4)對操作人員技術和素質的要求也比較高,操作者除了要有一定的實驗窒操作經驗外,還必須經過專門培訓和多次實踐操作後,才能很好地運用這台速測儀進行農殘檢驗。
結果判定
以分光光度計測試(412nm波長)時,按下式計算抑制率:
抑制率(%)=[(ΔΑ0-ΔΑt )/ΔΑ0]×100
以農藥殘留快速測試儀檢測時其抑制率一般可自動計算。若樣品抑制率≥50%,表示樣品農殘超標,為陽性結果。陽性結果的樣品需做2次以上重複檢測,多次檢測仍呈陽性需用
氣相色譜等儀器做進一步確認。
使用方法
1、開機
打開儀器背面電源開關,儀器顯示開機畫面,按畫面提示操作,進行檢測之前先校正儀器零點
2、試劑配製
2.1、緩衝液:取1包緩衝劑加入500mL蒸餾水或純淨水中,攪拌溶解製成磷酸緩衝液(pH7.6), 常溫保存。
2.2、顯色劑:取1瓶顯色劑加25mL緩衝液溶解,使用時取100μL,4℃冰櫃保存。
2.3、底 物:取1瓶底物加12.5mL蒸餾水或純淨水溶解,使用時取100μL,4℃冰櫃保存;
或取1瓶底物加2.5mL蒸餾水或純淨水溶解 ,使用時取20μL,4℃冰櫃保存。
2.4、 膽鹼酯酶:酶製劑無需配製,可直接取用,使用時取100μL,4℃
冰櫃保存。
3、樣品提取
取2g果蔬樣品(塊莖類取4g),葉菜剪成25px左右見方的碎片,塊莖類取橫截面樣品或取其表皮,放入三角瓶中,加入10mL緩衝液,振盪1~2min ,倒出提取液,靜置2min,待測。若提取液混濁或雜質太多可過濾後再測。
4、測試
4.1、 對照測試:於反應瓶中加入2.5mL緩衝液,再分別加入100μL酶液和顯色劑,混勻,靜置反應10min後加入100μL(或20μL)底物,搖勻並立即倒入比色杯中,及時放入儀器的測量室通道中。按〈對照〉鍵,顯示屏延遲設定秒數後,測量時間開始倒計時,計時完畢,顯示屏顯示對照吸光度增量(ΔΑ),並提示完成。在進行對照測試時,其他通道可同時進行樣品測試。
4.2、樣品測試:於反應瓶中加入2.5mL待測液,再分別加入100μL酶液和顯色劑,混勻,靜置反應10min後加入100μL(或20μL)底物,搖勻並立即倒入比色皿中,及時放入儀器的測量室通道。按〈樣品〉鍵,顯示屏下方延遲設定秒數後,測量時間開始倒計時,計時完畢,顯示屏顯示樣品吸光度增量(ΔΑ)及抑制率,並提示合格或超標。數據可進行自動保存,如有需要按〈列印〉鍵列印。
正常工作條件
1、環境溫度5℃~35℃。 室內相對濕度不大於85%。
2、儀器應放在平穩的工作檯上,無陽光直射及強烈的電磁場干擾。
3、室內無腐蝕性氣體。
4、工作電源: AC.220V±10%;50Hz/60Hz
5、內置電池
儀器功能與特點
1.符合國標:儀器與配套試劑嚴格按國家標準生產,採用連續檢測法和酶抑制法。
2.技術創新:採用國際最新高精度A/D轉換技術並配備410nm獨立
冷光源,使採樣速度、精度及光源穩定性均優於國內同類產品。可單機使用亦可聯接電腦操作;檢測時間短、速度快、操作簡單;儀器體積小、重量輕、方便攜帶。
3.科學處理:具有圖譜化與導數處理功能,不能人為更改檢測數據與結果,保證檢測過程及結果的準確與真實性;採用資料庫管理模式可快速準確地檢索檢測結果,方便報錶快捷地編輯和列印輸出。
4.無盲檢測:針對快速檢測中易呈
假陽性結果的問題,我所與權威機構合作研發的農藥殘留果蔬比對資料庫能夠有效去除蔬菜本身未知化合物對酶速測法測定的干擾,大大降低了假陽性現象,成為目前唯一能解決該類假陽性問題的快速檢測設備。
5.智慧型聯網:支持網路數據傳輸,同步將檢測結果上傳至聯網監測系統中,達到實時監控和安全預警目的,完善地區農產品質量安全監控體系建設。
主要技術指標
波長
| 410nm±2nm
|
零點漂移
| ≤0.5%(τ)
|
透射比準確度
| ≤±2.0%(τ)
|
透射比重複性
| ≤0.5%(τ)
|
通道間差
| ≤1.0%(τ)
|
抑制率測量範圍
| 0~100%
|
檢測下限
| 0.1~3.0mg/kg
|
印表機
| 內置印表機
|
重量
| 3.6kg
|
電源輸入
| AC.220V±10%;50Hz/60Hz
|
內置電池
|
輸入功率
| ≤30W
|
附加說明
1、 包裝及保存:農藥殘留檢測試劑包含
緩衝劑10包,
膽鹼酯酶5瓶,顯色劑5瓶,底物5瓶,可供500份樣品測試;使用前整盒試劑應保存於4℃冰櫃,保質期12個月;室溫或常溫保存時,保質期3~6個月。
2、試劑的使用:任何試劑使用時,用一瓶打開一瓶,用完後才使用新的,防止試劑變質。
3、試劑只出不入原則:測試時,從任何試劑瓶吸出的試劑,禁止再次注射回試劑瓶。
4、器具原則:用於移液的器具每次使用後都應清洗乾淨,以免交叉污染。
5、檢測操作使用移液器及放液過程中,需適當控制節奏,以免吸液或放液過快導致加試劑量不準,並且有利於保護移液器設備。
6、本儀器通用於按國家標準GB/T5009.199及按行業標準NY/T448-2001配套試劑的檢測。使用方法參照試劑配套說明書。
7、更詳細的儀器操作方法請參閱產品配套的說明書。