《臨床診斷中聚合酶鏈反應(PCR)技術的套用》是2002年07月01日實施的一項行業標準。
基本介紹
- 中文名:臨床診斷中聚合酶鏈反應(PCR)技術的套用
- 標準號:WS/T 230-2002
- 制修訂:制定
- 發布日期:2002-04-20
- 批准發布部門:衛生部
- 實施日期:2002-07-01
- 中國標準分類號:C50
- 國際標準分類號:11.020
《臨床診斷中聚合酶鏈反應(PCR)技術的套用》是2002年07月01日實施的一項行業標準。
聚合酶鏈式反應是一種在體外快速擴增特定基因或DNA序列的方法,故又稱為基因的體外擴增法。PCR技術類似於DNA的天然複製過程,其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。臨床意義 PCR能快速特異擴增任何已知目的基因或DNA片段,並能...
2研究方法:PCR技術:採用廈門長城生物工程有限公司生產的HPDNAPCR診斷試劑盒,DNA抽提採用水煮沸法,引物為尿素酶基因片段,其核著酸順序為:引物1為5'-AAGCTTTTATTAGGGGTTT—3',引物2為5'-TTATTACGCTTC—3',擴增產物為456bP,94...
臨床診斷中聚合酶鏈反應(PCR)技術的套用 《臨床診斷中聚合酶鏈反應(PCR)技術的套用》是2002年07月01日實施的一項行業標準。備案信息 備案號:10289-2002。
RT-PCR技術靈敏而且用途廣泛,可用於檢測細胞中基因表達水平,細胞中RNA病毒的含量和直接克隆 特定基因的cDNA序列。作為模板的RNA可以是總RNA、mRNA或體外轉錄的RNA產物。無論使用何種RNA,關鍵是確保RNA中無RNA酶和基因組 DNA的污染。提取...
PCR是聚合酶鏈式反應的簡稱,是一種酶促化學反應,可以在試管里將待測的目的基因在很短的時間內擴增五十萬倍乃至上百萬倍,大大提高了基因診斷的靈敏度,降低了分析的難度。PCR法是基因診斷中使用最多的方法。步驟 首先,對待測基因...
主要涉及《全國臨床檢驗規程》(第三版)、《醫療機構臨床基因擴增管理辦法》(衛辦醫政發〔2010〕194號)、《醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則》及《臨床診斷中聚合酶鏈反應(PCR)技術的套用》(WS/T 230-2002)等行業標準的...
RT-PCR作用 RT-PCR使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數量級,使一些極為微量RNA樣品分析成為可能。該技術主要用於:分析基因的轉錄產物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構建RNA高效轉錄系統。合成cDNA引物的選擇 1. 隨機六聚體引物:當特定mRNA...
(4)原位雜交:其基本方法是套用特定標記的已知序列的核酸分子作為探針,與細胞塗片或組織切片中的核酸進行特異性結合形成雜交體,然後套用組織化學或免疫組織化學方法在顯微鏡下進行細胞內定位或基因表達的檢測。2.聚合酶鏈反應技術 聚合酶...
所以僅需一小時的PCR能節省大量時間和繁複的操作,聚合酶鏈式反應技術被廣泛地運用在醫學和生物學的實驗室,例如用於判斷檢體中是否會表現某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因複製,以及親子鑑定。簡併引物 用於聚合酶鏈式反應的特殊引子...
RT—PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用,從RNA合成cDNA,再以cDNA為模板,在DNA聚合酶作用下擴增合成目的片段。RT—PCR技術...
另外採用核酸診斷技術還可以檢測到常規檢測方法難以檢測到的病原體,例如可以克服酶免檢測技術中從感染到抗體產生的視窗期問題。因此,以PCR技術為代表的核酸診斷技術在臨床診斷中得到日益廣泛的套用。
《PCR聚合酶鏈反應》是 2009年化學工業出版社出版的圖書,作者是劉森。本書主要介紹了PCR的基本原理、操作方法、常見問題等內容。內容簡介 本書分為三篇,原理篇簡要介紹PCR基本原理、技術發展及重要套用;操作方法/技術篇按照由簡單到...
實時性聚合酶鏈反應是一種定量測定樣品中特定DNA序列的聚合酶鏈反應。即使用標記(最常用是螢光標記)的PCR引物,因而能夠通過螢光監測到每一次PCR循環後擴增所得DNA產物的量,從連續監控下獲得的反應動力學曲線,可推導得樣品中被擴增模板...
實時螢光聚合酶鏈反應(real-time fluorescence PCR)是2019年公布的感染病學名詞。定義 在PCR反應體系中加入螢光基團,利用螢光信號積累實時檢測整個PCR進程,最後通過標準曲線對未知模板進行定量的方法。出處 《感染病學名詞》第一版。
甲基化特異性聚合酶鏈反應是2008年公布的生物化學與分子生物學名詞。定義 一種簡單快速測定突變熱點二核苷酸“CpG島”甲基化狀態的方法。待測的DNA片段以重亞硫酸鈉修飾,分別用專對甲基化和非甲基化DNA的兩套引物進行PCR擴增,即可得到...
定量聚合酶鏈反應是將某種已知含量的DNA模板作為內標準進行PCR反應,對待測模板進行定量分析的技術。更靈敏的定量PCR是採用實時PCR技術。中文名稱 定量聚合酶鏈反應 套用學科 生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
由於Taq酶不含核酸外切酶活性,在擴增中會以低而限定的速率產生錯誤,因此套用有3’→5’外切酶校正功能的pfu DNA聚合酶,減少擴增次數為25~30循環,使忠實性提高10~20倍左右,而進行目的基因鑑定時PCR反應的特異性和有效性更為重要,...
三、細胞分選和鑑定中的套用 四、克隆細胞及雜交瘤的選擇和鑑定 五、在細胞免疫功能測定中的套用 第6章 聚合酶鏈反應技術在免疫性疾病中的套用 第一節 PCR的基本原理和影響因素 一、PCR技術的基本原理 二、PCR動力學與擴增平台 三、...
運用此技術已成功篩選到一些與靶分子特異結合的高親和力蛋白質, 包括抗體、 多肽、 酶等, 是蛋白質篩選的重要工具。原理 核糖體展示技術通過聚合酶鏈反應 (PCR)擴增DNA文庫,同時引入T7 啟動子、核糖體結合位點及莖-環結構, 將其...
《數字PCR——原理、技術及套用》是2017年科學出版社出版圖書,作者是彭年才。內容簡介 數字PCR以聚合酶鏈式反應的理論和技術體系為基礎,結合現代微機電和光學檢測技術,實現單分子水平的核酸精確定量檢測。數字PCR作為第三代PCR技術,是...
PCR酶聯免疫吸附測定 PCR酶聯免疫吸附測定是一種生物實驗方法
實時螢光定量PCR的定量方法 在Real-timePCR中,模板定量有兩種策略,相對定量和絕對定量。儀器設備 主詞條:實時螢光定量pcr儀 相關套用 臨床疾病診斷 各型肝炎、愛滋病、禽流感、結核、性病等傳染病診斷和療效評價;地中海貧血、血友病、...
的PCR引物,因而能夠通過螢光監測到每一次PCR循環後擴增所得DNA產物的量,從連續監控下獲得的反應動力學曲線,可推導得樣品中被擴增模板DNA的原初含量。套用學科 生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
總體而言,免疫膠體金有著強大的發展潛力和廣闊的套用前景。分子生物學檢測方法 該技術主要包括聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)技術,核酸探針技術,環介導等溫擴增技術等技術。①聚合酶鏈反應技術:該方法的原理是在DNA聚合...