《經PLGF通路促進非小細胞肺癌轉移的機制研究》是依託上海交通大學，由張偉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：經PLGF通路促進非小細胞肺癌轉移的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張偉
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
胎盤生長因子（PLGF）近來被發現有顯著的促腫瘤細胞轉移作用，但對非小細胞肺癌（NSCLC）的作用不清。我們發現多數NSCLC患者體內PLGF升高並與轉移呈正相關，並且PLGF具有激活巨噬細胞PLGF受體Flt-1、募集巨噬細胞至腫瘤部位浸潤和極性改變而成為腫瘤相關巨噬細胞(TAM)作用，進而刺激腫瘤細胞分泌MMP9。我們推測：PLGF可激活TAM並通過旁分泌TGFβ，結合NSCLC細胞上的受體，反向激活P38/MAPK下游信號傳導通路，並激活MMP9表達和分泌，促進腫瘤的侵襲和轉移。本課題擬以PLGF為研究對象，利用種植瘤動物模型平台，使用特異性巨噬細胞殺傷劑及PLGF信號通路中關鍵分子的抑制劑，利用慢病毒載體對特定基因過/去表達，在一系列功能獲得/丟失實驗中研究PLGF促進轉移的分子機理，特別是TAM被激活後進而激活MMP9的下游信號傳導通路，為臨床發現新的治療靶點提供理論依據。
結題摘要
在本課題中，我們建立了小鼠體內種植NSCLC模型，套用巨噬細胞殺傷劑，結合使用PLGF信號傳導通路中不同分子的特異性抑制劑，使用慢病毒攜帶轉基因(overexpression)及ShRNA (knock-down)，並通過一系列功能獲得(gain-of-function)和功能丟失(loss-of-function)實驗，了解 PLGF和MMP9之間的相互作用，探討其下游信號通路的作用機制。發現A549細胞可以誘導PLGF表達，並促進巨噬細胞極化，巨噬細胞被激活後呈現II型極化(TAM)，分泌B型轉化生長因子(TGFβ) ，從而反過來激活NSCLC的P38/MAPK下游信號傳導通路，並最終激活基質金屬蛋白酶MMP9的表達和分泌，促進腫瘤細胞的侵襲轉移。 之後，我們又探索了肺腺癌中PLGF通路上游可能的基因，通過TCGA資料庫分析分析，MFN2基因可能為其上游基因。我們在整體動物水平上，運用裸鼠成瘤模型，構建了MFN2基因敲減後的人肺細胞株A549成瘤模型，與對照組MFN2基因正常表達的A549細胞株成瘤模型相比，腫瘤生長減緩。通過免疫組化比較兩種細胞株中FLT1、PGF、TGFB1、VEGFA、KI67、ITGA2、E2F5共7個與PLGF相關蛋白的表達情況，分析發現FLT1、TGFB1、ITGA2、E2F5蛋白表達與MFN2相關。因此，MFN2基因可能通過PLGF通路影響肺癌發生髮展。
