基本信息
書名:《現代生物科技專題》(選修3)
作者:人民教育出版社課程教材研究所 生物課程教材研究室開發中心
定價:9.76元
教材目錄
專題1 基因工程
1.3 基因工程的套用
1.4 蛋白質工程的崛起
專題2 細胞工程
2.1 植物細胞工程
2.1.1 植物細胞工程的基本技術
2.1.2 植物細胞工程的實際套用
2.2 動物細胞工程
專題3 胚胎技術
專題4 生物技術的安全性和倫理問題
4.2 關注生物技術的倫理問題
4.3 禁止生物武器
專題5 生態工程
5.1 生態工程的基本原理
5.2 生態工程的實例和發展前景
教材知識點
專題一、基因工程
1、(a)基因工程的誕生
基因工程的概念:基因工程是指按照人們的願望,進行嚴格的設計,通過體外
DNA重組和
轉基因技術,賦予生物以新的遺傳特性,創造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品。基因工程是在
DNA分子水平上進行設計和施工的,又叫做DNA重組技術。
2、(a)基因工程的原理及技術
技術:(一)基因工程的基本工具
(2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,並且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
磷酸二酯鍵斷開,因此具有
專一性。
(3)結果:經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式:
黏性末端和平末端。
①相同點:都縫合磷酸二酯鍵。
②區別:E·coliDNA連線酶來源於
大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連線起來;而T4DNA連線酶能縫合兩種末端,但連線
平末端的之間的效率較低。
(1)載體具備的條件:①能在
受體細胞中複製並穩定保存。②具有一至多個限制酶切點,供
外源DNA片段插入。③具有
標記基因,供重組DNA的鑑定和選擇。
2.原核基因採取直接分離獲得,
真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有
反轉錄法和化學合成法。
3.PCR技術擴增目的基因
(1)原理:DNA雙鏈複製
(2)過程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結合到互補DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩定
DNA聚合酶從引物起始
互補鏈的合成。
1.目的:使
目的基因在
受體細胞中穩定存在,並且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達和發揮作用。
(1)啟動子:是一段有特殊結構的DNA片段,位於基因的首端,是
RNA聚合酶識別和結合的部位,能
驅動基因轉錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質。
(2)終止子:也是一段有特殊結構的DNA片段 ,位於基因的尾端。
(3)標記基因的作用:是為了鑑定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。常用的標記基因是抗生素基因。
1.轉化的概念:是
目的基因進入
受體細胞內,並且在受體細胞內維持穩定和表達的過程。
2.常用的轉化方法:
將目的基因導入微生物細胞:Ca離子處理法,此方法的受體細胞多是
原核細胞。
2.其次還要檢測目的基因是否
轉錄出了mRNA,方法是採用用標記的目的基因作探針與mRNA雜交。
3.最後檢測目的基因是否翻譯成蛋白質,方法是從轉基因生物中提取蛋白質,用相應的抗體進行抗原-抗體雜交。
4.有時還需進行
個體生物學水平的鑑定。如 轉基因抗蟲植物是否出現抗蟲性狀。
3、(b)基因工程的套用
1.植物基因工程:抗蟲、抗病、抗逆
轉基因植物,利用轉基因改良植物的品質。
2.動物基因工程:提高動物生長速度、改善畜產品品質、用
轉基因動物生產藥物。
3.基因治療:把正常的外源基因導入病人體內,使該
基因表達產物發揮作用。
4、(a)蛋白質工程的概念
蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規律及其生物功能的關係作為基礎,通過
基因修飾或
基因合成,對現有蛋白質進行改造,或製造一種新的蛋白質,以滿足人類的生產和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產自然界已存在的蛋白質)
(1)蛋白質工程崛起的緣由:基因工程只能生產自然界已存在的蛋白質
基本途徑:從預期的蛋白質功能出發,設計預期的
蛋白質結構,推測應有的胺基酸序列,找到相對應的脫氧核 苷酸序列(基因)以上是蛋白質工程特有的途徑;以下按照基因工程的一般步驟進行。(注意:
目的基因只能用人工合成的方法)
專題二、細胞工程
(一)植物細胞工程
2.植物組織培養技術(b)
(1)過程:離體的植物器官、組織或細胞 ―――→
愈傷組織 ―――→試管苗 ――→植物體
微型繁殖:可以高效快速地實現種苗的大量繁殖
作物脫毒:採用莖尖
組織培養來除去病毒(因為植物
分生區附近的病毒極少或沒有)
人工種子:以植物組織培養得到的
胚狀體、
不定芽、
頂芽和
腋芽等為材料,經人工薄膜包裝得到的種子。優點:完全保持優良品種的遺傳特性,不受季節的限制;方便儲藏和運輸
B 作物新品種培育
單倍體育種:
b 優點:明顯縮短育種年限
c 突變體利用:在
組織培養中會出現突變體,通過從有用的突變體中選育出新品種(如篩選抗病、抗鹽、含高蛋白的突變體)
d
細胞產物的生產:通過能夠產生對人們有利的產物的細胞進行組織培養,從而讓它們能夠產生大量的細胞產物
3.植物體細胞雜交技術
(1)過程:(2)誘導融合的方法:物理法包括離心、振動、電刺激等。化學法一般是用
聚乙二醇(
PEG)作為誘導劑。
(二)動物細胞工程
(1)概念:動物細胞培養就是從動物機體中取出相關的組織,將它分散成單個細胞,然後放在適宜的培養基中,讓這些
細胞生長和繁殖。
(2)動物細胞培養的流程:取
動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)→剪碎→用
胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→製成細胞懸液→轉入培養瓶中進行
原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續
傳代培養。
(3)細胞貼壁和
接觸抑制:懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細胞貼壁。細胞數目不斷增多,當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時,細胞就會停止分裂增殖,這種現象稱為細胞的接觸抑制。
①無菌、無毒的環境:培養液應進行無菌處理。通常還要在培養液中添加一定量的抗生素,以防培養過程中的污染。此外,應定期更換培養液,防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。
②營養:
合成培養基成分:糖、胺基酸、
促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。
③溫度:適宜溫度:哺乳動物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。
④氣體環境:95%空氣+5%CO2。O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養液的pH。
(5)動物細胞培養技術的套用:製備病毒疫苗、製備單克隆抗體、檢測有毒物質、培養醫學研究的各種細胞。
2.動物體細胞核移植技術和克隆動物
(2)選用去核卵(母)細胞的原因:卵(母)細胞比較大,容易操作;卵(母)細胞
細胞質多,營養豐富。
(3)體細胞核移植的大致過程是:
高產奶牛(提供體細胞)進行
細胞培養;同時採集
卵母細胞,在體外培養到減
二分裂中期的卵母細胞,去核(
顯微操作)(註:為什麼要用
卵細胞?它可以提供充足的營養;操作簡便;細胞質不會抑制
細胞核全能性的表達);將供體細胞注入去核卵母細胞;通過電刺激使兩
細胞融合,供體核進入受體卵母細胞,構建重組胚胎;將胚胎移入受體(
代孕)母牛體內;生出與供體
奶牛遺傳基因相同的犢牛。
(4)體細胞核移植技術的套用:①加速家畜遺傳改良進程,促進良畜群繁育;②保護瀕危物種,增大存活數量;
③生產珍貴的醫用蛋白;④作為異種移植的供體;⑤用於
組織器官的移植等。
(5)體細胞核移植技術存在的問題:克隆動物存在著健康問題、表現出遺傳和生理缺陷等。
(2)動物細胞融合與植物
原生質體融合的原理基本相同,誘導動物細胞融合的方法與植物原生質體融合的方法類似,常用的誘導因素有
聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。
(4)動物細胞融合與
植物體細胞雜交的比較:4.單克隆抗體
(1)抗體:一個
B淋巴細胞只分泌一
種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產量低、純度低、特異性差。
(2)單克隆抗體的製備過程:對免疫小鼠注射特定的抗原蛋白(目的使小鼠產生了效應B細胞);提取B淋巴細胞;同時用
動物細胞培養的方法培養
骨髓瘤細胞並提取;促使它們
細胞融合(註:融合的結果是有很多不符合要求的;如有2個B淋巴細胞融合的細胞等,所以要進行篩選);在特定的
選擇培養基上篩選出融合的
雜種細胞(特點是能迅速大量增殖,又能產生專一的抗體);然後對它進行
克隆化培養和
抗體檢測(篩選出能夠分泌所需抗體的雜種細胞);最後將
雜交瘤細胞在體外做大規模培養或注射入小鼠腹腔內增殖,從細胞培養液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體。
(3)雜交瘤細胞的特點:既能大量繁殖,又能產生專一的抗體。
(4)單克隆抗體的優點:特異性強,靈敏度高,並能大量製備。
(5)單克隆抗體的作用:作為
診斷試劑:準確識別各種
抗原物質的細微差異,並跟一定抗原發生特異性結合,具有準確、高效、簡易、快速的優點。用於治療疾病和運載藥物:主要用於治療癌症治療,可製成“
生物飛彈”,也有少量用於治療其它疾病。
專題三、胚胎工程
(3)受精:
精子獲能(在雌性動物生殖道內);卵子的準備(排出的卵子要在輸卵管中進一步成熟到減二中期才具備受精能力);受精階段(
卵子周圍的結構由外到內:
放射冠、透明帶、
卵黃膜),a
頂體反應:精子釋放
頂體酶溶解
卵丘細胞之間的物質,穿越放射冠。
b
透明帶反應:頂體酶可將透明帶溶出孔道,精子穿入,在精子觸及卵黃膜的瞬間阻止後來精子進入
透明帶的生理反應(它是防止多精子入卵受精的第一道屏障);c卵黃膜的封閉作用:精子外膜和卵黃膜融合,精子入卵後,卵黃膜會拒絕其他精子再進入卵內的過程(它是防止多精子入卵受精的第二道屏障);精子尾部脫落,原有
核膜破裂形成
雄原核,同時卵子完成減
二分裂,形成雌原核(注意:受精標誌是
第二極體的形成;受精完成標誌是雌雄
原核融合成合子)。
概念簡述:
受精場所:母體的輸卵管。
卵裂期:特點:細胞
有絲分裂,細胞數量不斷增加,但胚胎的總體體積並不增加,或略有減小。
桑椹胚:特點:胚胎細胞數目達到32個左右時,胚胎形成緻密的細胞團,形似桑椹。是
全能細胞。
囊 胚:特點:細胞開始出現分化(該時期細胞的
全能性仍比較高)。聚集在胚胎一端個體較大的細胞稱為
內細胞團,將來發育成胎兒的各種組織。中間的空腔稱為
囊胚腔。
(4)
胚胎髮育:a卵裂期:細胞進行有絲分裂,數量增加,胚胎總體積不增加;b桑椹胚:32個細胞左右的胚胎(之前所有細胞都能發育成完整胚胎的潛能屬
全能細胞);c
囊胚:細胞開始分化,其中個體較大的細胞叫內細胞團將來發育成胎兒的各種組織;而
滋養層細胞將來發育成
胎膜和
胎盤;胚胎內部逐漸出現囊胚腔(註:囊胚的擴大會導致透明帶的破裂,胚胎伸展出來,這一過程叫孵化);d原腸胚:內細胞團表層形成
外胚層,下方細胞形成
內胚層,由內胚層包圍的囊腔叫
原腸腔。(
細胞分化在胚胎期達到最大限度)
(2)體外受精(屬
有性生殖過程):a
卵母細胞的採集和培養 對體型小的動物用促性腺激素處理,從輸卵管沖取
卵子(可直接受精);對體型大的動物從卵巢中採集卵母細胞(要在體外培養成熟)b精子的採集 假陰道法、手握法和電刺激法;
獲能 對齧齒動物、兔、豬等的精子用培養法(放入人工配製的獲能液中);對牛、羊等精子用化學法(放在肝素或
鈣離子載體溶液中)
(3)胚胎的早期培養:a培養液成分:無機鹽、
有機鹽、維生素、激素、胺基酸、核苷酸、血清等(注意與
動物細胞培養液成分的比較);b當
胚胎髮育到適宜的階段時,可將其取出向受體移植或冷凍保存。
a概念:將雌性動物的早期胚胎移植到同種的、生理狀態相同的其他雌性動物的體內,使之繼續發育為新個體的技術。是生產胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖後代的過程,通過轉基因、
核移植、
體外受精獲得的胚胎必須移植給受體才能獲得後代。
b優勢:可以充分發揮雌性優良個體的
繁殖潛力,縮短供體本身的繁殖周期。
c
胚胎移植的生理學基礎:同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的(對供體和受體進行
同期發情處理);早期胚胎形成後處於游離狀態,為胚胎的收集提供可能;受體對移入
子宮的外來胚胎基本不發生免疫排斥反應;移入受體的供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。
d胚胎移植的程式:對供、受體母牛進行選擇,用激素進行同期發情處理;對供體母牛用激素做
超數排卵處理;選擇同種優秀公牛配種(
有性生殖過程);對胚胎進行收集(此時胚胎處於游離狀態);對胚胎進行質量檢查(此時胚胎應發育到
桑椹胚或
囊胚);胚胎移植(或
冷凍保存);檢查受體母牛是否受孕;產下胚胎移植的
犢牛。
a概念:用機械方法將早期胚胎切割成2、4、8等分等,經移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(可看作是動物無性繁殖或克隆)
b基本過程:選擇良好的桑椹胚或囊胚移入
培養皿中,用分割針或分割刀片將其切開,吸出其中的半個胚胎注入透明帶中或直接移植給受體。(注意:
內細胞團要均等分割,否則會影響胚胎的恢復和進一步發育)
胚胎幹細胞的移植(識記)
(1)胚胎幹細胞的含義:由早期胚胎(
囊胚)或
原始性腺(胎兒)中分離出來的一類細胞,又叫ES或
EK細胞。
(2)特徵:形態上體積小、
細胞核大、
核仁明顯;功能上具有發育的
全能性,即可分化為成年動物體內任何一種組織細胞。(體外培養下,
ES細胞可以只增殖不分化)
(3)套用:用於治療人類疾病,如利用ES細胞誘導其分化成新的組織細胞特性,移植ES細胞可使壞死或退化的部位得以修復。
(二)胚胎幹細胞
1、哺乳動物的胚胎幹細胞簡稱ES或
EK細胞,來源於早期胚胎或從
原始性腺中分離出來。
2、具有胚胎細胞的特性,在形態上表現為體積小,
細胞核大,
核仁明顯;在功能上,具有發育的全能性,可分化為成年動物體內任何一種組織細胞。另外,在體外培養的條件下,可以增殖而不發生分化,可進行
冷凍保存,也可進行遺傳改造。
3、胚胎幹細胞的主要用途是:
②是在體外條件下研究
細胞分化的理想材料,在培養液中加入分化誘導因子,如牛黃酸等化學物質時,就可以誘導
ES細胞向不同類型的組織細胞分化,這為揭示細胞分化和
細胞凋亡的機理提供了有效的手段;
④利用可以被誘導分化形成新的組織細胞的特性,移植ES細胞可使壞死或退化的部位得以修復並恢復正常功能;
(1)
卵母細胞的採集和培養:主要方法:用促性腺激素處理,使其排出更多的
卵子,然後,從輸卵管中沖取卵子,直接與
獲能的精子在體外受精。第二種方法:從剛屠宰母畜的卵巢中採集卵母細胞;第三種方法是藉助超音波探測儀、腹腔鏡等直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。採集的卵母細胞,都要在體外經人工培養成熟後,才能與獲能的精子受精。
(2) 精子的採集和獲能:在體外受精前,要對精子進行獲能處理。
(3) 受精:
獲能的精子和培養成熟的卵細胞在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程。
(4)胚胎的早期培養:精子與
卵子在
體外受精後,應將
受精卵移入發育培養液中繼續培養,以檢查受精狀況和受精卵的發育能力。培養液成分較複雜,除一些無機鹽和
有機鹽外,還需添加維生素、激素、胺基酸、核苷酸等營養成分,以及血清等物質。當
胚胎髮育到適宜的階段時,可將其取出向受體移植或
冷凍保存。不同動物
胚胎移植的時間不同。(牛、羊一般要培育到
桑椹胚或
囊胚階段才能進行移植,小鼠、
家兔等實驗動物可在更早的階段移植,人的體外受精胚胎可在4個細胞階段移植)
2.胚胎移植
(1)胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎,或者通過
體外受精及其它方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態相同的其它雌性動物的體內,使之繼續發育為新個體的技術。其中提供胚胎的個體稱為“供體”,接受胚胎的個體稱為“受體”。(供體為優良品種,作為受體的雌性動物應為常見或存量大的品種)
地位:如轉基因、
核移植,或體外受精等任何一項胚胎工程技術所生產的胚胎,都必須經過
胚胎移植技術才能獲得後代,是
胚胎工程的最後一道“工序”。
(2)
胚胎移植的意義:大大縮短了供體本身的繁殖周期,充分發揮雌性優良個體的繁殖能力。
(3) 生理學基礎:
①動物發情排卵後,同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的
生理環境。
②早期胚胎在一定時間內處於游離狀態。這就為胚胎的收集提供了可能。
③受體對移入子宮的外來胚胎不發生免疫
排斥反應。這為胚胎在受體的存活提供了可能。
④供體胚胎可與受體
子宮建立正常的生理和組織聯繫,但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。
(4) 基本程式主要包括:
①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體,有健康的體質和正常繁殖能力的受體,供體和受體是同一物種。並用激素進行
同期發情處理,用促性腺激素對供體母牛做
超數排卵處理。
③對胚胎的收集、檢查、培養或保存。配種或輸精後第7天,用特製的
沖卵裝置,把供體母牛
子宮內的胚胎沖洗出來(也叫沖卵)。對胚胎進行質量檢查,此時的胚胎應發育到桑椹或
胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。
④對胚胎進行移植。
⑤移植後的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查。
(1)概念:是指採用機械方法將早期胚胎切割2等份、4等份等,經移植獲得同卵雙胎或多胎的技術。
(3)意義:來自同一胚胎的後代具有相同的遺傳物質,屬於無性繁殖。
(3)材料:發育良好,形態正常的
桑椹胚或
囊胚。(桑椹胚至囊胚的發育過程中,細胞開始分化,但其
全能性仍很高,也可用於胚胎分割)
(4)操作過程:對囊胚階段的胚胎分割時,要將
內細胞團均等分割,否則會影響分割後胚胎的恢復和進一步發育。
專題四、生物技術的安全性和倫理問題
(1)基因生物與食物安全:
反方觀點:反對“實質性等同”、出現滯後效應、出現新的過敏原、營養成分改變
正方觀點:有安全性評價、科學家負責的態度、無實例無證據
(2)轉基因生物與生物安全:對生物多樣性的影響
正方觀點:生命力有限、存在
生殖隔離、花粉傳播距離有限、花粉存活時間有限
正方觀點:不改變生物原有的
分類地位、減少農藥使用、保護農田土壤環境
2.生物技術的倫理問題
(1)複製人:兩種不同觀點,多數人持否定態度。
否定的理由:複製人嚴重違反了人類倫理道德,是
克隆技術的濫用;複製人衝擊了現有的婚姻、家庭和兩性關係等傳統的
倫理道德觀念;複製人是在人為的製造在心理上和社會地位上都不健全的人。
肯定的理由:技術性問題可以通過胚胎分級、
基因診斷和染色體檢查等方法解決。不成熟的技術也只有通過實踐才能使之成熟。
中國政府的態度:禁止生殖性克隆,不反對治療性克隆。四不原則:不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性複製人的實驗。
(2)試管嬰兒:兩種目的試管嬰兒的區別兩種。不同觀點,多數人持認可態度。
否定的理由:把試管嬰兒當作人體零配件工廠,是對生命的不尊重;早期生命也有活下去的權利,拋棄或殺死多餘胚胎,無異於“謀殺”。
肯定的理由:解決了不育問題,提供骨髓中造血幹細胞救治患者最好、最快捷的方法,提供骨髓造血幹細胞並不會對試管嬰兒造成損傷。
否定的理由:個人基因資訊的泄漏造成
基因歧視,勢必造成遺傳學失業大軍、造成個人婚姻困難、人際關係疏遠等嚴重後果。
肯定的理由:通過基因檢測可以及早採取預防措施,適時進行治療,達到挽救患者生命的目的。
(2)散布方式:吸入、誤食、接觸帶菌物品、被帶菌昆蟲叮咬等。
(3)特點:致病力強、多數具傳染性、傳染途徑多、污染面廣、有潛伏期、不易被發現、危害時間長等。
(4)禁止生物武器公約及中國政府的態度:在任何情況下不發展、不生產、不儲存生物武器,並反對生物武器及其技術和設備的擴散。
專題五、生態工程
生態工程的原理(識記)
(1)生態工程建設的目的:遵循自然界
物質循環的規律,充分發揮資源的生產潛力,防止環境污染,達到經濟效益和
生態效益的同步發展。
(2)
生態經濟:通過實行
循環經濟的原則,使一個系統產出的污染物能夠成為本系統或另一個系統的生產原料,從而實現廢棄物的資源化。(實現手段:
生態工程)
(3)基本原理:物質循環再生原理(如無廢棄物農業)
系統性和工程學原理:(系統的結構決定
功能原理:考慮系統內部不同組分之間的結構,通過改變和最佳化結構,達到改善系統功能的目的;系統整體性原理:實現總體功能大於各部分之和的效果)
生態工程的實例(識記)
(3)大區域生態系統恢復工程:解決問題:西北地區的土地荒漠化 運用原理:協調與平衡原理、生物多樣性原理等
(4)濕地生態恢復工程:
解決問題:濕地的大面積縮小
處理方法:採用工程和生物措施相結合,如
廢水處理、點源和
非點源污染控制、土地處理工程等使濕地得以恢復
濕地的功能:具有蓄洪防旱,調節區域氣候,控制
土壤侵蝕,自然淨化污水等
(6)
城市環境生態工程:解決環境污染問題措施 進行城市規劃和合理布局;推廣“
環境友好技術”和低污染清潔生產工藝;對垃圾進行分類處理,並實現垃圾資源化利用等