簡介
志賀菌屬( Shigella)細菌是人類細菌性瘌疾的病原菌,通稱痢疾桿菌( dysentery bacterium)。靈長類動物亦是其天然宿主。細菌性痢疾主要流行於開發中國家,是一種常見病,全世界年病例數超過2億,年死亡病例數達65萬。本屬細菌包括志賀痢疾桿菌、福氏痢疾桿菌、鮑氏痢疾桿菌和疾桿菌4個群、47個血清型。
我國以福氏和宋內志賀菌引起的菌痢最為常見。
細菌性痢疾是一種常見病,主要流行於開發中國家,全世界年病例數超過2億,其中500萬例需住院治療,年死亡病例達65萬。志賀菌屬還可感染除人類以外的其他靈長類,偶爾感染畜禽,可引起肉品等污染。
生物學特性
大小為0.5—0.7μmx2—3μm,無莢膜,無鞭毛,不形成芽胞,某些菌株有菌毛。在選擇培養基上形成較小的半透明無色菌落。本屬菌生化反應能力較其他腸道桿菌為弱。分解葡萄糖一般不產氣。不分解尿素,不形成硫化氫,不能利用枸櫞酸鹽作為碳源。多數志賀菌不分解乳糖,但宋內志賀菌能遲緩發酵乳糖。
本屬菌有0抗原和K抗原,無H抗原。O抗原是分類的依據,K抗原可阻止0抗原與相應0抗體發生凝集,加熱後可消除此種阻抑作用。根據志賀菌0抗原構造的不同,可分為四群、39個血清型。我國以福氏痢疾桿菌多見,其次是宋內痢疾桿菌。
抗原結構
志賀菌屬主要有
菌體抗原(
O抗原)而無
鞭毛抗原(
H抗原),個別菌型及新分離菌株有K抗原。O抗原是分類的依據,分
群特異抗原和
型特異抗原,藉此將志賀菌屬分為4群(種)40餘
血清型(包括亞型)。K抗原在分類上無意義,但可阻止O抗原與O抗體的結合。從生物化學特性看,除A群外,B、C、D群
志賀菌均能發酵
甘露醇;除D群外,A、B、C群志賀菌均無
鳥氨酸脫羧酶。
A群:即
痢疾志賀菌。有10個血清型,其中8型尚可分3個亞型。是惟一不能發酵甘露醇的一群志賀菌。
B群:即福氏志賀菌。有13個血清型(包括變型和亞型),各型間有
交叉反應。
D群:即
宋內志賀菌。抗原單一,只有一個血清型。是惟一具有鳥氨酸脫羧酶的一群志賀菌,宋內志賀菌有I相和II相兩個交叉變異相。I相呈S型
菌落,對小鼠有致病力,多自急性期感染病人標本中分離得。II相為R型菌落,對小鼠不致病,常從慢性患者或
帶菌者檢出。
志賀菌的抵抗力比其他腸道桿菌弱,加熱60℃10min可被殺死。對酸和一般消毒劑敏感。在各群志賀菌中,以宋內志賀菌抵抗力最強。在糞便中,由於其他腸道菌產酸或噬菌體的作用常使本菌在數小時內死亡,故糞便標本應迅速送檢。但在污染物品及瓜果、蔬菜上,志賀菌可存活10—20d。在適宜的溫度下,可在水及食品中繁殖,引起水源或食物型的暴發流行。由於
磺胺及抗生素的廣泛套用,志賀菌的
多重耐藥性的問題日趨嚴重,給臨床治療帶來一定困難。
生化反應
試驗或培養基 | 志賀菌屬 |
| |
| V |
| + |
VP | - |
枸櫞酸鹽利用(西蒙氏) | - |
葡萄糖產酸(37℃) | - |
| - |
| V |
| V |
蔗糖 | V |
| - |
尿素酶 | - |
動力 | - |
| - |
賴氨酸脫羧酶 | - |
| -/+ |
| - |
| - |
KCN 抵抗力 | - |
| - |
| - |
| - |
| - |
| - |
D 山梨醇 | +/- |
| +/- |
| -/+ |
| V |
| - |
海藻糖 | + |
| - |
黏液酸鹽 | - |
| - |
ONPG | V |
(G + C) mol% | 49~53 |
注1:
+:90%~100%陽性;
-:0%~10%陰性;
+/-:大多數菌株陽性,少數陰性;
-/+:大多數菌株陰性,少數陽性;
V:種間有不同反應;
注2:
TSI(
三糖鐵培養基)上反應情況:斜面;底層/產氣;
硫化氫;
A=產酸(黃色),K=產鹼(紅色),+為陽性,-為陰性。
致病性
致病物質
所致疾病
微生物學檢驗
標本採集
儘可能在發病早期及治療前採集新鮮糞便,選擇
膿血便或
粘液便,必要時可用肛拭子採集。
檢驗方法及鑑定
生化鑑定
檢查麥康凱瓊脂平板,志賀氏菌的
菌落為淺粉紅色,半透明,將此可疑菌落接種於下列培養基中:葡萄糖肉湯,TSI瓊脂斜面,賴氨酸脫羧酶肉湯,動力試驗
瓊脂和胰腖。置35℃培養48h,但應在20h進行檢查,棄去所有有動力、產H2S、產氣、賴氨酸
脫羧以及發酵蔗糖與
乳糖的培養物。關於產生吲哚者,應棄去其44℃增菌物中的陽性培養物。至於42℃增菌培養中的所有可疑培養物皆有可能是陽性或是陰性,因此皆應予保留。
血清凝集法
志賀氏菌有 K和
O抗原而無
H抗原。K抗原是自患者新分離的某些菌株的菌體
表面抗原,不耐熱,加熱100℃1小時被破壞。K抗原在
血清學分型上無意義,但可阻止O抗原與相應
抗血清的
凝集反應。根據志賀氏菌抗原構造的不同,可分為四群48個
血清型(包括亞型)。
(1)A群:又稱
痢疾志賀氏菌(Sh.dysenteriae),通稱志賀氏痢疾桿菌。不發酵
甘露醇。有12個血清型,其中8型又分為三個亞型。
(2)B群:又稱福氏志賀氏菌(Sh.flexneri),通稱
福氏痢疾桿菌。發酵甘露醇。有15個血清型(含亞型及變種),抗原構造複雜,有群抗原和型抗原。根據型抗原的不同,分為6型,又根據群抗原的不同將型分為亞型;X、Y變種沒有特異性抗原,僅有不同的群抗原。
(3)C群:又稱鮑氏志賀氏菌(Sh.boydii),通稱鮑氏痢疾桿菌。發酵甘露醇,有18個
血清型,各型間無
交叉反應。
(4)D群:又稱宋內氏志賀氏菌(Sh.sonnei),通稱宋內氏痢疾桿菌。發酵
甘露醇,並遲緩發酵
乳糖,一般需要3~4天。只有一個血清型。有兩個變異相,即Ⅰ相和Ⅱ相;Ⅰ相為S型,Ⅱ相為R型。
取糞便(粘液或膿血部分)或肛拭標本接種GN肉湯增菌,增菌後進行
分離培養。一般同時接種強弱選擇性不同的兩個平板。強選擇
鑑別培養基可用沙門、
志賀菌選擇培養基(SS);若選擇診斷血清可選擇天津
生物晶片福氏志賀式多價診斷血清可疑
菌落進行鑑定。
挑選可疑菌落3~4個先用志賀菌屬多價診斷血清作試探性
玻片凝集試驗。將試探性
凝集試驗陽性的菌落至少接種2~3支KIA和MIU,經35 ℃培養18~24h,凡符合;KIA:K/A、產氣-/+、H2S-;MIU:動力-、吲哚+/-、尿酶-,並結合試探性玻片凝集試驗
陽性結果可鑑定為志賀菌屬。
核酸擴增法
核酸擴增技術,即
聚合酶鏈式反應(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是設計、合成兩條
寡核苷酸,作為引物,對應於待測病原微生物某一段特異性序列的兩端,然後在體外模擬DNA體內複製的過程反覆擴增,使靶序列放大上萬倍甚至上百萬倍而被檢測出來。
鑑別
防治原則