實驗者系列：蛋白質生物化學與蛋白質組學

在實驗中，你是否嚴格遵循標準流程卻一無所獲？你是否想改進你的工作？你想更多地了解某一研究領域的各種方法嗎？

基本介紹

• 書名：實驗者系列：蛋白質生物化學與蛋白質組學
• 作者：（德）雷姆
• ISBN：9787030182180
• 頁數：236
• 出版社：科學出版社
• 出版時間：2007年01月01
• 裝幀：精裝
• 開本：16開

內容簡介

或許“實驗者”叢書將對你有所幫助。　《實驗者系列：蛋白質生物化學與蛋白質組學》是“實驗者”系列中的一本，從權威人士的觀點，為你講述蛋白質生物化學和蛋白質組學研究的新方法。你能夠充分體會到作者飽嘗了實驗室的挑戰帶給他們的激動和沮喪。有了這些技巧和訣竅，你的實驗成功的幾率將更高。但這本頗有價值的實驗室手冊並非人是一部方法集錦：　它為你指明走出實驗困境的道路，培養你適時選擇正確實驗的直覺。　它簡潔明了地概括了常規方法（例如柱層析、凝膠電泳）的步驟，還列出了不同方法的優缺點。　它詳細介紹了配體結合實驗、抗體生產和微序列分析方面的進展。　它論述了一些特殊方法，例如膜蛋白的溶解和重組，糖蛋白分析，或寡聚體蛋白質亞基的確定。　其中一節對蛋白質組學進行了導向性說明。　不僅如此，與該系統其他書一樣，當你對自己產生了懷疑，不知自己為什麼做這一切的時候，這《實驗者系列：蛋白質生物化學與蛋白質組學》以振奮人心的坦誠，引導你走出“靈魂的深夜”。　《實驗者系列：蛋白質生物化學與蛋白質組學》適於生物化學與分子生物學、遺傳學、功能基因組學、蛋白質生物化學和蛋白質組學等生命科學相關領域的研究所、高校相關院系實驗室的教師、研究生、科研人員，以及生物技術企業的研發者和決策者參考使用。

目錄

前言

第四版前言

致謝

縮略語

1常規技術

1．1緩衝液的配製

1．2蛋白質定量

1．2．1BCA法

1．2．2Bradford法

1．2．3Lowry法

1．2．4Starcher法

1．2．5比色法測定蛋白質的濃度

1．3凝膠電泳

1．3．1SDS凝膠

1．3．2快捷法：無堆積膠的SDS凝膠電泳

1．3．3天然凝膠

1．4凝膠染色

1．4．1固定

1．4．2染色

1．4．3乾膠

1．5沉澱和濃縮

1．5．1變性沉澱

1．5．2天然沉澱

1．5．3濃縮

1．6印跡

1．6．1蛋白質印跡顯色

1．6．2封閉

1．6．3免疫顯色

1．6．4Ca2+結合

1．6．5配體顯色

1．7凝膠和印跡的放射自顯影

2配體結合

2．1放射性配體標記

2．1．1肽和蛋白質的碘化

2．1．2第二天——碘化過程的問題和對策

2．1．3低分子量分子的碘化

2．1．4碘化組分的純化

2．1．5碘化法的優點和缺點

2．1．6氚標記

2．2結合

2．2．1膜的分離

2．2．2結合實驗

2．2．3膜結合實驗

2．2．4膜結合實驗的改進

2．2．5可溶性蛋白的結合實驗

2．2．6無法結合

2．3結合數據的分析

2．3．1平衡態結合反應

2．3．2動力學

2．4配體交聯

2．4．1三組分交聯(3C交聯)

2．4．2光親和交聯

2．4．3交聯實驗的對照

2．5結合蛋白的用途

3膜蛋白的溶解

3．1去垢劑

3．1．1名詞解釋

3．1．2去垢劑的使用

3．2溶解

3．2．1溶解的標準

3．2．2溶解膜蛋白的物理參數

4通過功能測定檢測蛋白質

4．1轉運體

4．1．1脂質體

4．1．2蛋白脂質體

4．2膜蛋白的重組還原

4．2．1從溶液中重組

4．2．2重組人預先形成的脂質體

4．3通量實驗

4．3．1流入檢驗

4．3．2流出檢驗

4．4一些建設性的意見

5去除雜質和純化

5．1純粹娛樂——蛋白質純化的過程

5．2常規純化方法

5．2．1柱層析技術

5．2．2基於分子量差異的純化

5．2．3基於電荷差異的純化

5．2．4疏水層析

5．2．5藍色凝膠

5．3親和層析

5．3．1凝集素層析

5．3．2配體層析

5．4純度檢驗

5．5純化蛋白的作用

6抗體

6．1多克隆抗體的獲得

6．1．1抗原

6．1．2佐劑

6．1．3注射抗原和取血清

6．1．4抗體純化

6．2免疫沉澱

6．2．1利用固定化蛋白A進行免疫沉澱

6．2．2利用固定化抗體進行免疫沉澱

6．3免疫親和層析

6．4不純蛋白的抗體

6．5免疫學檢測技術

7蛋白質組學

7．1簡介

7．2取樣

7．3雙向凝膠電泳

7．4肽和蛋白質質譜

7．4．1質譜儀

7．4．2MALDI質譜的樣品製備

7．4．3MALDI和ESI質譜的用途

7．5蛋白質晶片

7．5．1套用SELDI技術的蛋白質晶片

7．5．2幸運餅乾——蛋白質晶片的可行性

7．5．3適配體

7．6微序列分析

7．6．1蛋白質樣品準備

7．6．2封閉的N-末端

7．6．3蛋白質裂解成肽段

7．6．4Edman降解

7．6．5羧基端序列分析

7．6．6肽段的階梯序列分析

7．7策略性的觀點

8亞基

8．1亞基的數量與比例

8．1．1關於確定亞基比例的難點

8．1．2X_射線結構解析確定亞基數量與比例

8．1．3雜交實驗確定亞基數量與比例

8．1．4交聯實驗確定亞基數量與比例

8．1．5胺基酸分析或抗體法確定亞基數量與比例

8．2什麼力量使我們在一起?——亞基問的結合

9糖蛋白

9．1蛋白質糖基化的方式、位點和作用

9．2凝膠電泳檢測糖蛋白

9．3印跡法檢測糖蛋白

9．3．1非選擇性糖蛋白顯色

9．3．2選擇性(凝集素)顯色

9．4脫糖基化

9．4．1糖基化抑制劑

9．4．2內切糖苷酶

9．4．3化學法脫糖基化

9．5糖鏈

9．5．1單糖組分

9．5．2結構與序列

10凝聚寶藏：論文的寫作

10．1關於論文

10．2關於論文寫作

11沙漠探險：文獻的調研

最後的話

附錄A 專業資源

A．1供應商

A．2產品供應商

索引